Background: This study was investigated the effects of culture media conditions on production of eggs fertilized in vitro of embryos from ovaries of high grade Korean native cow, Hanwoo. Methods: The IVMD 101 and IVF 100 were used for in vitro maturation of selected Hanwoo oocytes and In vitro embryo culture after in vitro fertilization, respectively. The IVMD 101 and IVD 101 were used for in vitro culture and completely free of serum. Results: The cleavage rates of 2-cell embryos in reference to Hanwoo oocytes were 86.7, 92.9, and 90.1 % in the control group, IVDM101 medium and IVD101 medium, respectively which indicates that the IVDM101 medium and IVD101 medium may result favorable outcomes. The in vitro development rates of blastocysts were 12.4, 38.4 and 32.4 % in the control group, serum free IVMD101 medium and IVD101 medium, respectively. For hatched blastocysts, it was 5.3, 33.9, and 28.6 % in the control group, serum free IVMD101 medium and IVD101 medium, respectively. Hence, more favorable results were expected for the hatched blastocysts in which the IVMD101 medium and IVD101 medium were used than the control group. Average cell numbers of blastocysts were 128.3, 165.7, and 163.6 in the groups of TCM-199 + 10 % FBS medium, IVMD 101 medium, and IVD 101 medium, respectively which clearly show that the IVMD 101 and IVD 101 medium consequence significantly higher cell numbers compared to the control group (i.e., TCM-199 +10 % FBS medium). Pregnancy rate after embryo transfer was 39.6 % when the serum free medium was used which is higher than that of the medium supplemented with serum (32.8 %). In addition, stillbirth rates were 4.9 % in the group of serum free medium whereas it was 13.6 % in the serum supplemented medium (13.6 %). Conclusions: Taken altogether, serum free media, the IVMD 101 and IVD 101 represented more favorable results in the embryo development rate of embryos, cell numbers of blastocyst, and pregnancy rate. Of note, the IVMD 101 medium showed better outcomes hence, it might be a better option for future applications for in vitro culture of bovine embryos.
The MRS medium is widely used as an optimized medium for the growth of Lactobacillus spp. and also used for the growth of Leuconostoc spp. Leuconostoc mesenteroides shows quite different physicochemical properties compared to Lactobacilli spp. and it is one of the major strain of kimchi fermenting microorganisms with its usefulness in our traditional foods and availability in biotechnology in the future, specifically tailor-made medium is necessary for the growth of Leuconostoc mesenteroides. Sequential experimental designs (Plackett-Burman, fractional factorial, steepest ascent, central composite design and response surface methodology) were introduced to optimize and improve the Leuconostoc medium. Fifteen medium ingredients were investigated and fructose, sodium acetate and ammonium citrate were determined to give a critical and positive effect for cell-growth. The yield of biomass using the optimal medium was improved more than that of the MRS medium and the result of fed-batch culture showed the capability of the improvement in cell mass similar to the E.coli system.
This research improved the growth potential of Bifidobacterium animalis subsp lactis strain JNU306, a commercial medium that is appropriate for large-scale production, in yeast extract, soy peptone, glucose, L-cysteine, and ferrous sulfate. Response surface methodology (RSM) was used to optimize the components of this medium, using a central composite design and subsequent analyses. A second-order polynomial regression model, which was fitted to the data at first, significantly lacked fitness. Thus, through further analyses, the model with linear and quadratic terms plus two-way, three-way, and four-way interactions was selected as the final model. Through this model, the optimized medium composition was found as 2.8791% yeast extract, 2.8030% peptone soy, 0.6196% glucose, 0.2823% L-cysteine, and 0.0055% ferrous sulfate, w/v. This optimized medium ensured that the maximum biomass was no lower than the biomass from the commonly used blood-liver (BL) medium. The application of RSM improved the biomass production of this strain in a more cost-effective way by creating an optimum medium. This result shows that B. animalis subsp lactis JNU306 may be used as a commercial starter culture in manufacturing probiotics, including dairy products.
Colton and Wendland [1] have considered acoustic wave propagations in a spherically symmetric medium. They used constructive method for in a spherically symmetric medium. They used constructive method for solving the exterior Neumann problem. Jones [2] has derived an integral equation for the exterior acoustic problem. Jones has also discussed analytical and numerical solution of the acoustic problem.
Eubacterium is one of the predominant bacteria in the human large intestine. currently ES (Eubacterium Selective) medium developed by T. Mitsuoka is commonly used as a selective medium. neomycin sulfate which is one of the selective agents of ES medium inhibited about 50% of the growth of Eubacterium isolated, whereas malidixic acid inhibited only 5% while inhibiting other intestinal bacteria. NES medium which replaced neomycin with nalidixic acid in the ES medium was designed and shown to be better for the isolation and enumeration of Eubacterium sp. than ES medium.
A modified Tris-buffered medium (mTBM) has been widely used as an insemination medium for porcine in vitro fertilization (IVF). We examined whether mTBM could be used for bovine IVF. Bovine cumulus-oocyte complexes (COCs) were cultured in a serum-free medium containing 30 ng/ml EGF for 22 h. After culture, COCs were inseminated with spermatozoa for 12 h in mTBM containing 5 mM caffeine and 10 g/ml heparin. The penetration of oocytes increased significantly (p<0.05) as the sperm concentration increased from 0.1 (30%) to 1-10 $(87-100%){\times}10^6$ cells/ml. This was significantly different from values obtained at 1 (87%) and 10 $(100%){\times}10^6$ cells/ml. However, when COCs were inseminated with spermatozoa from different bulls, the proportions (62-100%) of oocytes penetrated varied according to the bull. The proportion (18%) of oocytes penetrated was significantly (p<0.05) lower in a fertilization medium without caffeine and heparin but increased with the addition of caffeine and/or heparin to the medium, and the proportion (93-96%) of oocytes penetrated increased significantly (p<0.05) when the medium was supplemented with heparin and caffeine. In this medium, sperm penetration was first observed at 3 h after insemination. Irrespective of the presence of glucose in the fertilization medium, the proportion (93-97%) of oocytes penetrated and the proportion (83-84%) of embryos at the ${\geq}2$-cell stage cultured in a chemically defined medium were not significantly different. However, the proportion of embryos developing to the blastocyst stage was significantly (p<0.05) higher in the presence (11%) of glucose in the fertilization medium than in its absence (2%). In conclusion, the present study demonstrated that bovine oocytes penetrated in vitro in mTBM can develop to the blastocyst stage and mTBM may be used for the in vitro production of bovine embryos.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제5권2호
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pp.217-220
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2002
Mulberry being a foliage crop is grown extensively for feeding of silkworms and are also used for cattle feeding. These loaves are highly nutritious, which contain various mineral elements and bio-molecules such as carbohydrates, proteins, lipids and other essential amino acids, etc. In the present study, deproteinized mulberry leaf juice was used for preparation of the medium for cultivation of various types of microbes. Results revealed that deproteinized mulberry leaf juice medium is best for isolation of fungi, bacteria and actinomycetes and this medium can be substituted with synthetic media, which are haying the costly ingredients for isolation and identification of bacteria, fungi and actinomycetes. Further, this deproteinized mulberry juice medium can also be used in mass multiplication of useful/beneficial microbes to enhance soil microflora to improve soil fertility and to avoid root diseases. Perspective enterprises can take up the mass multiplication/large-scale production of useful microbes such as Trichoderma, Rhizobium, Pseudomonas and Bacillus to use in mulberry and in other agricultural crops using deproteinized mulberry leaf juice.
DagA, a ${\beta}$-agarase, was produced by cultivating a recombinant Streptomyces lividans in a glucose medium or a mixed-sugar medium simulating microalgae hydrolysate. The optimum composition of the glucose medium was identified as 25 g/l glucose, 10 g/l yeast extract, and $5g/l\;MgCl_2{\cdot}6H_2O$. With this, a DagA activity of 7.26 U/ml could be obtained. When a mixed-sugar medium containing 25 g/l of sugars was used, a DagA activity of 4.81 U/ml was obtained with very low substrate utilization efficiency owing to the catabolic repression of glucose against the other sugars. When glucose and galactose were removed from the medium, an unexpectedly high DagA activity of about 8.7 U/ml was obtained, even though a smaller amount of sugars was used. It is recommended for better substrate utilization and process economics that glucose and galactose be eliminated from the medium, by being consumed by some other useful applications, before the production of DagA.
The effect of culture medium copper availability on the specific growth rate(${\mu}$) and carbon conversion efficiency (CCE) was sutided for an obligatory methanotroph Methylosinus trichosporium OB3b under various combinations of carbon and nitrogen sources. Methane or methanol was used as a carbon source, and nitrate or ammonium was used as a nitrogen source. Medium copper availability determined the intracellular location or kind of methane monooxygenase (MMO), cell-membrane (particulate or pMMO) when copper was present and cytoplasm (soluble or sMMO) when copper was deficient. When methane was used as a carbon source, copper-containing medium exhibited higher ${\mu}$ and CCE than copper-free medium regardless of the kind of nitrogen source. When methanol was used as a carbon source, however, the effect of copper disappeared. Ammonium gave the higher ${\mu}$ and CCE than nitrate for both methane and methanol. Those observation suggest that there exist an important difference in energy utilization efficiency for methane assimilation between sMMO and pMMO.
The influences of pretreatment medium, the addition of fresh medium, and the size of culture plate on the production of embryos were investigated in isolated microspore culture of hot pepper (Capsicum annuum L.). Among the media used for heat shock pretreatment ($32{\pm}1{^{\circ}C}$), high frequency embryo production was obtained when the sucrosestarvation medium A was used. On the other hand, neither 0.37 M mannitol solution nor NLNS medium supplemented with sucrose was not efficient for embryo production. The addition of culture medium to pretreatment media considerably decreased the embryo production even though embryo development proceeded further. The embryo production was not improved by the addition of fresh medium after 2 or 3 weeks from starting culture. Increase in the size of the culture plate from $3.5{\times}1.0$ cm to $6.0{\times}1.5$ cm improved embryo quality. These results will provide valuable information for developing an efficient microspore culture system of hot pepper for high frequency embryo production.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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