Here, we reported a novel secreted protein elicitor PeBL2 from Brevibacillus laterosporus A60, which can induce hypersensitive response in tobacco (Nicotiana benthamiana). The ion-exchange chromatography, high-performance liquid chromatography (HPLC) and mass spectrometry were performed for identification of protein elicitor. The 471 bp PeBL2 gene produces a 17.22 kDa protein with 156 amino acids containing an 84-residue signal peptide. Consistent with endogenous protein, the recombinant protein expressed in Escherichia coli induced the typical hypersensitive response (HR) and necrosis in tobacco leaves. Additionally, PeBL2 also triggered early defensive response of generation of reactive oxygen species ($H_2O_2$ and $O_2{^-}$) and systemic resistance against of B. cinerea. Our findings shed new light on a novel strategy for biocontrol using B. laterosporus A60.
Field trial was conducted at the Research Farm of the Katsina State Agricultural and Rural Development Authority during the farming season of 2004 with a view to evaluate/determine the efficacy of some selected plant-derived biopesticides against the insect pests of cowpea as well as their effect on yield. The variety of the cowpea used was IT86D-719 and the plant derived biopesticides evaluated during the trial were chilli pepper, garlic, ginger, neem, sweetsop and tobacco. The experimental field was ploughed, harrowed and thereafter ridged before the commencement of the 2004 planting season. A total of twenty one (21) experimental plots were demarcated and arranged into seven treatment plots. The size of each plot was $5m{\times}4m$ while interspaces between adjacent plot and blocks were 1m and 2m, respectively. Results of the experiments showed that all the plant-derived biopesticide treatments were significantly (p>0.05) better than control treatment. The order of effectiveness of the treatments was tobacco (80-90%), sweetsop (75-85%), garlic (70-80), neem (72-78%), chilli pepper (60-70%) and ginger (30-50%). Furthermore, yield result corresponded positively with the effectiveness of the treatments. Results of the present finding suggest the use of tobacco, sweetsop and garlic as promising biopesticides in the control of cowpea insect pests.
Non-chemical or low-chemical control measures against key insect pests and rats in the ginseng field were studied from 1993 through 1999. Broadcasting chemicals beside the ginseng field in the oviposition period showed the same control effect on the adults of the Korean black chafer, Holotrichia diomphalia, as broadcasting at the ginseng ridge. Ginseng damage by adults of African mole cricket, Gryl1ota1pa africana, were reduced considerably by broadcasting chemicals beside the ginseng field. The larvae of wheat wireworm, Ectinus sericeus, were attracted effectively to potatoes in the ginseng field. Spreads of the mealybug, Pseudococcus comstocki, were very slow in the ginseng field, indicating that it is possible to eradicate the early colonies of Pseudococcus comstocki effectively. The rat repeller, Dekur $500S^{showed}$ a significant control effect of rats in the ginseng field.
During the screening of biological control agents for insect pests in the greenhouse, 70 dead insect-related fungi were isolated and tested insecticidal effect of their culture filtrates was tested. From this studies, CNAB-63 isolate showed strong control effects against the cotton aphids and the two-spotted spider mite as 65.19% and 77.55%, respectively. The insecticidal active compound of CNAB-63 isolate was purified from culture filtrate by silica gel chromotography, thin layer chromatography and HPLC. Purified active compound (CNAB) showed control effects against the two-spotted spider mite with 63.45% at $100\;{\mu}g/ml$ concentration. However, it did not exhibit antimicrobial activity against fungi and bacteria.
Kim, Yeongtae;Kim, Eunsung;Park, Youngjin;Kim, Yonggyun
Korean journal of applied entomology
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v.54
no.1
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pp.7-15
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2015
CpBV (Cotesia plutellae bracovirus) is a polydnavirus and encodes a cystatin (CpBV-CST1) gene. Its overexpression suppresses insect immunity and alters insect developmental processes. This study aimed to construct a genetically modified (GM) tobacco to further explore the physiological function of the viral cystatin and to apply to control insect pests. To this end, the transgenic tobacco lines were screened in expression of the target gene and assessed in insecticidal activity. A recombinant vector (pBI121-CST) was prepared and used to transform a bacterium, Agrobacterium tumefasciens. The transformed bacteria were used to generate transgenic tobacco lines, which were induced to grow callus and resulted in about 92% of shoot regeneration. The regenerated plants were screened by PCR analysis to confirm the insertion of the target gene in the plant genome. In addition, the expression of the target gene was assessed in the regenerated plants by quantitative real-time PCR (qRT-PCR). The qRT-PCR analysis showed that the transgenic line plant expressed the target gene about 17 times more than the control tobacco, indicating a stable insertion and expression of the target gene in the transgenic tobacco line. The insecticidal activity was then analyzed using the screened transgenic tobacco lines against the teneral 1st instar larvae of the oriental tobacco budworm, Helicoverpa assulta. Though there was a variation in the insecticidal efficacy among transgenic lines, T9 and T12 lines exhibited more than 95% mortality at 7 days after feeding treatment. These results suggest that CpBV-CST1 is a useful genetic resource to be used to generate GM crop against insect pests.
Damage and control of cutworms in the tobacco fields were studied during 1998~2000. It was estimated by surveys on cutworm damage that control measures should be taken for 9.0~10.2% of the surveyed fields. However, most of the interviewed growers broadcasted granule insecticides before or during tobacco plant transplantation. The damaging period and cutworm behavior suggested that the most effective control method would be the application of emulsifiable concentrate or wettable powder around the base of tobacco plants in the fields showing more than ca. 2% of damage ratio.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.15
no.1
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pp.87-91
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2007
A diverse kind of environment-friendly agricultural materials(EFAM) for the control of insect pests is on the market. These EFAMs are a part of essential sources for the accomplishment of successful, sustainable, and environment-friendly agriculture. Thus, accurate information of these EFAMs is one that required for the success of environment-friendly agriculture, but, in reality, still appropriate information is absolutely in shortage. In this study, we, therefore, tested the efficacy of commercial EFAMs against two lepidopteran insect larvae, the diamondback moth Plutella xylostella(Lepidoptera: plutellidae) and the tobacco cutworm Spodoptera litura(Lepidoptera: Noctuidae). After the two insect pests were successfully stabilized in indoor environment the larvicidal activity was tested at $24{\pm}1^{\circ}C$, relative humidity(RH) of $60{\pm}5%$, and a photoperiod of 16L:8D, and mortality was determined 48 hrs after EFAMs are treated. The EFAMs that showed more than 90% of larvicidal activity were each six among 16 against both P. xylostella and S. litura and only three of them showed consistent larvicidal activity against both species, signifying species specificity of EFAMs and importance of selection of proper EFAMs depending on target insect pest.
BACKGROUND: In organic agriculture, various cover crops have been used to control weeds. In this study, we investigated the suppressive effects of Vicia tetrasperma (L.) Schred (Eolchigi wandu) on the occurrence of major insect pests and their natural enemies in pepper. METHODS AND RESULTS: To estimate the effect of cover-crop on arthropod diversities and occurrences of insect pest in pepper. V. tetrasperma was sowed as cover-crop plot October, 2008 and 2009. Control plot was kept bare in winter season and mulched with black plastic-film before transplanting red pepper seedlings. Pepper seedlings, Capsicum annuum, were transplanted on the 19th of May, 2009 and on the 20th of May, 2010, respectively. Five Yellow sticky traps were set and changed at 7 days interval. Densities of aphids and thrips and damaged fruit rates by oriental tobacco budworm, Helicoverpa assulta, were counted. CONCLUSION(S): Populations of aphids, thrips and braconid wasps were maintained high on V. tatrasperma before transplanting pepper seedlings and in early season of pepper. However, the densities of aphids on pepper in the control plot were much higher than in the cover-crop plot in the early stage of pepper. Damaged fruit rates by both of thrips and oriental tobacco budworm were not significantly different between the two experimental plots.
Kim, Gi-Don;Lee, Siwon;Kang, Eun-Ha;Shin, Yong-Gil;Jeon, Jae-Yong;Heo, Noh-Yeol;Lee, Heung-Sik
Korean Journal of Agricultural Science
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v.40
no.2
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pp.93-99
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2013
The disease and insect were surveyed locally in greenhouse, fruit packing house and store house of 51 farms in 13 towns having purpose of paprika exportation. By analysis, various disease and insect were not only founded locally but more ones detected in farms having old facilities and no natural enemy. We found 15 pathogens such as Fusarium spp., Alternaria solani, Leveilluila taurica, PepMV (Pepino mosaic virus) and TMV (Tobacco mosaic virus) in greenhouse, Fusarium spp. in fruit packing house and Penicillium spp. in store house. We found 15 insects in greenhouse such as Bemisia tabaci, rialeurodes vaporariorum and Myzus persicae in greenhouse, Hylobitelus haroldi in fruit packing house. However, the problem quarantine disease and insect for importation and exportation were not detected in inspection time.
Polydnaviruses (PDVs) are a group of double-stranded DNA viruses symbiotic to some endoparasitoid wasps. Cotesia plutellae bracovirus (CpBV) is a PDV symbiotic to an endoparasitoid wasp, C. plutellae, parasitizing young larvae of Plutella xylostella. An early expressed gene, CpBV-ELP1, plays an important role in the parasitism by suppressing host cellular immunity by its cytotoxic activity against hemocytes. This study aimed to test its oral toxicity against insect pest by expressing it in a recombinant tobacco plant. A recombinant CpBV-ELP1 protein was produced using a baculovirus expression system and secreted to cell culture medium. The cell cultured media were used to purify CpBV-ELP1 by a sequential array of purification steps: ammonium sulfate fractionation, size exclusion chromatography, and ion exchange chromatography. Purified rCpBV-ELP1 exhibited a significant cytotoxicity against Spodoptera exigua hemocytes. CpBV-ELP1 was highly toxic to the fifth instar larvae of S. exigua by injection to hemocoel. It also showed a significant oral toxicity to fifth instar larvae of S. exigua by a leaf-dipping assay. CpBV-ELP1 was cloned into pBI121 vector under CaMV 35S promoter with opaline synthase terminator. Resulting recombinant vector (pBI121-ELP1) was used to transform Agrobacterium tumefaciens LBA4404. The recombinant bacteria were then used to induce callus of a tobacco (Nicotiana tabacum Xanthi) leaves and subsequent generation (T1) plants were selected. T1 generation tobacco plants expressing CpBV-ELP1 gave significant insecticidal activities against S. exigua larvae. These results suggest that CpBV-ELP1 gene can be used to control insect pests by constructing transgenic crops.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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