• 제목/요약/키워드: Transglutaminase C

검색결과 41건 처리시간 0.026초

효소법에 의한 ATP의 Bovine $\beta$-Casein에의 고정화 (Immobilization of ATP on Bovine $\beta$- Caseins by Using Transglutaminase)

  • 윤세억;박선영김명곤
    • KSBB Journal
    • /
    • 제5권3호
    • /
    • pp.241-246
    • /
    • 1990
  • Transgluaminase반응을 이용하여 ATP analog들$(C^8-ATP와 N^6-ATP)$을 casein에 고정화하였다. 고정화 ATP는 hexokinase에 의해 탈인산화되어 약55%가 ATP형으로 전환되었으며, 이는 acetate kinase에 의해 역으로 인산화되어 약80%가 ATP형으로 전환 되었다. $\beta$-Casein은 $$\alpha$_s_1-casein$에 비하여 glutamine 잔기의 수가 많으며,$N^6-ATP$의 경우 이의 alkyl carbamyl기와 casein의 carboxamide기 간의 정전기적 반발에 원인이 있는 것으로 보인다. ATP는 고정화하므로써 안정성이 증대되었으며, 고정화 ATP의 km치는 유리상의 ATP및 ATP analog의 그것과 비슷하였으나, 최대속도는 감소되었다. 고정하 ATP는 반응액에서 calcium의 첨가로 쉽게 침전되어 용액으로부터 거의 완전히 회수 되므로써, 반응액으로부터의 회수분리가 가능한 이점을 가졌다.

  • PDF

Transglutaminase를 첨가한 근원섬유 단백질과 카제인 염 혼합액의 배양시간과 온도조건에 따른 물성 변화

  • 황지숙;진구복
    • 한국축산식품학회:학술대회논문집
    • /
    • 한국축산식품학회 2006년도 정기총회 및 제37차 춘계 국제학술발표대회
    • /
    • pp.170-174
    • /
    • 2006
  • 근육 단백질과 우유 단백질간의 상호작용의 촉매제로써 TGase의 최적화를 위한 온도와 배양시간을 결정하고자 본 실험을 실시하였다. 돼지 등심에서 근원섬유 단백질을 추출하였고 배양온도는 4, $37^{\circ}C$로, 배양시간은 0, 0.5, 2, 4시간으로 설정하였다. 단백질의 열량분석, 점도, 겔 강도, 단백질 밴드의 변화를 측정하였으며, 그 결과 단백질 열량 변화는 각 단백질 별로 열량 변화 패턴이 상이하게 나타났으며 근원섬유와 카제인 염의 혼합액은 각각의 단백질의 피크와 유사하게 나타났고 배양시간과 온도에 따라 차이를 보여 $4^{\circ}C$에 비하여 $37^{\circ}C$에서 열량 변화가 크게 나타났다. 점도의 경우 배양하지 않은 것과 비교했을 때 $37^{\circ}C$에서 2시간 배양했을 때부터 유의적인 차이를 보이며 증가했으나 4시간 배양한 것과는 차이를 나타내지 않았다. 전기영동의 경우에도 $37^{\circ}C$에서 30분 배양한 처리구는 큰 변화를 나타내지 않았으나 2시간부터 저분자의 밴드가 소멸되고 고분자의 biopolymer를 형성되었다.

  • PDF

치성낭종 상피세포의 증식, 분화 및 세포능동사망현상에 관한 면역조직화학적 연구 (AN IMMUNOHISTOCHEMICAL STUDY ON PROLIFERATION, DIFFERENTIATION, AND APOPTOSIS IN THE EPITHELIAL CELLS OF THE ODONTOGENIC CYSTS)

  • 정성훈;박영욱;주재용;이석근
    • Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
    • /
    • 제26권5호
    • /
    • pp.470-480
    • /
    • 2000
  • The epithelium of odontogenic cyst seems to be in a specific status of cellular proliferation and cytodifferentiation. With the identification of various genes, which play essential roles in the specific stages of cellular proliferation and differentiation, the cellular conditions of odontogenic cyst epithelium need to be reevaluated. This study aimed to estimate the degree of proliferating, differentiating and apoptotic activities of odontogenic cyst epithelium using antisera of PCNA, Ki-67, MPM-2, transglutaminase C, heat shock protein 70 and $ApopTag$^{(R)}$. method in 19 cases of odontogenic cysts. Cellular changes of the cyst epithelium were measured by intensity of each immunohistochemical staining. Results were as follows: 1. The proliferating activity of the cyst epithelium was slightly lower than that of normal oral mucosal epithelium, with the use of primary antibodies against PCNA, Ki-67, and MPM-2. And the proliferating activity of the epithelium in OKC group was even higher than that of the epithelium in non-OKC group. 2. The odontogenic cysts showed weakly positive reaction with transglutaminase C, but strongly positive reaction with HSP 70. 3. Occasionally, only a few apoptotic cell was observed in the superficial keratin layer of OKC. 4. The hyperplastic cyst epithelium infiltrated with mild inflammatory cells showed diffusely positive reaction with different proliferating factors. From the above results, we presumed that the endogenous proliferating and differentiating activity of the cyst epithelium was slightly lower than that of normal oral mucosal epithelium, and also supposed that the cyst epithelium could be reactivated for the further proliferation by the exogenous factors, such as inflammatory reaction and any chemicophysical irritations.

  • PDF

Genomic and Proteomic Profiling of the Cadmium Cytotoxic Response in Human Lung Epithelial Cells

  • Choi, Kwang-Man;Youn, Hyung-Sun;Lee, Mi-Young
    • Molecular & Cellular Toxicology
    • /
    • 제5권3호
    • /
    • pp.198-206
    • /
    • 2009
  • Microarray and proteomic expression patterns in response to cadmium exposure were analyzed in human lung epithelial cells. Among 35,000 genes analyzed by cDNA microarray, 228 genes were up-regulated and 99 genes were down-regulated, based on a fold change cut-off value of ${\geq}2$. Combining two-dimensional gel electrophoresis and matrix-assisted laser desorption/ionization-time-of-flight-mass spectrometry (MALDI-ToF-MS), 25 of 629 protein spots showed fold changes in expression ${\geq}2$ (17 up-regulated, 8 down-regulated). After comparing the cDNA microarray and proteomic analyses, only transglutaminase 2, translation elongation factor 1 alpha 1, and glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase showed overlapping signals in the cDNA microarray and proteomic analyses, whereas the remaining differentially expressed proteins showed large discrepancies with respect to mRNA expression.

염생식물인 갯끈풀과 갯메꽃 추출물의 HaCaT 세포에서 피부 보습 및 피부 장벽 기능에 미치는 영향 (Effect of Halophyte (Spartina anglica and Calystegia soldanella) Extracts on Skin Moisturizing and Barrier Function in HaCaT Cells)

  • 하유나;정재우;이원휘;오준혁;김연정
    • 한국해양생명과학회지
    • /
    • 제6권2호
    • /
    • pp.58-65
    • /
    • 2021
  • 노화가 진행될수록 활성산소종으로 인하여 피부 보습은 떨어지고 피부 장벽은 붕괴되어 피부가 손상된다. 본 연구에서는 인천 동막 해변에 서식하는 염생식물인 갯끈풀(Spartina anglica; SAE)과 갯메꽃(Calystegia soldanella; CSE)을 70% 에탄올(EtOH)로 추출하여 피부 보습 및 피부 장벽 기능 강화에 대한 효능을 평가하였다. 이 추출물들에 대한 피부 각질형성세포(HaCaT cell)에서 세포독성을 WST-8 assay를 이용하여, 세포 생존율이 90% 이상을 보이는 농도를 선별하여 추가 실험을 진행하였다. ABTS 라디칼 소거능을 통해 항산화 효과를 확인한 결과, SAE와 CSE는 높은 라디칼 소거능을 보였다. 피부 보습과 관련된 인자들인 filaggrin (FGL), aquaporin 3(AQP3), hyaluronan synthase 2 (HAS2)과 피부 장벽 기능과 연관 있는 transglutaminase 1 (TGM1)과 involucrin (INV)의 유전자 수준에서의 발현 변화를 측정한 결과, SAE에 의해 AQP3, HAS2, TGM1의 발현이 증가하였으나, CSE는 변화가 없는 것을 확인할 수 있었다. SAE에 의한 세포 내 신호전달 경로를 확인하기 위해 western blot 분석을 수행하였다. Extracellular signal regulated kinase (ERK), c-Jun N-terminal kinase (JNK) and p38 mitogen activated protein kinase의 활성이 SAE에 의하여 상향 조절되었음을 확인하였다. 이러한 결과는 갯끈풀 추출물이 피부 보습 및 피부 장벽 기능 강화를 위한 화장품의 기능성 소재로 사용될 수 있음을 시사한다.

Molecular Chaperonic Function of C-Reactive Protein Induced by Heating in HT-29 Human Colon Carcinoma Cells

  • Lee, Soo-Young;Jung, Hyun-Jung;Kim, Hyun-Soo;Lee, Seung-Chul;Lee, Si-Back;Joe, Jae-Hoon;Kim, You-Mie
    • BMB Reports
    • /
    • 제33권5호
    • /
    • pp.407-411
    • /
    • 2000
  • The effects of heat shock, or all-trans retinoic acid, on the expression of the C-reactive protein mRNA in the HT-29 human colon carcinoma cells, as well as the functional role of the C-reactive protein as a molecular chaperone, were studied. The expression level of the C-reactive protein mRNA in the HT-29 cells was increased time-dependently when exposed to heat-shock, and dose-dependently when treated with all-trans retinoic acid. The activities of transglutaminase C and K in the HT-29 cells were significantly increased when treated with all-trans retinoic acid. The C-reactive protein prevented thermal aggregation of the citrate synthase and stabilized the target enzyme, citrate synthase. The C-reactive protein promoted functional refolding of the urea-denatured citrate synthase up to 40-70%. These results suggest that the C-reactive protein, which is induced in human colon carcinoma cells, when heated or treated with all-trans retinoic acid has in a part functional activity of the molecular chaperone.

  • PDF

TGase 첨가 바이오폴리머의 침식특성 연구 (Erosion Characteristics of TGase-added Biopolymers)

  • 김강현;김승현;김도희;신종호
    • 한국지반환경공학회 논문집
    • /
    • 제24권9호
    • /
    • pp.5-13
    • /
    • 2023
  • 대표적 사면 보강재료인 시멘트 계열의 보강재는 지반주입 또는 지표 도포 시 지반 및 지하수의 오염이 발생할 수 있다. 이에 따라 친환경 바이오폴리머를 사용한 사면 보강재료가 기존의 재료를 대체할 수단으로 관심받고 있으나, 현재 사용되고 있는 바이오폴리머는 지하수 또는 강우 환경에 노출되면 쉽게 용해되어 강도가 감소되는 문제가 있다. 이러한 문제를 해결하기 위하여 본 연구에서는 카제인나트륨과 Transglutaminase(TGase, C20H16N4O2S2)의 단백질 교차결합을 이용하여 바이오폴리머의 내수성을 증가시켰으며, 사면 보강재료로서 사용성과 적용성을 평가하기 위해 강우사면시험을 수행하였다. 카제인나트륨만으로 보강한 경우 강우로 인해 카제인나트륨이 용해되어 1시간 만에 사면이 완전히 파괴되었다. 반면 TGase를 소량(0.5%) 첨가하여 보강한 사면은 내수성이 증가하여 강우 지속시간 80시간이 지나도 붕괴되지 않음을 관찰하였다. TGase 소량 첨가로 인한 강도 및 내수성 증가가 나타났으며, 친환경 보강재로서의 적용성을 확인하였다.

도루묵(Arctoscopus japonicus) 어묵의 제조 및 품질특성 (Quality of Steam Cooked Surimi Gel Prepared using Sandfish Arctoscopus japonicus Meat)

  • 김병목;김동수;정인학;김영명
    • 한국수산과학회지
    • /
    • 제47권5호
    • /
    • pp.474-481
    • /
    • 2014
  • This study examined the effect of pretreated sandfish Arctoscopus japonicus meat as a surimi complex for preparing sandfish flavored fish paste. To prepare the sandfish-flavored paste, fine chopped sandfish meat including backbone was added in a ratio of 0 to 50 wt.% to thawed Alaska pollock Theragra chalcogramma surimi to make a mixed surimi gel. To prepare the sandfish-flavored paste, the mixed surimi was ground with salt using a silent cutter, mixed with starch and stabilizers 0.2% transglutaminase and gluconolactone 0.3%, stuffed in a rectangular container, left for 3 h at $25^{\circ}C$, cooked in hot water for 30 min at $90^{\circ}C$, and finally chilled for 20 min at $4^{\circ}C$. The effects of the pretreatment of sandfish meat were investigated by analyzing the quality of the paste produced. The proximate composition of FP (fish paste containing 40% steam-cooked sandfish meat and 0.3% gluconolactone) was moisture 76.1%, crude protein 12.0%, crude fat 3.8%, carbohydrate 6.1%, and ash 2.0%. The major minerals in FP were Na (23.77 mg/L), Mg (1.46 mg/L), Zn (1.04 mg/L), and Fe (0.41 mg/L), and the major free amino acids were taurine, anserine, alanine, and glutamic acid. The monounsaturated fatty acid content of FP was 566.22 mg%, and the polyunsaturated fatty acid content was 498.43 mg%. The n-3 fatty acid content was 398.01 mg%, and C20:5n-3 (218.85 mg %) was a major component.

무모 마우스 피부에서 모자반 추출물의 자외선비(ultraviolet B)에 의해 유도된 광노화 억제 효과 (Inhibitory effect of Mojaban (Sargassum fulvellum) extract on ultraviolet B-induced photoaging in hairless mouse skin)

  • 임동빈;김창희;황재관
    • 한국식품과학회지
    • /
    • 제52권5호
    • /
    • pp.467-475
    • /
    • 2020
  • 자외선(Ultraviolet radiation)은 피부 주름 형성과 피부 건조를 특징으로 하는 광노화의 주요 원인이다. 모자반과(Sargassaceae)에 속하는 모자반(Sargassum fulvellum)은 항염증, 항산화, 항아토피 활성을 갖고 있다. 특히, 모자반은 인간 각질세포(keratinocyte)와 실험동물의 피부에서 UVB에 의한 염증 반응을 완화시키는 것으로 보고되었다. 그러나, 현재까지 모자반 추출물의 광노화 억제 효과에 대해서는 보고된 바가 없다. 본 연구에서는 광노화를 유도하기 위하여 UVB를 SKH-1 무모 마우스의 등 부분에 8주간 처리하였으며, 동시에 모자반 추출물을 300 mg/kg의 농도로 매일 경구 투여하였다. 현상학적으로, 모자반 추출물은 주름 형성, 홍반 및 피부 두께를 감소시켰으며, 피부 탄력을 증가시켰다. 모자반 추출물은 콜라겐 합성 유전의 발현을 증가시키고, matrix metalloproteinase의 발현을 감소시킴으로써 콜라겐의 하이드록시프롤린(hydroxyproline) 함량을 증가시켰다. 추가적으로, 모자반 추출물의 경구 투여는 무모 마우스의 피부 수분 함량을 증가시켰으며, 경피수분손실(transepidermal water loss)을 감소시켰다. 모자반 추출물은 각질세포막 형성에 관여하는 involucrin, loricrin, transglutaminase의 발현과 자연보습인자 관련 생체지표인 filaggrin 및 caspase-14의 발현을 증가시켰다. 종합적으로, 모자반 추출물은 피부의 콜라겐 손실과 건조를 완화함으로써 광노화 억제 활성을 제공하였다. 모자반 추출물은 피부 광노화를 억제하기 위한 기능성 식품 소재로서 활용될 수 있을 것으로 판단된다.

뇌경색 마우스의 뇌손상에 대한 소풍탕(疎風湯)의 보호효과 (The Protective Effects of Sopung-tang on Brain Damage in Photothrombotic Ischemia Mouse Model)

  • 장석오;최지혜;이동엽;최용준;이인;문병순
    • 대한한방내과학회지
    • /
    • 제30권3호
    • /
    • pp.612-623
    • /
    • 2009
  • Objectives : The water extract of Sopung-tang (SPT) has been traditionally used in the treatment of acute stroke in Oriental Medicine. Pro-inflammatory cytokines play a critical role in the onset of post-ischemic inflammatory cascades. The present study was designed to investigate the effects of SPT on pro-inflammatory cytokine production in a photothrombotic ischemia mouse model. Methods : After SPT oral administration to the mice for five days, with using Rose Bengal and cold light, photothrombotic ischemia lesion was induced in stereotactically held male BALB/c mice. Also, results including, gross finding lesion size, histopathological finding changes, and inflammatory cytokine expression changes from the photothrombotic ischemia mouse model were observed. Results : The photothrombotic ischemia lesion was decreased by the oral injection of SPT. Also, SPT inhibited the expression of TNF-$\alpha$, IL-$1{\beta}$, IL-6, the active form of caspase-3 protease, and transglutaminase-2 in the photothrombotic ischemia lesion. Conclusions : These results suggest that SPT protects the ischemic death of brain cells through suppression of the production of anti-inflammatory cytokines and catalytic activation of caspase-3 protease in the photothrombotic ischemia mouse model.

  • PDF