스트레스는 교감신경계와 부신을 활성화시킨다. 본 연구에서는 고염식이가 흰 생쥐의 부신수질에 미치는 영향을 tyrosine hydroxylase (TH) 면역염색법과 투과 전자현미경을 이용한 미세구조적 관찰로 규명하였다. 1. 부신수질의 TH 면역반응은 고염식이 후 증가하였으며 특히 고염식이를 4주간 시행한 경우보다 4일간 시행한 흰 생쥐에서 더 강하게 관찰되었다. 2. TH 면역반응은 부신수질을 구성하는 세포들 중 노르아드레날린 세포의 세포질과 과립들에서 주로 나타났다. 3. 고염식이를 시행한 흰 생쥐 부신수질의 노르아드레날린 세포에서는 세포질 내에 비어있는 공간들, 분비과립이 팽대되어 과립 내 물질이 한 쪽으로 치우친 형태 및 손상된 미토콘드리아등의 특징들이 관찰되었다. 이와 같은 결과는 고염식이가 스트레스를 유발하는 요인이 될 수 있음을 시사해준다.
가족연구, 쌍생아연구, 양자연구 등은 정신분열병의 발생에 유전적 원인이 작용하고 있음을 보여주고 있으며, 생화학적 연구들은 도파민이 중요한 역할을 하는 것으로 보고하고 있다. 한편, tyrosine hydroxylase(TH)는 도파민의 생성에 속도제한효소로 중요한 작용한다. 따라서 본 연구에서는 TH의 유전적 다형성과 정신분열병의 발생, 임상아형 등과의 관련연구를 시행하였다. 환자군은 가톨릭대학교 강남성모병원에 입원하였던 환자중 정신장애 진단 및 통계를 위한 편람 III-R의 진단기준에 의하여 정신분열병으로 진단된 환자로 신경과 질환이나 다른 정신과적 질환이 없는 374명을 대상으로 하였으며, 대조군은 강남성모병원에서 근무하는 직원, 가톨릭대학교 의과대학생, 그리고 강남성모병원 건강진단센터를 방문한 사람중 지원자를 대상으로 하여 393명을 포함하였다. TH 대립유전자의 분포는 환자군과 대조군 사이에 유의한 차이를 보이지 않았으나, 환자군에서는 양성군인 경우 대립유전자 A형의 빈도가 음성군에 비해 높은 것으로 나타났다. 또한 대립유전자 A형을 가지고 있는 환자군은 A형을 가지고 있지 않은 환자군 보다 유의하게 양성증상점수가 높은 것으로 나타났다. 이상의 결과들은 정신분열병의 양성증상과 TH 대립유전자 A형이 관련되어 있음을 시사해 준다고 하겠다.
A large number of chemical pollutants including phthalates, alkylphenolic compounds and organochlorine pesticides have the ability to disrupt endocrine function in animals, and alter cog-nitive function. Because hormone mediated events play an important role in central nervous system development and function, the changes in cognitive function seem to be mediated by the endocrine-like action of these chemicals. The present study therefore was designed to investigate effect of bisphenol A (BPA), an endocrine disrupting chemical on neuro-behavial patterns, and expression of estrogen receptors and tyrosine hydroxylase, a limiting enzyme of dopamine synthesis pathway. BPA was treated orally for 3 weeks into 3 week old mice, and then the neuro-behavial patterns (stereo-type behaviors such as jumping rearing and forepaw tremor, climbing behavior, tail flick, rotarod and locomotor activity), and the expression of estrogen receptors and tyrosine hydroxylase were deter-mined every 3 week for 9 weeks. During the treatment of BPA, the food uptake and body weight increase were not significantly changed. BPA resulted in the increased stereotype behaviors (jump-ing, rearing and forepaw tremor) 6 or 9 weeks after treatment. The time response to tail flick and locomotor activity were decreased by the treatment of BPA, whereas the time for rotarod was increased by the treatment of BPA. The expression of estrogen receptor alpha and beta was increased in the brain and pituitary gland. Maximum expression was found in the brain after 9 week of 100 mg/kg BPA treatment and in the pituitary gland after 6 week of 100 mg/kg BPA treatment. Tyrosine hydroxylase was increased in dose and time dependent manners in the brain but no change was found in the pituitary gland. The present data show that exposure of BPA in the young mice could alter expression of estrogen receptors and dopamine synthesis pathway, thereby modulate neuro-behavial patterns (increase of stereotype behaviors but decrease locomotor activity).
DNA transfection conditions were investigated by calcium phosphate-DNA co-precipitation in SK-N-BE(2)C human neuroblastoma cells. The DNA plasmid of TH2400CAT was used in which rat tyrosine hydroxylase gene was inserted into chloramphenicol acetyltransferase reporter gent. The transfection efficiency was 25-30% and the method was simple and reproducible. So, the method will be a good tool for transient transfection analysis.
The effects of harman and norharman on dopamine content and L-DOPA-induced cytotoxicity were investigated in PC12 cells. Harman and norharman decreased the intracellular dopamine content for 24 h. The $IC_{50}$ values of harman and norharman were 20.4 ${\mu}M$ and 95.8 ${\mu}M$, respectively. Tyrosine hydroxylase (TH) activity and TH mRNA levels were also decreased by 20 ${\mu}M$ harman and 100 ${\mu}M$ norharman. Under the same conditions, the intracellular cyclic AMP levels were decreased by harman and norharman. In addition, harman and norharman at concentrations higher than 80 ${\mu}M$ and 150 ${\mu}M$ caused cytotoxicity at 24 h in PC12 cells. Non-cytotoxic ranges of 10-30 ${\mu}M$ harman and 50-150 ${\mu}M$ norharman inhibited L-DOPA (20-50 ${\mu}M$)-induced increases of dopamine content at 24 h. Harman at 20-150 ${\mu}M$ and norharman at 100-300 ${\mu}M$ also enhanced LDOPA (20-100 ${\mu}M$)-induced cytotoxicity at 24 h. These results suggest that harman and norharman decrease dopamine content by reducing TH activity and aggravate L-DOPA-induced cytotoxicity in PC12 cells.
Fluoranthene, a common polycyclicaromatic hydrocarbon (PAH), exhibits phototoxicity which may affect aquatic organisms. The eventual goal of this study is to develop a biomarker of Japanese medaka (Oryzias latipes) used in monitoring hazardous chemicals in the ecosystem. In this study we investigated neural toxicity of fluoranthene in Japanese medaka (Oryzias latipes) along with comparative analysis of corresponding behavioral response. The untreated individuals shooed normal behavioral characteristics (i. e., smooth and linear movements). The treated fish, however, showed stopping and abrupt change of orientation (100 ppb), and severely reduced locomotive activity and enhanced surfacing activity (1,000 ppb). Treatment of the medaka fish with fluoranthene caused a significant suppresson of acetycholine esterase (AChE) activities in the body portion but not in the head portion. When fish were exposed to 1,000 ppb of fluoranthene for 24 hr, the body AChE activities decreased from 126.${\pm}$31.89 (nmoles substrate hydrolyzed per min per mg protein) to 49.51${\pm}$11.99. Expressions of tyrosine hydroxylase (TH) protein in the different organs from both head and body portions were comparatively analyzed using an immunohistochemical technique. Five organs of the medaka fish showing a strong TH protein expression were the olfactory bulb, hypothalamus, optic lobe, pons and myelencephalon regions. This study provides molecular and neurobehavioral bases of a biomonitoring system for toxic chemicals using fish as a model organism.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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