The gene encoding Thermus thermophilus HJ6 laccase (Tt-laccase) was cloned, sequenced, and comprised of 1,389 nucleotides encoding a protein (462 amino acids) with a predicted molecular mass of 51,049 Da. The deduced amino acid sequence of Tt-laccase showed 99.7% and 44.3% identities to the Thermus thermophilus HB27 laccase and Synechococcus sp. RS9917 laccase, respectively. Tt-laccase gene was expressed as a fusion protein with six histidine residues in E. coli Rosetta-gami (DE3) cells, and the recombinant protein was purified to homogeneity. UV-Vis spectrum analysis revealed that the enzyme has copper atoms, a type I Cu(II) and a type III binuclear Cu(II). The optimum pH for the oxidation of guaiacol was 5.0 and the optimum temperature was $90^{\circ}C$ The half-life of heat inactivation was about 120 min at $90^{\circ}C$ The enzyme reaction was inhibited by sodium azide, L-cystein, EDTA, dithiothreitol, tropolone, and kojic acid. The enzyme oxidized various known laccase substrates, its lowest $K_m$ value being for 4-hydroxyindole, highest $k_{cat}$ value for syringaldazine, and highest $k_{cat}/K_m$ for guaiacol.
AlNO multi-layer thin films on aluminum substrates were prepared by DC reactive magnetron sputtering method. $Al_2O_3$/AlNO(LMVF)/AlNO(HMVF)/Al/substrate of 4 multi-layer has been prepared in an Ar and ($N_2+O_2$) gas mixture, and $Al_2O_3$ of top layer is anti-reflection layer on double AlNO(LMVF)/AlNO(HMVF) layers and Al metal of infrared reflection layer. In this study, the roughness and surface properties of AlNO thin films were estimated by field emission scanning electron microscopy(FE-SEM). The grain size of AlNO thin films increased with increasing sputtering power. The composition of thin films has been systematically investigated using electron probe microanalysis(EPMA). The optical properties with wavelength spectrum were recorded by UV-Vis-NIR spectrophotometry at a range of 200~1,500 nm. The absorptance of AlNO films shows the increasing trend with swelling ($N_2+O_2$) gas mixture in HMVF and LMVF deposition. The excellent optical performance showed above 98% of absorptance in visible wavelength region.
The synthesis of gold nanoparticles has gained tremendous attention owing to their immense applications in the field of biomedical sciences. Although several chemical procedures are used for the synthesis of nanoparticles, the release of toxic and hazardous by-products restricts their use in biomedical applications. In the present investigation, gold nanoparticles were synthesized biologically using the culture filtrate of the filamentous fungus Alternaria sp. The culture filtrate of the fungus was exposed to three different concentrations of chloroaurate ions. In all cases, the gold ions were reduced to Au(0), leading to the formation of stable gold nanoparticles of variable sizes and shapes. UV-Vis spectroscopy analysis confirmed the formation of nanoparticles by reduction of Au3+ to Au0. TEM analysis revealed the presence of spherical, rod, square, pentagonal, and hexagonal morphologies for 1 mM chloroaurate solution. However, quasi-spherical and spherical nanoparticles/heart-like morphologies with size range of about 7-13 and 15-18 nm were observed for lower molar concentrations of 0.3 and 0.5 mM gold chloride solution, respectively. The XRD spectrum revealed the face-centered cubic crystals of synthesized gold nanoparticles. FT-IR spectroscopy analysis confirmed the presence of aromatic primary amines, and the additional SPR bands at 290 and 230 nm further suggested that the presence of amino acids such as tryptophan/tyrosine or phenylalanine acts as the capping agent on the synthesized mycogenic gold nanoparticles.
Kumar, C. Ganesh;Mamidyala, Suman Kumar;Das, Biswanath;Sridhar, B.;Devi, G. Sarala;Karuna, Mallampalli SriLakshmi
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제20권7호
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pp.1061-1068
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2010
The biological synthesis of nanoparticles has gained considerable attention in view of their excellent biocompatibility and low toxicity. We isolated and purified rhamnolipids from Pseudomonas aeruginosa strain BS-161R, and these purified rhamnolipids were used to synthesize silver nanoparticles. The purified rhamnolipids were further characterized and the structure was elucidated based on one- and two-dimensional $^1H$ and $^{13}C$ NMR, FT-IR, and HR-MS spectral data. Purified rhamnolipids in a pseudoternary system of n-heptane and water system along with n-butanol as a cosurfactant were added to the aqueous solutions of silver nitrate and sodium borohydride to form reverse micelles. When these micelles were mixed, they resulted in the rapid formation of silver nanoparticles. The synthesized nanoparticles were characterized by UV-Visible spectroscopy, transmission electron microscopy, and energy dispersive X-ray spectroscopy (EDS). The nanoparticles formed had a sharp adsorption peak at 410 nm, which is characteristic of surface plasmon resonance of the silver nanoparticles. The nanoparticles were monodispersed, with an average particle size of 15.1 nm (${\sigma}={\pm}5.82$ nm), and spherical in shape. The EDS analysis revealed the presence of elemental silver signal in the synthesized nanoparticles. The formed silver nanoparticles exhibited good antibiotic activity against both Grampositive and Gram-negative pathogens and Candida albicans, suggesting their broad-spectrum antimicrobial activity.
Marasmius scorodonius secretes an extracellular laccase in potato dextrose broth, and this enzyme was purified up to 206-fold using $(NH_4)_2SO_4$ precipitation and a Hi-trap Q Sepharose column. The molecular mass of the purified laccase was estimated to be ~67 kDa by SDS-PAGE. The UV/vis spectrum of the enzyme was nontypical for laccases, and metal content analysis revealed that the enzyme contains 1 mole of Fe and Zn and 2 moles of Cu per mole of protein. The optimal pH for the enzymatic activity was 3.4, 4.0, and 4.6 with 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothazoline-6-sulfonate) (ABTS), guaiacol, and 2,6-dimethoxy phenol as the substrate, respectively. The optimal temperature of the enzyme was $75^{\circ}C$ with ABTS as the substrate. The enzyme was stable in the presence of some metal ions such as $Ca^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Ni^{2+}$, $Mg^{2+}$, $Mn^{2+}$, $Ba^{2+}$, $Co^{2+}$, and $Zn^{2+}$ at a low concentration (1 mM), whereas $Fe^{2+}$ completely inhibited the enzymatic activity. The enzymatic reaction was strongly inhibited by metal chelators and thiol compounds except for EDTA. This enzyme directly decolorized Congo red, Malachite green, Crystal violet, and Methylene green dyes at various decolorization rates of 63-90%. In the presence of 1-hydroxybenzotriazole as a redox mediator, the decolorization of Reactive orange 16 and Remazol brilliant blue R was also achieved.
In the present work, we describe a simple, cheap, and unexplored method for "green" synthesis of silver nanoparticles using cell extracts of the cyanobacterium Anabaena doliolum. An attempt was also made to test the antimicrobial and antitumor activities of the synthesized nanoparticles. Analytical techniques, namely UV-vis spectroscopy, X-ray diffraction, Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy, transmission electron microscopy (TEM), and TEM-selected area electron diffraction, were used to elucidate the formation and characterization of silver-cyanobacterial nanoparticles (Ag-CNPs). Results showed that the original color of the cell extract changed from reddish blue to dark brown after addition of silver nitrate solution (1 mM) within 1 h, suggesting the synthesis of Ag-CNPs. That the formation Ag-CNPs indeed occurred was also evident from the spectroscopic analysis of the reaction mixture, wherein a prominent peak at 420 nm was noted. TEM images revealed well-dispersed, spherical Ag-CNPs with a particle size in the range of 10-50 nm. The X-ray diffraction spectrum suggested a crystalline nature of the Ag-CNPs. FTIR analysis indicated the utilization of a hydroxyl (-OH) group in the formation of Ag-CNPs. Ag-CNPs exhibited strong antibacterial activity against three multidrug-resistant bacteria. Additionally, Ag-CNPs strongly affected the survival of Dalton's lymphoma and human carcinoma colo205 cells at a very low concentration. The Ag-CNPs-induced loss of survival of both cell types may be due to the induction of reactive oxygen species generation and DNA fragmentation, resulting in apoptosis. Properties exhibited by the Ag-CNP suggest that it may be used as a potential antibacterial and antitumor agent.
Polymer based organic photovoltaics have attracted a great deal of attention due to the potential cost-effectiveness of light-weight and flexible solar cells. However, most BHJ polymer solar cells are not thermally stable as subsequent exposure to heat drives further development of the morphology towards a state of macrophase separation in the micrometer scale. Here we would like to show three different approaches for developing new electroactive polymers to improve the thermal stability of the BHJ solar cells, which is a critical problem for the commercialization of these solar cells. For one of the examples, we report a new series of functionalized polythiophene (PT-x) copolymers for use in solution processed organic photovoltaics (OPVs). PT-x copolymers were synthesized from two different monomers, where the ratio of the monomers was carefully controlled to achieve a UV photo-crosslinkable layer while leaving the ${\pi}-{\pi}$ stacking feature of conjugated polymers unchanged. The crosslinking stabilizes PT-x/PCBM blend morphology preventing the macro phase separation between two components, which lead to OPVs with remarkably enhanced thermal stability. The drastic improvement in thermal stabilities is further characterized by microscopy as well as grazing incidence X-ray scattering (GIXS). In the second part of talk, we will discuss the use of block copolymers as active materials for WOLEDs in which phosphorescent emitter isolation can be achieved. We have exploited the use of triarylamine (TPA) oxadiazole (OXA) diblock copolymers (TPA-b-OXA), which have been used as host materials due to their high triplet energy and charge-transport properties enabling a balance of holes and electrons. Organization of phosphorescent domains in TPA-b-OXA block copolymers is demonstrated to yield dual emission for white electroluminescence. Our approach minimizes energy transfer between two colored species by site isolation through morphology control, allowing higher loading concentration of red emitters with improved device performance. Furthermore, by varying the molecular weight of TPA-b-OXA and the ratio of blue to red emitters, we have investigated the effect of domain spacing on the electroluminescence spectrum and device performance.
가시오갈피 유식물체의 함유성분을 밝히고, 분리된 화합물들을 대상으로 DPPH를 이용한 항산화활성을 측정하여 대체 약용자원으로서의 사용 가능성을 검토하기 위하여 가시오갈피 유식물체를 MeOH로 추출, 농축하고 Hexane, EtOAc 및 BuOH순으로 분획하여 얻은 각각의 분획을 대상으로 성분연구에 착수하였다. 각종 column chromatography를 이용하여 성분을 분리한 결과 EtOAc분획으로부터 1종의 화합물을 분리하였고, BuOH 분획으로부터 1종의 화합물을 분리하였다. 이들 화합물에 대하여 UV, IR, Mass, $^1H-NMR$ 및 $^{13}C-NMR$ spectrum과 문헌치를 대조하여 그 구조를 동정한 결과그 구조는 각각 Chlorogenic acld (1)과 1,4-di-O-caffeoyl-quinic acid (2)이였다. DPPH (1,1-diphenyl-2-picry-hydrazyl) free radical scavenging activity를 이용하여 측정한 항산화활성의 $RC_{50}$ value는 각각 1.2 및 $0.4\;{\mu}g/ml$였다. 이상의 결과로부터 가시오갈피 유식물체 (Eleutherococcus senticosus Max.)는 천연 항산화제로서의 개발가능성이 높다고 사료된다.
Objectives : The aim of this study is to investigate the safety of Acupuncture needles made from duplex stainless steel. Methods : In order to check the safety concern of the DSS Acupuncture needle, we employed biochemical measures, DSS and SS304 Acupuncture needles were tested for pH level, heavy metals and UV absorbance spectrum along with cytotoxicity and hemolysis. As a guideline, we have referred to the 'standards for acupuncture needles', 'standards for disposable needles' and 'standards and experimental procedures for stents' for the Korean Food & Drug Administration(KFDA). Results & Conclusions : The DSS Acupuncture needle extract satisfied these requirements. There was no significant difference between the DSS and SS304 Acupuncture needle extract. In conclusion, the DSS Acupuncture needle displayed biochemical safety.
주파수 위상 간섭계를 이용한 전기장 재구성 방법(SPIDER)을 이용하여 Kerr 렌즈 모드록킹된 티타늄 사파이어 레이저 공진기에서 생성된 펨토초 영역의 극초단 펄스의 펄스폭과 위상을 측정하였다. 8cm 길이의 SF10 매질과 마이켈슨형의 시간지연암(arm)을사용하여 주파수 층밀림(shearing)을 구현하고 제2종 BBO결정으로 합주파수 발생을 시켜 SPIDER 장치를 구성 하였다 얻어진 층밀림 주파수 간섭 신호로부터 SPIDER 알고리즘을 이용하여 펄스의 전기장을 복원하였다 SPIDER의 정확도를 확인하기 위해 SPIDER에서 얻은 펄스로 재구성한 간섭형 자체상솬신호를 직접 측정한 간섭형 자체상관 신호와 비교하였다. SPIDER를 티타늄 사파이어 레이저 공진기에 적용하여 19fs의 펄스폭을 얻었으며 sech$^2$나 가우시안으로 가정한 간섭형 자체상관의 결과는 이보다 작은 값으로 나타나서 펨토초 레이저의 정확한 펄스폭 측정을 위해서는 펄스모양의 가정이 필요없는 SPIDER 방법이 필요함을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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