BALB/C mice 에게 FVA를 감염시킨 후, zidobudine을 1 mg/ml 의 농도로 식수에 용해하여 18일 동안 자유롭게 섭취 시켰을때 (150-200 mg/kg/day) 비장비대가 90% 억제되었고, 혈액 중 reverse transcriptase 활성은 85%로 억제효과를 나타내었으며, 빈혈지수는 회복되는 경향을 나타내었다. 한편, ddI 는 AZT와 동일 용량에서 비장비대는 17%, 혈액 중 reverse transcriptase 억제효과는 34% 억제효과를 나타내었다. 반면에 ddC는 단독투여시 비장비대를 38% 억제하였으며, interferon $\alpha$와 병용투여시 83%의 억제효과를 나타내었다. 이상은 FVA 감염에 의한 mice의 비장비대를 지표로 하여 reverse transcriptase의 억제효과를 지닌 항 AIDS약물의 약효검색법으로 활용할 수 있음을 제시해준다.
As we enter the new millennium, there have been dramatic improvements in the care of patients with HIV infection. These have prolonged life and decreased morbidity and mortality. There are fourteen currently available antiretrovirals approved in the United States for the treatment of this infection. The medications, including their pharmacokinetic properties, side effects, and dosing are reviewed. In addition, the current approach to the use of these medicines is discussed.
Mesenchymal stem cells (MSCs) have been widely used as donor cells for somatic cell nuclear transfer (SCNT) to increase the efficiency of embryo cloning. Since replicative senescence reduces the efficiency of embryo cloning in MSCs during in vitro expansion, transfection of telomerase reverse transcriptase (TERT) into MSCs has been used to suppress the replicative senescence. Here, TERT-transfected MSCs in comparison with early passage MSCs (eMSCs) and sham-transfected MSCs (sMSCs) were used to evaluate the effects of embryo cloning with SCNT in a porcine model. Cloned embryos from tMSC, eMSC, and sMSC groups were indistinguishable in their fusion rate, cleavage rate, total cell number, and gene expression levels of OCT4, SOX2 and NANOG during the blastocyst stage. The blastocyst formation rates of tMSC and sMSC groups were comparable but significantly lower than that of the eMSC group (p < 0.05). In contrast, tMSC and eMSC groups demonstrated significantly reduced apoptotic incidence (p < 0.05), and decreased BAX but increased BCL2 expression in the blastocyst stage compared to the sMSC group (p < 0.05). Therefore, MSCs transfected with telomerase reverse transcriptase do not affect the overall development of the cloned embryos in porcine SCNT, but enables to maintain embryo quality, similar to apoptotic events in SCNT embryos typically achieved by an early passage MSC. This finding offers a bioengineering strategy in improving the porcine cloned embryo quality.
능소화 추출물의 HIV-1에 대한 항바이러스 효과를 복제 관련 효소에 대한 억제실험과 바이러스 복제억제 실험을 통하여 살펴보았다. 역전사효소 억제활성을 ELOSA 방법으로 실험한 결과 능소화 줄기의 물 추출물이 100 ${\mu}g$/ml 농도에서 각각 37.9%의 활성을 나타내었고, 능소화 잎과 줄기의 메탄올 추출물에서 33.6% 및 31.5%의 HIV-1 protease 억제활성 나타 내었다. 그리고 HIV-1 복제 억제활성은 MT-4 세포에 대한 HIV-1 유도 세포변성억제를 광학현미경으로 관찰하여 살펴본 결과 줄기의 물 추출물이 100 ${\mu}g$/ml 농도에서 HIV-1 바이러스 증식을 완전히 억제하였다.
Background: Feline immunodeficiency virus (FIV) causes an acquired immunodeficiency-like syndrome in cats. FIV is latent. No effective treatment has been developed for treatment the infected cats. The first and second generations non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors (NNRTIs) for HIV treatment, nevirapine (NVP) and efavirenz (EFV), and rilpivirine (RPV), were used to investigate the potential of NNRTIs for treatment of FIV infection. Objective: This study aims to use experimental and in silico approaches to investigate the potential of NNRTIs, NVP, EFV, and RPV, for inhibition of FIV reverse transcriptase (FIV-RT). Methods: The FIV-RT and human immunodeficiency virus reverse transcriptase (HIV-RT) were expressed and purified using chromatography approaches. The purified proteins were used to determine the IC50 values with NVP, EFV, and RPV. Surface plasmon resonance (SPR) analysis was used to calculate the binding affinities of NNRTIs to HIV-RT and FIV-RT. The molecular docking and molecular dynamic simulations were used to demonstrate the mechanism of FIV-RT and HIV-RT with first and second generation NNRTI complexes. Results: The IC50 values of NNRTIs NVP, EFV, and RPV against FIV-RT were in comparable ranges to HIV-RT. The SPR analysis showed that NVP, EFV, and RPV could bind to both enzymes. Computational calculation also supports that these NNRTIs can bind with both FIV-RT and HIV-RT. Conclusions: Our results suggest the first and second generation NNRTIs (NVP, EFV, and RPV) could inhibit both FIV-RT and HIV-RT.
Hong, Hai Xia;Zhang, Yan Ming;Xu, Hao;Su, Zheng Yuan;Sun, Pei
Molecules and Cells
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제24권3호
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pp.358-363
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2007
Swine endothelial cells are commonly used as an in vitro model for studying features of the blood-brain barrier and some hemorrhagic diseases. However, primary cultures of swine cells have finite lifespans. To establish immortalized swine umbilical vein endothelial cells (SUVECs) using human telomerase reverse transcriptase (hTERT), the plasmid pCI-neo-hTERT was transfected into SUVECs by lipofection. Clones were selected for G418 resistance, and positive clones were amplified. One of the clones was cultured for up to 50 passages. Factor VIII-related antigen and CD34 were detected. The immortalized cells shared the properties of normal cells, such as contact inhibition, serum requirement and anchorage dependence. Karyotype analysis revealed that the immortalized cells were in the diploid range. In addition, both in vivo and in vitro assays of tumorigenicity showed no neoplastic transformation. Furthermore, NO, $PGI_2$, and ET-1 concentrations in the transfected cells were normal. These results suggest that the SUVECs immortalized by hTERT retain their original characteristics.
Kim, Seok-Ryel;Kim, Du-Woon;Kwon, Ki-Sung;Hwang, In-Gyun;Oh, Myung-Joo
Food Science and Biotechnology
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제17권3호
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pp.651-654
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2008
In order to enhance the efficacy of norovirus detection by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) and nested PCR, this study developed a norovirus mRNA concentration method using poly oligo dT-conjugated magnetic beads. An efficient norovirus detection protocol was performed on commercial ham using 2 viral elution buffers (glycine buffer and Tris beef extract buffer) and 2 concentration solutions [polyethylene glycol (PEG) and zirconium hydroxide]. The different approaches were verified by RT-PCR and nested PCR. This method was performed on ham in less than 8 hr by artificial inoculation of serial dilutions of the virus ranging from 1,000 to 1 RT-PCR unit/mL. The viral extraction and concentration method had 10-fold higher sensitivity using the combination of Tris beef extract buffer and PEG as compared to glycine buffer and zirconium hydroxide. This method proved that RT-PCR and nested PCR have the sensitive ability to detect norovirus in commercial ham, in that norovirus was successfully detected in artificially contaminated samples at a detection level as low as 1-10 RT-PCR unit/mL. Overall, such a detection limit suggests this protocol is both quick and efficient in terms of its potential use for detecting norovirus in meat products.
We report here that an ethanol extract of Tetracera scandens, a Vietnamese medicinal plant, has anti-HIV activity and possesses strong inhibitory activity against HIV-1 reverse transcriptase (RTase). Using a MT-4 cell-based assay, we found that the T. scandens extract inhibited effectively HIV virus replication with an $IC_{50}$ value in the range of 2.0-2.5 ${\mu}g$/ml while the cellular toxicity value (CC50) was more than 40-50 ${\mu}g$/ml concentration, thus yielding a minimum specificity index of 20-fold. Moreover, the anti-HIV efficacy of the T. scandens extract was determined to be due, in part, to its potent inhibitory activity against HIV-1 RTase activity in vitro. The inhibitory activity against the RTase was further confirmed by probing viral cDNA production, an intermediate of viral reverse transcription, in virus-infected cells using quantitative DNA-PCR analysis. Thus, these results suggest that T. scandens can be a useful source for the isolation and development of new anti-HIV-1 inhibitor(s).
Kim, Kyong-Tai;Park, Se-Young;Hong, Eun-Kyung;Han, Yong-Bok;Kim, Jong-Bae
Biomolecules & Therapeutics
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제3권3호
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pp.210-216
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1995
Partially purified water-soluble extract mixture from Ricini and Coptidis (named as RIC) showed to be a potent inhibitor of human immunodeficiency virus-1 (HIV-1) replication. RIC was evaluated for in vitro anti-HIV activity using SupTl and H9 cells infected by a recombinant virus (pSVCAT) containing chloramphenicol acetyltransferase (CAT) gene substituted for nef gene in the HIV-1 genome. RIC inhibited syncytiaformation of SupTl cells with a half maximal effective concentration, $IC_{50}$/, of 2.5 $\mu\textrm{g}$/mι and showed marked inhibition of CAT activity in the infected H9 cells and also suppressed reverse transcriptase (RT) activity in the supernatant of the infected H9 culture. However, RIC did not inhibit the activity of reverse transcriptase directly when it was mixed with the enzyme or with viral particles. Berberine, one of components of RIC, also showed similar anti-HIV activity as RIC did. The data suggest that there are active ingredients which mediate anti-HIV activity in RIC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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