The efficiency of mtCOI amplication after DNA extraction of benthic harpacticoid Tigriopus japonicus s.l. was tested under different conditions depending on fixative (99% Ethanol, or 4% Formalin) and additional chemicals (Ludox or Rose Bengal). Each experimental group by the fixative was subdivided into four groups, respectively: 1) Control (fixative only), 2) processed with Ludox HS40, 3) processed with Rose Bengal, and 4) processed with both Ludox HS40 and Rose Bengal. For the 99% ethanol-fixed sample, overall success rate of amplification by PCR was 96% or above, while for the 4% formalin-fixed one, success rate was much lower than those of ethanol-fixed: 1) Control: 27%, 2) Ludox HS40: 3%, 3) Rose Bengal: 7%, and 4) Ludox HS40 and Rose Bengal: 3%. As a result present study verify that 99% ethanol is a proper fixative for DNA extraction in meiofauna organisms.
Journal of the Korean Society for Marine Environment & Energy
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v.15
no.4
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pp.281-291
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2012
In this study, WET (whole effluent toxicity) test with Skeletonema costatum, Tigriopus japonicus and Paralichthys olivaceus and ERA (environmental risk assessment) were conducted to assess the unacceptable effect on marine ecosystem by emitting the treated discharge water from 'ARA Plasma BWTS' BWMS (ballast water management system) using filtration, Plasma and MPUV module. 34 psu treated discharge water from ARA Plasma BWTS shown slight chronic toxicity effect on the P. olivaceus ($7d-LC_{50}{\Rightarrow}100.00%$ treated discharge water, $7d-LC_{25}{\Rightarrow}85.15%$ treated discharge water). Bromobenzene, chlorobenzene and 4-chlorotoluene in 34 psu treated discharge water from ARA Plasma BWTS were higher than in the background original content of seawater. The PECs (predictive environmental concentrations) of bromobenzene, chlorobenzene and 4-chlorotoluene calculated by MAMPEC (marine antifoulant model to predict environmental concentrations) program (ver. 3.0) were 3.34E-03, 2.10E-03 and 1.73E-03 ${\mu}g\;L^{-1}$, respectively and PNECs (predicted no effect concentrations) of them were 1.6, 0.5 and 1.9 ${\mu}g\;L^{-1}$. The PEC/PNEC ratio of bromobenzene, chlorobenzene and 4-chlorotoluene did not exceed one and 3 substances did not consider as persistence, bioaccumulative and toxic. Therefore, it was suggested that treated discharge water from ARA Plasma BWTS did not pose unacceptable effect on marine ecosystem.
The whole mitochondrial genome (14,915 nt) of Pollicipes mitella (Crustacea, Maxillopoda, Cirripedia, Thoracica) was sequenced and characterized. It is the shortest of the 31 completely sequenced crustacean mitochondrial genomes, with the exception of a copepod Tigriopus japonicus (14,628 nt). It consists of the usual 13 protein-coding genes, 22 tRNA genes, 2 rRNA genes, and 1 relatively short non-coding region (294 nt). The thoracican cirripeds apart from Megabalanus volcano have the same arrangement of protein-coding genes as Limulus polypemus, but there are frequent tRNA gene translocations (at least 8). Some interesting translocation features that may be specific to the thoracican cirriped lineage are as follows: 1) trnK-trnQ lies between the control region and trnI, 2) trnA-trnE lies between trnN and trnS1, 3) trnP lies between ND4L and trnT, and 4) trnY-trnC lies between trnS2 and ND1. In P. mitella there are two trnL genes (L1 and L2) in the typical crustacean positions (ND1-L1-LrRNA and CO1-L2-CO2). The present result is compared and discussed with the other three cirriped mitochondrial genomes from one pedunculate (Pollicipes polymerus) and two sessiles (Tetraclita japonica and M. volcano) published so far. Mitochondrial protein phylogenies reconstructed by the BI and ML algorithms show that the thoracican Cirripedia is monophyletic (BPP 100/BP 100) and associated with Remipedia (BPP 98/BP 35). In addition, Oligostraca, including Ostracoda, Branchiura, and Pentastomida, is a monophyletic group (BPP 99/BP 68), and is basal to all the other examined arthropods. Remipedia + Cirripedia appears as an independent lineage within Arthropoda, apart from Thoracopoda (Malacostraca, Branchiopda, and Cephalocarida). The Thoracopoda is paraphyletic to Hexapoda. The present result suggests that the monophylies of Crustacea and Maxillopoda should be reconsidered.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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