• 한국식품과학회지
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• 제18권5호
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• pp.339-344
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• 1986

Trypsin inhibitor가 trypsin과 안정한 복합체를 형성하고 동시에 일반 단백질은 trypsin에 의하여 가수분해 되는 원리를 이용하여 trypsin inhibitor를 용이하게 검정 할 수 있는 방법을 고안하였다. trypsin으로 가수분해 시킨 대두추출액을 Sephadex G-50을 이용하여 trypsin-trypsin inhibitor 복합체를 분리시킨 후에 SDS 전기 영동으로 trypsin inhibitor를 복합체를 분리시킨 후에 SDS 전기 영동으로 trypsin inhibitor를 검정할 수 있었다. 이들 trypsin inhibitor는 trypsin에 의한 2차 가수분해에서도 가수분해 되지 않았으며, 또한 2차원 전기영동과 DEAE-Sephades A-25크로마토 그래피를 이용하여 trypsin inhibitor가 trypsin과 복합체를 형성하는 능력을 검정함으로써 본 방법의 유효성을 확인하였다. 본 실험 방법으로 대두(Hill 품종)의 trypsin inhibitor를 검정한 결과 7개의 trypsin inhibitor를 찾아 낼 수 있었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제10권4호
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• pp.283-288
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• 1982

Streptomyces속 균이 생산하는 trypsin inhibitor의 trypsin에 대한 반응성을 조사해 본 결과 본 저해물질은 crystalline trypsin (20.000 unit, hog pancreas)에 대하여 1/8량에서 약 50%의 저해률을 나타내었으며 trypsin에 대한 저해양상은 mixed noncompetitive-competitive inhibition type이었으며 enzyme-inhibitor complex를 빨리 형성하는데 반응액중 isoleucine이 공존하면 활성이 증가되였으며 Ag$_{＋}$ Hg$_{＋＋}$등의 금속ion은 강하게 본 저해물질의 작용을 억제하였다. 저해률은 사용한 기질의 종류에 따라 차이가 나서 albumin을 사용하였을 때는 casein이나 hemoglobin을 사용하였을 때보다 저해률이 높았다. 그러고 혈액의 응고에 대해서도 저해작용을 나타내었다.

• 생명과학회지
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• 제12권2호
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• pp.151-157
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• 2002

한방재료의 하나인 택사(Alismatis Rhizoma, AR)로부터 단백성 trypsin inhibitor(TI)를 분리, 정제하여 특성을 조사하였다. 정제과정은 0-80.% 포화 황산암모늄을 이용한 염석법, DEAE-cellulose ion exchange chromatography, Sep-hadex G-150 chromatography 등을 이용하였다. 정제된 ARTI의 분자량을 gel filtration과 SDS-PAGE 한 결과 모두 약 23,000 Da으로 나타나 monomer로 되어 있는 것으로 나타났다. 온도안정성에 있어 0-6$0^{\circ}C$에서는 안정하였으나 그 이상의 온도에서는 약 35%가지 안정성이 떨어졌다. ARTI와 상품화된 soybean kunitz inhibitor의 저해능을 비교해 본 결과 ARTI 및 soybean inhibitor 각각의 농도가 0.071 $\mu$M, 1.7 $\mu$M일 때 0.025 g/$m\ell$ trypsin활성을 50% 정도 저해하는 것으로 나타났다. ARTI의 trypsin의 가수분해반응에 대한 저해형태는 비경쟁적 저해형인 것으로 나타났으며 km값은 0.81 $\mu$M이었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권5호
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• pp.534-542
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• 1992

Streptomyces S-217 균주가 생산하는 trypsin 저해물질의 생산 및 정제조건을 검토하였다. 저해물질의 생산은 500ml 후라스크의 배양에서 2 mannitol, 0.9, peptone의 배지와 초기 pH는 7.0 배양시간은 66시간 및 온도30$^{\circ}C$의 조건에서 제일 높았으며, 무기염의 효과는 크게 영향이 없었다. 정제는 column chromatography와 HPLC에 의하여 정제하였다. 정제된 trypsin 저해물질의 초대파장은 $\lambda_{max}$ 215nm이었고, 용해도는 물에는 95, methanol과 dimethylsulfoxide에서는 70% 및 75%이었다.Trypsin 저해물질 복합체 형성시간은 10분 정도였으며, trypsin 효소의 50% 저해농도($IC^{50}$)는 15$\mu$g/ml 이었다. 저해물질의 pH 안정성은 $100^{\circ}C$ 10분간 열처리시 pH 5~9에서 100% 활성이 유지되었으며, 산성측보다 알칼리측이 안정하였고, 열안정성은 $100^{\circ}C$, pH7.0에서 1시간 동안 50% 활성을 유지하였다.

• 약학회지
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• 제52권1호
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• pp.79-84
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• 2008

Alismatis Rhizoma has been used as diuretics and antiphlogistics in the Chinese oriental medicine. A trypsin inhibitor was isolated from Alismatis Rhizoma using DEAE ion exchange column, trypsin affinity column, and FPLC chromatography, and its activity and characteristics were studied. The purifed Alismatis Rhizoma trypsin inhibitor (ARTI) was estimated to be about 22 kDa. The sequence determination on N-terminal amino acid residues and 84 amino acid residues has been completed, yet no homology has been found with trypsin inhibitors reported at NCBI. ARTI did not show inhibitory activities on chymotrypsin and elastase, however it exhibited a significant inhibitory activity on bovine trypsin, and formed a complex with rat liver 10-formyltetrahydrofolate dehydrogenase.

• 생명과학회지
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• 제12권5호
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• pp.528-534
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• 2002

우리나라에서 식용으로 뿐만아니라 한방재료로 널리 사용되고 있는 녹두(vigna radiata L. wilczek) 로부터 trypsin inhibitor (Mung bean trypsin inhibitor, MBTI)를 분리정제하여 그 특성을 조사하였다 또한 병태동물모델 즉, septic shock induced guinea pig model을 이용하여 MBTI의 약물학적 효과를 평가하였다. MBTI의 분리 및 정제과정은 Sephadex C-50 chromatography, DEAE-celluloseion exchange chromatography 및 trypsin affinity column 을 차례로 이용하였다. 정제한 MBTI는 전기영동 및 아미노산 서열분석결과 분자량 약 8,000 Da 의 BBI-type (Bowman-birk inhibitor type)임을 알 수 있었으며 이들의 생화학적 특성을 구명하였다. 또한 pseudomonal elastase로 유도된 septic shock guinea pig model에서 MBTI 10 mg/kg를 전처치한 결과 hypotention shock 유발이 억제됨을 알 수 있었다.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제5권2호
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• pp.158-164
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• 1997

To investigate the effects of trypsin inhibitors, aprotinin and urinary trypsin inhibitor (UTI), on the cute pancreatitis, this study was carried out in dogs of acute pancreatitis induced by oleic acid (0.28 mg/kg). Administration with aprotinin and UTI seemed to have a therapeutic effect on the clinical sign, ultrasonographic finding, histopathologic finding. But in amylase and lipase activity, there were no significant differences among three groups.

• Applied Biological Chemistry
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• 제33권4호
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• pp.287-292
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• 1990

황금종 대두로 부터 8종의 Bowman-Birk형 proteinase inhibitor들을 DEAE-Sephadex A-50으로 전기영동상 단일 band로 순수하게 분리하였다. 이중 inhibitor VII cysteine함량이 17%로 높고 trypsin 및 chymotrypsin에 대해 각각 독립적인 결합부위를 가지고 있으며 상기 두 효소에 대한 저해활성도의 비(TIA/CIA)가 1.0으로 전형적인 Bowman-Birk trypsin inhibitor(BBTI)로 확인되었다. 본 inhibitor와 trypsin 및 chymotrypsin complex의 dissociation constant는 각각 $9.17{\times}10^{-9}M$과 $5.14{\times}10^{-8}M$로 매우 안정하였다. 또한 inhibitor Vll은 열에 매우 안정한 단백질로 $100^{\circ}C$, 6시간 처리에도 저해활성도 감소가 50%밖에 안되었다. 순수분리된 7종의 다른 isoinhibitor중 inhibitor III만이 TIA/CIA값이 1.2로 BBTI와 비슷하였으나 그외 inhibitor I, II, IV, V,및 VIII은 그 값이 $3{\sim}29$로 BBTI와는 성질이 다른 isoinhibitnr로 추정되었다.

• 약학회지
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• 제48권1호
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• pp.82-87
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• 2004

Mungbean trypsin inhibitor (MBTI) was isolated and purified from Mung bean which has been used as a galenic and traditional food. MBTI and poly(ethylene glycol) were conjugated by using water soluble carbodiimide. We evaluated the therapeutic value of the MBTI and MBTI-PEG conjugate using animal models, sublethal septic shock model in guinea pig caused by pseudomonal elastase, shock model in rat caused by lipopolysaccharide, and the vascular permeability test by using pseudomonal elastase. In two shock model in guinea p Is and in rat, hypotesion shock was inhibited by pretreatment of MBTI. And also the vascular permeability caused by pseudomonal elastase reduced by pretreatment of MBTI. Also, therapeutic value of the MBTI-PEG conjugate was evaluated by using the sublethal septic shock model caused by pseudomonal elastase. The MBTI-PEG conjugate was more effective than native MBTI against pseudomonal elastase induced septic shock in guinea pig model.

• 한국육종학회지
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• 제41권4호
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• pp.603-606
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• 2009

Lipoxygenase and Kunitz trypsin inhibitor protein of mature soybean [Glycine max (L.) Merr.] seed are main anti-nutritional factors in soybean seed. A new soybean cultivar, "Gaechuck#1" with the traits of black seed coat, green cotyledon, lipoxygenase2,3 and Kunitz trypsin inhibitor protein free was developed. It was selected from the population derived the cross of "Gyeongsang#1" and C242. Plants of "Gaechuck#1" have a determinate growth habit with purple flowers, brown pubescence, black seed coat, black hilum, oval leaflet shape and brown pods at maturity. Seed protein and oil content on dry weight basis have averaged 39.1% and 16.2%, respectively. It has shown resistant reaction to soybean necrosis, soybean mosaic virus, Cercospora leaf spot and blight, black root rot, pod and stem blight, and soybean pod borer. "Gaechuck#1" matured on 5-10 October with a plant height of 50 cm. The 100-seed weight of "Gaechuck#1" was 23.2g. Yield of "Gaechuck#1" was averaged 2.2 ton/ha from 2005 to 2007.