Objective : Siegesbeckia Herba can treat various skin disease by expelling wind and removing dampness and clearing away heat and toxic material effects. This study was designed to investigate effects of Siegesbeckia Herba Extracts(SHE) on skin elasticity and whitening using B16F10 cell lines. Method : In this experiment, We observed effect of SHE on cell viability, inhibition of melanin synthesis and inhibitory effect on tyrosinase and elastase. Results : 1. SHE treated group showed decreased cell viability rates significantly compared with non-treated group. More than SHE $250{\mu}g/ml$, $500{\mu}g/ml$ and $1,000{\mu}g/ml$ of treated groups were lower levels of melanin synthesis respectively. 2. SHE significantly showed tyrosinase inhibitory activity in vitro, SHE increased tyrosinase inhibitory activity and elastase inhibitory activity in B16F10 cells, and tyrosinase inhibitory activity in vitro. 3. Tyrosinase inhibitory activity and elastase inhibitory activity in B16F10 cells, tyrosinase inhibitory activity in vitro were not accepted statistical significance compared with non-treated group. 4. SHE treated group showed increased SOD-like activity rates significantly compared with non-treated group. More than SHE $250{\mu}g/ml$, $500{\mu}g/ml$ and $1,000{\mu}g/ml$ of treated groups were lower levels of melanin synthesis respectively. Conclusion : These results suggest that SHE can inhibit melanin synthesis and tyrosinase inhibtory activity. So, We suggest that SHE can be maintained skin whitening.
최근에는 hyper-pigmentation에 대한 제품 개발을 위해 melanogenesis의 경로에 대한 이해를 위해 많은 노력을 하고 있다. 이에 따라 본 연구에서는 만형자(Vitex rotundifolia)의 depigmentation에 대한 효과를 조사하였다. B16F10 mouse melanoma cell을 이용하여 tyrosinase, MITF, TRP-1, TRP-2 그리고 melanin synthesis의 저해를 확인하였고, 만형자 ethyl acetate 분획물(VR-EA)을 처리하였을 때 농도의존적으로 감소한다는 것을 알 수 있었다. 특히, VR-EA는 tyrosinase와 TRP-1의 경우 각각 53.2, 88.4%의 저해율을 보여 미백에 있어서 효과적인 활성을 보여주었다. 따라서 만형자는 melanin synthesis를 효과적으로 막아주어 미백소재로서 활용 가능성이 충분하다고 사료된다.
한방생약자원으로 사용되는 가죽나무(A. altissima)의 생리학적 활성을 조사하고자 뿌리와 줄기, 잎을 에탄올을 용매로 추출하여 농도에 따라 전자공여능, SOD유사활성, 아질산염 소거능을 측정하였으며, xanthine oxidase와 tyrosinase 저해 활성을 측정하였다. 전자공여능은 $1,000{\mu}g/mL$의 농도에서 뿌리와 줄기 추출물이 64.04%와 63.27%이었으며, 잎 추출물은 17.47%를 나타내었다. SOD 유사활성능은 $7.66%{\sim}50.00%$로 잎 추출물이 뿌리와 줄기에 비해 약 5배 이상 높았고, 아질산염 소거능에 있어서도 가죽나무 잎 추출물이 $1,000{\mu}g/mL$의 농도에서 pH 1.2와 3.0에서 98%이상의 높은 소거효과를 나타내었으며 $500{\mu}g/mL$의 농도에서도 90% 이상의 소거효과를 나타내었다. Xanthine oxidase저해 활성은 $1,000{\mu}g/mL$ 농도에서 뿌리와 줄기, 잎 추출물 모두에서 90% 이상의 저해율을 보였고, tyrosinase저해는 $2,000{\mu}g/mL$의 농도에서 뿌리 추출물이 62.01%로 가장 높은 저해효과를 나타내었으며, $100{\mu}g/mL$의 농도에서도 57.70%의 저해 활성을 나타내었다. 그러므로 가죽나무는 한방생약자원으로 이용되는 뿌리(저근백피) 이외에도 잎은 높은 SOD 유사활성능과 아질산염 소거능을 나타내며 줄기에서도 뿌리보다 높은 전자공여능과 아질산염 소거능 및 유사한 xanthine oxidase 저해 활성을 나타내므로 유용한 한방생약자원인 것으로 판단된다.
In the present study, the antioxidative and inhibitory activity of Zingiber officinale Rosc. Rhizomes-derived materials (on mushroom tyrosinase) were evaluated. The bioactive co mponents of Z. officinale rhizomes were characterized by spectroscopic analysis as zingerone and dehydrozingerone, which exhibited potent antioxidant and tyrosinase inhibition activities. A series of substituted dehydrozingerones [(E)-4-phenyl-3-buten-2-ones] were prepared in admirable yields by the reaction of appropriate benzaldehydes with acetone and the products were evaluated in terms of variation in the dehydrozingerone structure. The synthetic analogues were examined for their antioxidant and antityrosinase activities to probe the most potent analogue. Compound 26 inhibited Fe$^{2+}$-induced lipid peroxidation in rat brain homogenate with an IC$_{50}$ = 6.3${\pm}$0.4 ${\mu}$M. In the 1,1-diphenyl- 2-picrylhydrazyl (DPPH) radical quencher assay, compounds 2, 7, 17, 26, 28, and 29 showed radical scavenging activity equal to or higher than those of the standard antioxidants, like ${\alpha}$-tocopherol and ascorbic acid. Compound 27 displayed superior inhibition of tyrosinase activity relative to other examined analogues. Compounds 2, 17, and 26 exhibited non-competitive inhibition against oxidation of 3,4- dihydroxyphenylalanine (L-DOPA). From the present study, it was observed that both number and position of hydroxyl groups on aromatic ring and a double bond between C-3 and C-4 played a critical role in exerting the antioxidant and antityrosinase activity.
The crocetin derivatives, crocin (1), gentiobiosyl glucosyl crocetin (3), and mono-gentiobiosyl crocetin (4) were isolated from the fruit of Gardenia jasminoides (Gj) and crocetin (2) from the processed fruit of Gj (PGj) by column chromatography. Their structures were determined on the basis of spectroscopic methods including IR, MS, and NMR (1D and 2D). These compounds were evaluated for their inhibition activity on melanin production in ${\alpha}$-MSH (melanocyte stimulating hormone) activated B16F10 cells. Compounds 1 - 4 reduced melanin content in a dose-dependent manner at concentrations of 20 - 60 uM. They also suppressed tyrosinase protein and m-RNA expressions dose dependently, assayed by western blot analysis, and RT-PCR experiment in B16F10 murine melanoma cells.
천연미백소재를 개발하기 위하여 대산(마늘)을 포함한 총10종의 약용식물 혼합물을 발효하여 얻은 발효물로부터 tyrosinase inhibition 활성을 확인하고, 이로부터 신규한 화합물 1종 외 3종의 활성 성분을 분리하였다. 마늘복합발효물의 영양성분 13항목을 분석하여 기능성 식품 소재로의 활용가능성을 확인하였다. 발효원액의 tyrosinase 저해효과는 88.6%로 나타났고, 활성성분의 분리를 위하여 EtOAc, n-BuOH 및 H2O로 분배, 추출하였다. 이중 수득률이 가장 높은 EtOAc 분획물(47g)로부터 silica gel 및 ODS column chromatography를 반복하면서 TLC와 효소저해 효과로부터 확인한 활성분획을 순차적으로 분리하였다. 화합물의 화학구조를 NMR 및 MS 등의 스펙트럼으로 분석한 결과 phenylpropanoid류의 신규 화합물인 2,4,5-trihydroxy-benzenepropanoic acid (1) (1.9 mg) 및 화합물 1과 동량으로 혼재하는 2,3,5-trihydroxy-benzenepropanoic acid (2)를 확인하였다. 이외에 2,4-dihydroxy-hydrocinnamic acid (3) (3.3 mg) 및 (+)sesamin (4) (6.1 mg)을 분리·동정하였다. 이 화합물들이 향후 본 조성물의 지표성분 및 기능성 성분으로 활용된다면 기업에서의 원천기술 확보를 통한 제품개발과 산업화에 매우 유용할 것으로 사료된다.
구릿대(A. dohurica) 잎의 항산화성과 생리활성을 탐색하기 위하여 물과 에탄올을 용매로 환류 추출방법과 가압열수 추출방법으로 만든 각 추출물에 대하여 폴리페놀의 함량을 측정하였으며, 구릿대 잎의 항산화성을 알아보기 위하여 전자공여능, SOD 유사활성능, 아질산염 소거능을 측정하였다. 또한 xanthine oxidase 및 tyrosinase 저해 활성을 측정하여 구릿대의 생리활성에 대하여 분석하였다. 폴리페놀의 총 함량은 가압 열수 추출물(PW; 95.23 mg/g)>환류 에탄올 추출물(RE; 69.81 mg/g)>환류 물 추출물(RW;41.06 mg/g)으로 PW가 RW 보다 2배 이상 많은 폴리페놀을 함유하였다. 전자공여능은 $1,000{\mu}g/mL$의 농도에서 $61.14%{\sim}76.02%$로 에탄올 추출물인 RE가 가장 높았으며, SOD 유사활성능도 19.00%로 가장 높았다. $pH\;1.2,\;1,000{\mu}g/mL$의 농도조건에서 아질산염 소거능은 $44.24%{\sim}54.33%$로 PW에서 가장 높은 소거활성을 나타내었다. Xanthine oxidase 저해율은 $5,000{\mu}g/mL$의 농도에서 97% 이상이었으며, 특히 환류 물 추출물인 RW는 $500{\mu}g/mL$의 농도에서도 97% 이상의 높은 저해 효과를 나타내었으며, PW에서도 90% 이상의 저해율을 나타내었다. Tyrosinase 저해율은 $5,000{\mu}g/mL$의 농도에서 $23.88%{\sim}46.25%$로 RE의 저해율이 가장 높은 것으로 분석되었으며, $5,000{\mu}g/mL$의 농도에서도30% 이상의 저해효과를 나타내었다. 이상의 결과로 보아 구릿대 잎의 가압 열수 추출물은 다른 추출물에 비해 많은 폴리페놀을 추출할 수 있으며, 높은 아질산염 소거효과를 나타내었다. 환류 에탄올 추출물은 다른 추출물에 비해 높은 전자공여능, SOD 유사활성능, 그리고 tyrosinase 저해효과를 나타내는 것으로 분석되었다. 따라서 구릿대 잎은 식품 첨가물 및 화장품 원료로 사용할 수 있는 좋은 생물자원으로 판단된다.
The primary objective of this study was to assess the in vitro melanogenesis inhibitory effects of methanolic extracts of the edible and medicinal lichens, Umbilicaria (Gyrophora) esculenta and Usnea longissima. The quantities of the total phenolic compounds of methanolic extract of the two lichen extracts were determined to be 1.46% and 2.62%, respectively. In order to evaluate the antioxidative effects of the extracts, we also measured electron donating abilities (EDA) and lipid peroxidation rates. The EDA values measured by the reduction of 1.1'-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) were 72.8% and 80.7% for the extracts, with $SC_{50}$ (median scavenging concentration) values of $1.29{\pm}0.05\;mg/ml$ and $1.03{\pm}0.06\;mg/ml$, respectively. The rates of inhibition of lipid peroxidation using linoleic acid were 92.1% and 97.3% for the extracts, with $IC_{50}$ (median inhibitory concentration) values of $0.57{\pm}0.05\;mg/ml$ and $0.53{\pm}0.06\;mg/ml$, respectively. The inhibitory rates of the extracts against tyrosinase were 67.4% and 84.8%, respectively. The extracts were shown to reduce melanin formation in human melanoma cells. Melanin contents in the samples treated with 0.01% and 0.1% U. esculenta were 47.1% and 31.2%, respectively, and those treated with 0.01% and 0.1% Usnea longissima were 51.1% and 34.9%, respectively, whereas a value of 54.0% was registered when ascorbic acid was utilized as a positive control. In addition to direct tyrosinase inhibition, it was determined that the lichen extracts affected the activity of tyrosinase via the inhibition of tyrosinase glycosylation. As a result, the methanolic extracts of U. esculenta and Usnea longissima evidenced melanogenesis inhibitory effects, which occurred via multiple routes.
To develop a whitening agent, cytotoxicity of the soluble collagen isolated from Todarodes pacificus (CIT) was evaluated. CIT tested for cytotoxicity on human dermal fibroblast (CCD-986sk) was exhibited very low cytotoxicity. Because tyrosinase is the key enzyme for melanin biosynthesis, the use of various tyrosinase inhibitors is a common practice for whitening purpose in cosmetics. Tyrosinase inhibitory activity and melanin production assay were measured to confirm the whitening effect. The inhibitory effect of MMP-1 in UV-irradiated human dermal fibroblast was also performed. CIT showed strong inhibition potency on tyrosinase by 51.5% at 0.2 mg/mL which increased the inhibition by increasing the concentration of CIT, and showed 69.1% inhibition at 1.0 mg/mL. CIT showed strong inhibition effect on melanin production with 82% at 1.0 mg/mL. The CIT also reduced about 76% expression of MMP-1 in UV-irradiated CCD-986sk cell at 1.0 mg/mL. From the preliminary observations, we suggest that the collagen isolated from CIT could be a potential source of natural skin-whitening and anti-aging agents for the photo-damaged skin.
The present study observed the effects of a green tea (Camellia sinensis) flower extract (GTFE) on melanin synthesis in B16-F10 melanoma cells. GTFE exhibited antioxidant activity on 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl and inhibited mushroom tyrosinase activity in a dose-dependent manner. Furthermore, GTFE significantly diminished ${\alpha}-melanocyte$ stimulating hormone (${\alpha}-MSH$) stimulated cellular melanin content and tyrosinase activity throughout the concentration range evaluated. Based on RNA sequencing analysis, differential gene expression patterns observed in ${\alpha}-MSH$ stimulated B16-F10 melanoma cells were normalized by the addition of GTFE. In particular, the expression levels of melanoregulin and tyrosinase genes which are key regulating genes in melanin synthesis were up-regulated by 3.5 and 3 fold respectively by ${\alpha}-MSH$, and were normalized to control levels by the addition of GTFE. The results suggest that GTFE inhibits melanin synthesis in ${\alpha}-MSH$ stimulated B16-F10 melanoma cells by normalizing expression of genes that are essential for melanin synthesis. Overall, the results suggest that GTFE could be applied in the development of a whitening agent for the treatment of dermal hyperpigmentation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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