• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제13권1호
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• pp.84-87
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• 2010

A peptide that inhibits HIV-1 protease was isolated from a hydrolysate of oyster (Crassostrea gigas) proteins digested with thermolysin. The peptide was using membrane filtration, gel permeation chromatography, ion exchange chromatography, and reverse-phase high performance liquid chromatography. Amino acid sequence of the peptide was determined to be Val-Phe-Glu-Leu. Chemically synthesized Val-Phe-Glu-Leu showed an $IC_{50}$ value of 106 ${\mu}M$.

• 한국수산과학회지
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• 제35권5호
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• pp.529-533
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• 2002

바지락 단백질의 thermolysin 가수분해물로부터 분자량 한계범위가 10,000 da인 한외여과막을 통과한 저분자량의 물질을 Sephadex LH-20 column을 이용한 겔 크로마토그래피에서 ACE에 대하여 저해 활성을 가지는 3개의 획분을 분취하여 SP-Toyopearl 650S column과 SuperQ-Toyopearl 650S column을 이용한 이온 교환 크로마토그래피에 의하여 4개의 활성 획분을 얻었다. 이 중 가장 높은 절해 활성을 나타내는 획분의 아미노산 조성은 alanine, leucine, isoleucine 및 threonine의 함량이 많았고, 활성 발현에 있어 C 말단 아미노산 잔기로서 중요한 역할을 하는 proline의 함량도 $3.7\%$%인 것으로 나타났다. ACE 저해 활성은 $IC_{50}$ 값이 0.748 $\mu$g이었다.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제8권2호
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• pp.154-157
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• 2003

A peptide inhibiting HIV-1 pretense was isolated from the hydrolysate of manila clam (Ruditapes philippinarum) proteins digested with thermolysin. The peptide was purified by using membrane filtration, gel permeation chromatography, ion exchange chromatography, and reverse phase HPLC, The amino acid sequence of the peptide was determined to be Ile-Tyr-Glu-Gly. This tetrapeptide sequence exists in some proteins of Physarum polycephalum and Mycobacterium smegmatis. Chemically synthesized Ile-Tyr-Glu-Gly showed the $IC_{50}$/ value of 22.3 $\mu$M.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제8권2호
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• pp.109-112
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• 2005

A peptide that inhibits angiotensin-converting enzyme (ACE) was isolated from a hydrolysate of Manila clam (Ruditapes philippinarum) proteins prepared with thermolysin. Amino acid sequence of the peptide was determined to be Leu-Leu-Pro. Chemically synthesized Leu-Leu-Pro had an $IC_{50}\;value\;of\;158\;\mu{M}$. Peptides related to the Manila clam-derived peptide were synthesized to study the structure-activity relationships. The tetrapeptide, Leu-Leu-Pro-Pro, had a very weak effect on the enzyme. However, Leu-Leu-Pro-Asn showed no inhibitory activity.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제32권3호
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• pp.430-436
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• 2019

Objective: This study identified angiotensin I-converting enzyme (ACE) inhibitory peptides in beef M. longissimus injected with thermolysin (80 ppm) and stored for 3 days at $5^{\circ}C$. Methods: Crude peptides (molecular weight <3 kDa) were obtained from the thermolysin hydrolysate and separated into seven fractions. Fraction V showing the highest ACE inhibitory activity was further fractionated, yielding subfractions V-15, V-m1, and V-m2, and selected for superior ACE inhibitory activity. Finally, twelve peptides were identified from the three peak fractions and the ACE inhibitory activity ($IC_{50}$) of each peptide was evaluated. Results: The Leu-Ser-Trp, Phe-Gly-Tyr, and Tyr-Arg-Gln peptides exhibited the strongest ACE inhibitory activity ($IC_{50}$ values of 0.89, 2.69, and 3.09 mM, respectively) and had higher concentrations (6.63, 10.60, and 29.91 pg/g; p<0.05) relative to the other peptides tested. Conclusion: These results suggest that the thermolysin injection process is beneficial to the generation of bioactive peptides with strong ACE inhibitory activity.

• 한국어업기술학회:학술대회논문집
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• 한국어업기술학회 2002년도 추계 수산관련학회 공동학술대회발표요지집
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• pp.90-91
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• 2002

The angiotensin converting enzyme (ACE) generates the powerful vasoconstrictor angiotensin II by removing the C-terminal dipeptide from the precursor decapeptide angiotensin I (1). The enzyme also inactivates the vasodilator bradykinin (2). There have been many studies on ACE inhibitory substances as functional in food, and ACE inhibitory peptides were isolated (3-5). (omitted)

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제45권2호
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• pp.319-326
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• 2003

본 실험은 쇠고기의 비 선호부위를 고도로 이용하기 위한 연구의 일환으로 쇠고기의 염통과 지라를 각종효소로 가수분해하여 얻은 분획물을 한외여과와 gel-filtration, 그리고 HPLC를 이용하여 분리 및 정제하여 얻은 펩타이드의 ACE 저해 활성을 검토한 실험이다. 쇠고기 염통과 지라에서 수용성 단백질을 추출한 다음 효소 처리하여 4, 8, 12, 24시간 동안 37$^{\circ}C$에서 배양하였다. 염통과 지라단백질의 가수분해물의 ACE 저해 활성을 측정한 결과 염통에서는 Thermolysin과 Proteinase A 효소를 12시간 혼합처리한 가수분해물에서 가장 좋은 ACE 저해 효과를 보여주었고 지라에서는 Thermolysin과 Protease 효소를 24시간 혼합처리한 가수분해물에서 ACE 저해 효과가 가장좋았다. ACE 저해효소가 가장 좋은 가수분해물을 Ultrafiltration 통해 분리하였으며, 분리 정제된 가수분해물을 Gel-filtration을 통해서 분획 하였다. 이때 염통에서는 F11, F36, F51, F63, F72의 큰 분획물을 얻었고 지라에서는 F30, F55, F71, F91에서 큰 분획물을 얻었다. 이 분획물들의 ACE 저해 활성을 측정한 결과 염통에서는 F72에서 $IC_{50}$값 0.37mg/ml로 ACE 저해 활성이 가장 좋았다. 지라에서는 F30에서 $IC_{50}$값 1.840 mg/ml로 ACE 저해 활성이 가장 좋았다. 그리고 여기서 활성이 좋은 염통을 가지고 Reversed- Phase HPLC를 이용하여 분리 한 결과 4개의 큰 피크들을 얻을 수 있었다. 그 결과 peak 1, peak 2, peak 3, peak 4의 IC50값은 각각 0.28mg/ml, 0.26mg/ml, 0.25mg/ml, 0.35mg/ml이었다. 이 peak들의 아미노산을 분석한 결과, peak 1에서는 glycine과 methionine, peak 2는 proline, cystine, methionine, peak 3는 proline, peak 4는 alanine, methionine, leucine 이 주요 구성 성분 아미노산이었다. 위 실험 결과로서, 염통과 지라에서의 ACE저해 활성은 염통이 지라보다 좋았고, 특히 Thermolysin과 Proteinase A 효소를 12시간 배양한 염통단백질 가수분해물에서 가장 좋은 ACE 저해 활성 peptide을 얻을 수 있었다.