The microbial community during composting of gargage was analyzed using 16S rDNA PCR - DGCE (denaturing gradient gel electrophoresis). Pseudomonas spp. was found throughout the process, and thermophilic Bacillus spp. was dominated at the thermophilic stage. Six thermophilic bacteria were isolated and identified as B. caldoxylolyticus, B. thermoalkalophilus, and B. thermodenitrificans.
Kim, Young-Kee;Eom, Yong-Suk;Oh, Byung-Keun;Lee, Won-Hong;Choi, Jeong-Woo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.11
no.4
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pp.570-576
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2001
Thermophilic aerobic bacteria were applied in the degradation of industrial waste activated sludge (WAS) on a laboratory scale expreiment. The performance of digestion was estimated by measuring the reduction of total suspended solids (TSS), dissolved organic carbon (DOC), and total organic carbon (TOC). Among three strains of Bacillus stearothermophilus and three strains of Thermus species, B. stearothemophilus ATCC 31197 showed the best overall efficiency level for the degradation of industrial WAS, which was collected from a wastewater treatment plant in an oil refinery factory. Industrial WAS coul be successfully detraded in a batch digestion with ATCC 31197. The stability of the digestion process with ATCC 31197 was successfully verified by semi-continuous (fill-and-draw) digestion experiment. From the results of this study, it was shown that the thermophilic aerobic digestion process with ATCC 31197 could efficiently be applied to the degradation of industrial WAS.
Spent mushroom substrate (SMS) is a by-product remained after a crop of mushrooms. About seven thermophilic strains were isolated from SMS (Flammulina velvtipes). Among them, one isolate, designated UJ03, showed the antifungal activity against Aspergillus flavus and Aspergillus ochraceous producing mycotoxin on PDA medium, potentially. The strain UJ03 produced cellulase and xylanase as extracellular hydrolases. The strain UJ03 was identified as a member of the genus Bacillus by biochemical characteristics using Bacillus ID kit and VITEK 2 system. Comparative 16S rDNA gene sequence analysis showed that strain UJ03 formed a distinct phylogenetic tree within the genus Bacillus and was most closely related to Bacillus amyloliquefaciens with sequence similarity of 98.9%. On the basis of its physiological properties, biochemical characteristics and phylogenetic distinctiveness, strain UJ03 was classified within the genus Bacillus, for which the name Bacillus sp. UJ03 is proposed. The antifungal compound from Bacillus sp. UJ03 was similar to lipopeptide iturin A of Bacillus sp.
The intracellular invertase gene of alkalophilic and thermophilic Bacillus sp. TA-11 which was isolated from compost was cloned and expressed in E. coil HB101 using pUC19 as a vector. The invertase of the recombinant E. coli (pYC 17) was maximally produced when it was incubated at 37$^{\circ}C$ for 9 h in a SY medium containing 0.25% sucrose, 0.5% yeast extract, 0.1% each of $K_2HPO_4$ and $KH_2PO_4$, with an initial pH of 8.0. The final enzyme activity under the above condition was 47.7 U per ml of cell-free extract.
A thermophilic microorganism, strain JE 375, which produces a thermostable protease, was isolated from soil and compost in Korea. This gram-positive, rod-shaped, catalase positive, motility positive, and hemolysis ${\beta}$ containing organism was implicated in glucose fermentation, mannitol fermentation, xylose oxidation, aerobic activity and spore formation. The color of the colony was yellowish white. The temperature range for growth at pH 6.5 was between 55 and $70^{\circ}C$, with an optimum growth temperature of $65^{\circ}C$. This result confirmed the strain JE 375 as a thermophilic microorganism. The enzyme was produced aerobically at $65^{\circ}C$ during 20 hr in a medium (pH 6.5) containing 1% trypton. 1% maltose, 0.5% yeast extract and 1% NaCl. The 16S rDNA of strain JE 375 had 97.6% sequence similarity with the 16S rDNA of Bacillus caldoxyloyticus. On the basis of biochemical and physiological properties and phylogenetic analysis, we named the isolated strain as Bacillus sp. JE 375. The thermostable protease from Bacillus sp. JE 375 had been partially purified and characterized. The molecular weight of the enzyme was deduced from SDS-PAGE and gel chromatography as 55 kDa and its optimal temperature was $60^{\circ}C$. The enzyme showed its highest activity at pH 7.5 and was stable from pH 7.0 to 8.0.
For screening thermostable $\alpha$-amylase from thermophiles, various samples from extreme environments such as hot spring and sewage near them, and compoat, wereexamined microbial growth in enrichment culture medium at 55$\circ$C on the assumption that enzymes from thermophiles are inevitable thermostable. One strain showing higher $\alpha$-amylase activity was pure cultured and designated as Bacillus sp. TR-25 from the results of morphological, cultural and physiological characteristics. The most important carbon sourses for the enzyme production were soluble starch, dextrin, potato starch and corn starch. Glucose and fructose had a catabolite repression on the enzyme production. The good nitrogen sources for the enzyme production were yeat extract, nutrient broth, tryptone, corn steep liquor and ammonium sulfate. The enzyme production was accelerated by addition of CaCl$_{2}$. $\cdot $ H$_{2}$O. The optimal medium composition for the enzyme production was soluble starch 2.0%, yeast extract 0.55, CaCl$_{2}$ $\cdot $ 2H$_{2}$O 0.015, Tween 80 0.001%, pH8.0, respectively. In jar fermenter culture, this strain shows a rapid growth and required cheaper carbon and nitrogen source. These properties are very useful to fermentation industry. The $\alpha$-amylase of this strain demonstrated a maximum activity at 80$\circ$C, pH 5.0, respectively. And calcium ion did not improve thermostability of the enzyme. At 10$0^{\circ}C$, this enzyme has 235 of relative activity. Transformation was carried out by thermophilic Bacillus sp. TR-25 genomic DNA. As a result, the transformant has increased thermostable $\alpha$-amylase activity.
Kim, Dae-Joon;Yoon, Ki-Hong;Kim, Seung-Ho;Cho, Ki-Haeng;Min, Bon-Hong
BMB Reports
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v.28
no.4
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pp.348-352
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1995
A thermophilic Bacillus sp. strain KK-1 isolated from soil produced an extracellular xylanase. From the culture supernatant of Bacillus sp., the xylanase was purified to homogeneity by ammonium sulfate precipitation and DEAE-Sephadex A-50 chromatography. The molecular weight of the purified xylanase was estimated to be 45 kDa by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and gel permeation chromatography. The apparent $K_m$ values for xylanase, using oat spelt xylan and birchwood xylan as substrates, were 7.1 mg/ml and 3.2 mg/ml, and $V_{max}$ values were $27.0\;{\mu}mol{\cdot}min^{-1}{\cdot}mg^{-1}$ and $29.0\;{\mu}mol{\cdot}min^{-1}{\cdot}mg^{-1}$, respectively. The xylanase hydrolyzed oat spelt xylan to mostly xylobiose, xylotriose, and xylose. The amino acid composition indicated that the xylanase contained high amounts of amino add residues of glutamic acid and glutamine (Glx) and aspartic acid and asparagine (Asx).
Regulation of $\beta$-galactosidase biosynthesis was studied with alkalophilic, thermophilic Bacillus sp. TA-11. Biosynthesis of the enzyme was effectively induced by lactose and some low level by isoprophyl-$\beta$-D-thiogalactopyranoside(IPTG). When 30mM glucose was added at the different intervals to the culture that had been in contact with lactose, the different levels of the enzyme synthesis were observed. So, this suggests that glucose interfered with the entry of the lactose into the cells.The glucose inhibitory effect was not relieved by adding cAMP to the culture.
Kim, Myung Kil;Choi, Don Ha;Choi, In Gyu;Kim, Byung Gyu;Song, Jae Gyung
Journal of the Korean Wood Science and Technology
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v.34
no.1
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pp.68-78
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2006
The purpose of this study was to estimate the identification of thermophilic hacterial with fermentation of pig manure. To identify the characters of thermophilic bacteria related to fermentation at a high temperature condition, we selected 28 different kinds of original settling thermophilic bacteria that were sampled at different 23 areas. They were distributed 1$1{\times}10^5{\sim}10^8CFU$ at medium and the enzyme activity at $55^{\circ}C$ incubation condition, especially cellulase and a-amylase, were higher than those of $30^{\circ}C$. Partial sequencing data for 165 rDNA region were obtained from 28 samples representing 15 different genera. Bacillus subcilis, one of those bacteria, has endodermic spores at high fermented condition.
A thermophilic microorganism, which is able to hydrolyze starch, was isolated from soil and compost in Korea. It was Gram-positive, rod-shaped, catalase positive, nonmotile, glucose and mannitol fermentative, xylose oxidative, and spore forming microorganism. It also has an ability to hydrolyze casein and gelatin. The color of colony was yellowish white. The sequence of 16S rDNA of strain 2719 showed 99.5% sequence homology with the sequence of 16S rDNA of Bacillus thermoglucosidasius. On the basis of biochemical and physiological properties and phylogenetic analysis, the isolated strain was named as Bacillus thermoglucosidasius 2719.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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