PSTVd 를 접종시킨 감자의 Superior 품종으로부터 PSTVd RNA를 분리하여 역전사효소와 PSTVd genome 중 356 uncleotides를 증폭할 수 있는 PSTVd 특이적 primer 쌍을 사용하여 RT-PCR를 수행한 결과 356 nuclcotides의 DNA 절편이 증폭되었고 이 절편을 sequencing인 결과 PSTVd 의 유전자임을 확인하였다. 감염된 잎과 괴경에수 모두 RT-PCR 기법을 이용한 PSTVd 의 검정이 가능하였고 특히 RT 반응시 downstream primer만을 이용할 때보다 downstream과 upstream primer를 동시에 사용할 때가 PSTVd 의 검정에 더 효과적이었다.
To investigate resistance to lamivudine (3TC), we examined the incidence of M184V in 20 HIV-1 patients treated with 3TC for $13.1{\pm}9$ months. Fourteen of 20 patients had been exposed to zidovudine (ZDV) or didanosine (ddI) prior to 3TC therapy. Nested PCR targeting to reverse transcriptase (RT) and direct sequencing were performed for peripheral blood mononuclear cells sampled serially. There were resistance mutations to ZDV in at least 9 patients at baseline, although there was no resistance mutation to 3TC. We could detect M184V in 6 (30%) out of 20 patients. The incidence of M184V increased as the duration of therapy prolongs (13% in samples <12 months; 47% in samples ${\ge}12$ months). The frequency of mutation M184V was higher in patients with previous mutation to ZDV than in patients with wild type. Resistance mutation was not detected in 7 patients. This study shows that resistance to 3TC tends to develop rapidly in patients with baseline mutations or two drugs combination therapy than in those treated simultaneously with triple drugs. This report is the first on resistance to 3TC in Korean AIDS patients.
Hepatitis C virus (HCV) has been identified as an important cause of posttransfusion hepatitis, but vertical transmission of chronic infected HCV RNA positive mothers has been documented in some cases. The reports of the risk of perinatal infection have been widely varied in the literature. The authors experienced one case of vertical transmission of HCV in an infant of a mother who had hepatitis C during pregnancy. At admission, HCV RNA (+), Ig G anti HCV (+) and Ig M anti HCV (+) were found in the mother. Also at admission, HCV RNA (+), Ig G anti HCV (+), Ig M anti HCV (+), elevation of liver aminotransferase level and hepatosplenomegaly on ultrasonography were found in the baby on day 31. HCV RNA (-), Ig M anti HCV (-) and normal of liver aminotransferase level were noted on day 250 in the serum of the infant. We used reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) technique to find a very small amount of HCV RNA in the serum. All the findings suggest vertical transmission of HCV RNA from mother to infant during 3rd trimester of pregnancy.
To evaluate in vitro anti-HIV efficacies of nucleoside derivatives, MT-4 cell line was infected with HIV-1 and HIV-2 respectively and treated with various compounds and the formerly approved drugs such as AZT, d4T, ddC and ddI. CPE method was used to evaluate their antiviral activity. Most dideoxynucleosides, AZT, d4T, ddC and ddI, showed anti-HIV activities against both viruses but no other compounds including anti-herpesvirus drugs did any. Further experiments were carried out to study their inhibitory mechanism of viral adsorption. The results showed no inhibition of syncytium formation due to an interaction between the gp120 expressed in HIV -infected cell surface and CD4 receptor on the uninfected cell surface in the presence of AZT. AZT showed no activity up to $100\;{\mu}g/ml$. Inhibition of reverse transcriptase (RT) in the presence of AZT-triphosphate was tested by using RT expressed in E. coli and purified and its $IC_{50}$ was 4.5 nM.
이상유영 증상을 나타내는 연어과 어류에서 분리된 새로운 RNA 바이러스의 역전사 효소활성을 조사하였다. 정제바이러스는 래트로바이러스 특유의 유전자전환 효소인 역전사효소 (RTase) 활성을 가지고 있었다. Sucrose 밀도구배 초원심법으로 바이러스 밀도를 조사한 결과 1.16 g/ml에서 밴드를 형성하고, 그 부분의 역전사효소 활성이 최고를 나타내었으며, 전자현미경 관찰결과 외막을 가진 크기 85 nm의 레트로바이러스 형태를 확인할 수 있었다. 인위감염 어류의 뇌 및 신장 조직내에 감염되어있는 바이러스를 대상으로 RTase 활성을 조사한 결과 높은 활성치를 확인할 수 있었다. 정제 바이러스의 구성 단백질은 전기영동법으로 확인한 결과 11종이었다. 이상의 결과, 새롭게 분리된 바이러스는 레트로바이러스의 일종인 것이 확인되었으므로 그 이름을 RVS (Retrovirus of salmonid)로 부를 것을 제안한다.
Kang Kyoung-Ah;Lee Kyoung-Hwa;Chae Sung-Wook;Kim Jeong-Ki;Seo Jung-Yeon;Ham Yong-Ho;Lee Kee-Ho;Kim Bum-Joon;Kim Hee-Sun;Kim Dong-Hyun;Hyun Jin Won
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제11권1호
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pp.7-12
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2006
Telomerase activation is detected in most cancerous cells; hence, telomerase is a highly selective target for cancer therapy, which plays an important role in the apoptotic process. We have previously reported that the ginseng saponin metabolite, Compound K (20-O-D-glucopyranosyl-20(S)-protopanaxadiol, IH901), inhibits cell proliferation by inducing apoptosis and cell cycle arrest at the $G_1$ phase. The present study investigated the regulation of telomerase activity in Compound K treated U937 cells. Compound K treatment caused a reduction in telomerase activity and down-regulated the human telomerase reverse transcriptase (hTERT) gene, resulting in the decreased expressions of its protein, and of the c-Myc and Spl proteins (transcription factors of hTERT). These results indicate that the anticancer activity of Compound K could be mediated by inhibition of the telomerase activity.
이상의 연구 결과에 의하면 piceatannol의 처리에 의한 U937 세포의 증식억제는 세포주기 S기 arrest 및 apoptosis 유발과 뚜렷한 연관성이 있었다. 또한 piceatannol은 hTERT 및 TEP-1 유전자의 발현 저하와 연관된 telomerase 활성의 저하 효과도 나타내었으나, COXs의 발현 및 PGE2의 생성에는 큰 변화를 주지 못하였다. 따라서 본 연구의 결과는 암세포에서 높게 발현되는 telomerase 활성 조절제로서 piceatannol의 적용이 가능함을 보여주며, 이는 piceatannol의 항암작용을 이해하는데 매우 유용한 자료라 생각한다.
Kim, Ja Hye;Yu, Jeong Jin;Lee, Jina;Kim, Mi-Na;Ko, Hong Ki;Choi, Hyung Soon;Kim, Young-Hwue;Ko, Jae-Kon
Clinical and Experimental Pediatrics
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제55권12호
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pp.470-473
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2012
Purpose: The purpose of this prospective case-control study was to survey the detection rate of respiratory viruses in children with Kawasaki disease (KD) by using multiplex reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR), and to investigate the clinical implications of the prevalence of respiratory viruses during the acute phase of KD. Methods: RT-PCR assays were carried out to screen for the presence of respiratory syncytial virus A and B, adenovirus, rhinovirus, parainfluenza viruses 1 to 4, influenza virus A and B, metapneumovirus, bocavirus, coronavirus OC43/229E and NL63, and enterovirus in nasopharyngeal secretions of 55 KD patients and 78 control subjects. Results: Virus detection rates in KD patients and control subjects were 32.7% and 30.8%, respectively (P=0.811). However, there was no significant association between the presence of any of the 15 viruses and the incidence of KD. Comparisons between the 18 patients with positive RT-PCR results and the other 37 KD patients revealed no significant differences in terms of clinical findings (including the prevalence of incomplete presentation of the disease) and coronary artery diameter. Conclusion: A positive RT-PCR for currently epidemic respiratory viruses should not be used as an evidence against the diagnosis of KD. These viruses were not associated with the incomplete presentation of KD and coronary artery dilatation.
Rhee, Jeehae;Park, Kwanghoon;Kim, Ki Chan;Shin, Chan Young;Chung, ChiHye
Molecules and Cells
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제41권5호
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pp.486-494
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2018
Recently, we have reported that animals with telomerase reverse transcriptase (TERT) overexpression exhibit reduced social interaction, decreased preference for novel social interaction and poor nest-building behaviors-symptoms that mirror those observed in human autism spectrum disorders (ASD). Overexpression of TERT also alters the excitatory/inhibitory (E/I) ratio in the medial prefrontal cortex. However, the effects of TERT overexpression on hippocampal-dependent learning and synaptic efficacy have not been investigated. In the present study, we employed electrophysiological approaches in combination with behavioral analysis to examine hippocampal function of TERT transgenic (TERT-tg) mice and FVB controls. We found that TERT overexpression results in enhanced hippocampal excitation with no changes in inhibition and significantly impairs long-term synaptic plasticity. Interestingly, the expression levels of phosphorylated CREB and phosphorylated $CaMKII{\alpha}$ were significantly decreased while the expression level of $CaMKII{\alpha}$ was slightly increased in the hippocampus of TERT-overexpressing mice. Our observations highlight the importance of TERT in normal synaptic function and behavior and provide additional information on a novel animal model of ASD associated with TERT overexpression.
살균된 우유에 오염된 Salmonella의 신속한 검출 방법을 공중 보건의 보호를 위하여 중요하다. RT-PCR 방법은 생균과 사균을 분별하여 검출할 수 있는 분자유전학적 방법이다. 본 연구의 RT-PCR 방법은 Salmonella의 type 1 fImbriae의 단량체 단백질을 암호화하는 fimA 유전자의 mRNA를 주형으로 하여 DNA를 증폭하는 방법으로서 활력이 있는 Salmonella를 검출할수 있기 위하여 개발되었다. RNA 시료를 RQRNase-free DNase로 처리하여 오염된 DNA를 파괴하여 RT-PCR 반응에서 주형으로서 DNA가 합성되는 것을 방지할 수 있었다. 이 RT-PCR 방법은 Salmonella 7균주를 검출하였으나 Escherichia coli, Shigella sonnei, Citrobacter freundii, 및 Klebsiella pneumoniae 는 검출하지 않았다. 우유 내에서 열처리된 $10^7/ml과 10^6/ml$ 세균수의 Salmonella는 검출되 었으나 $10^5{\sim}100/ml$는 검출되지 않았다. RT-PCR를 검출할 수 있는 활력이 있는 Salmonella의 최소 세균수는 100/ml이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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