전해알칼리환원수가 동물의 면역에 미치는 영향을 알아보고자 본 실험을 수행하였다. 소장에서 기생하는 호르텐스극구흡충(Echinostoma hortense)을 이용하여 C57BL/6 생쥐 소장과 혈액에서의 면역반응을 관찰하였다. C57BL/6 생쥐에 호르텐스극구흡충 피낭유충을 마리 당 15개 경구감염 시킨 후 2주 경과하여 충체를 회수하였고 소장 점막의 배상세포와 비만세포의 변화를 관찰하였으며 protein chip을 이용하여 혈청 내 cytokine의 변화를 비교 확인하였다. 그 결과 호르텐스극구흡충을 감염시킨 군에서는 평균 8.3마리, 알칼리환원 수를 급이한 군에서는 평균 10마리의 충체를 회수하였다. 배상 세포 변화의 관찰에서는 호르텐스극구흡충을 감염시키고 전해알칼리환원수를 급이한 실험군이 융모 당 평균 4.3개 관찰되어 배상세포의 발현이 적은 것으로(p<0.001) 나타났다. 비만세포 변화의 관찰에서도 호르텐스극구흡충을 감염시키고 전해알칼리환원수를 급이한 실험군에서 응모 당 평균 11개 관찰되었고 정수물을 급이한 호르텐스 감염 대조군에 비해 적게 나타났다(p<0.001). 마우스 혈청 내에서의 cytokine 발현에서 호르텐스극구흡충에 감염된 실험군과 대조군의 비교에서 Th1 cytokine인 IL-6, IL-$1{\beta}$, IFN-${\gamma}$, TNF-${\alpha}$, Il-2 등과 Th2 cytokine인 IL-4, IL-5, IL-10, IL-13 등의 발현은 모두 유의한 차이가 관찰되지 않았다. 본 연구에서 전기분해 알칼리환원수가 호르텐스극구흡충의 감염에 있어 C57BL/6 마우스에서 장점막조직의 배상세포 수 및 mucin terminal sugar의 변화를 억제하고 아울러 이로 인해 충체배출이 지연되며, 알칼리환원수가 호르텐스극구흡충에 감염된 C57BL/6 마우스에서 혈청 내 cytokine의 변화에는 큰 영향을 미치지 않는다는 결론을 얻었다.
Objectives: Poncirus trifoliata Rafinesque has been known to have anti-allergic effects in skin diseases. However, anti-atopic dermatitis effects of P. trifoliata Rafinesque have not been studied yet in skin diseases. The present study evaluated the anti-atopic dermatitis effects of P. trifoliata Rafinesque (PTR) using external treatments on AD. Methods: AD lesions were induced by the repeated application of 2, 4-Dinitrochlorobenzene (DNCB) on the shaved back of BALB/c mice. $100{\mu}{\ell}$ of PTR extracts was applied to the AD lesions for 11 days. Histological assessments, mast cells count and serum levels of IgE were analyzed. The anti-pruritic effects of PTR were examined by the change of scratching frequency and nerve growth factor (NGF) expression. In addition, the anti-inflammatory effects of PTR were examined by the expressions of Th2/Th1 cytokines and pro-inflammatory in dorsal skin. Results: Histopathological findings showed that topical application of PTR decreased the thickness of dermal and epidermal skin compared with the DNCB group. PTR also notably decreased the mast cells count and serum IgE. The scratching behavior of mice and expression of NGF were significantly reduced. In addition, PTR group significantly suppressed the IL-4, IL-6, IFN-${\gamma}$ and TNF-${\alpha}$ cytokines compared to the DNCB group. Conclusions: These results indicated that P. trifoliata Rafinesque possess anti-pruritus and anti-atopic dermatitis properties. Therefore, P. trifoliata Rafinesque might be used for treatment of pruritus and atopic dermatitis.
Toxoplasma gondii is an apicomplexan zoonotic protozoan parasite that infects most species of warm-blooded animals, including humans. The heavy incidence and severe or lethal damage caused by T. gondii infection clearly indicate a need for the development of an effective vaccine. T. gondii GRA8 is a member of the dense granules protein family and is used as a marker of acute infection. In the present study, we evaluated the protective immunity induced by DNA vaccination based on a recombinant eukaryotic plasmid, pDsRed2-GRA8, against acute toxoplasmosis in mice. BALB/c mice were intramuscularly immunized with the pDsRed2-GRA8 plasmid and then challenged by infection with the highly virulent GFP-RH strain of T. gondii. The specific immune responses and protective efficacy against T. gondii of this vaccine were analyzed by measuring cytokine and serum antibody titers, splenocyte proliferation assays, and the survival times of mice after challenge. Our results showed that mice immunized with pDsRed2-GRA8 demonstrated specific humoral and cellular responses, induced higher IgG antibody titers with predominant IgG2a production; increased levels of IL-10, IL-12 (p70), $IFN-{\gamma}$, $TNF-{\alpha}$, and splenocyte proliferation; and prolonged survival times compared to those of control mice. The present study showed that DNA immunization with pDsRed2-GRA8 induced humoral and cellular immune responses, and all immunized mice showed greater Th1-type immune responses and longer survival times than those of control mice. These results indicated that T. gondii GRA8 DNA immunization induces a partial protective effect against acute toxoplasmosis.
Kim, Hye-Young;Kang, Hyun Kyu;Cho, Joon;Jung, In Duk;Yoon, Gun Young;Lee, Min-Goo;Shin, Sung Jae;Park, Won Sun;Park, Jong-Hwan;Ryu, Seung-Wook;Park, Yeong-Min;You, Ji Chang
BMB Reports
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제48권3호
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pp.178-183
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2015
Dendritic cells play an important role in determining whether na${\ddot{i}}$ve T cells mature into either Th1 or Th2 cells. We determined whether heat-shock protein X (HspX) purified from Mycobacterium tuberculosis regulates the Th1/Th2 immune response in an ovalbumin (OVA)-induced murine model of asthma. HspX increased interferon-gamma, IL-17A, -12 and transforming growth factor (TGF)-${\beta}$ production and T-bet gene expression but reduced IL-13 production and GATA-3 gene expression. HspX also inhibited asthmatic reactions as demonstrated by an increase in the number of eosinophils in bronchoalveolar lavage fluid, inflammatory cell infiltration in lung tissues, airway luminal narrowing, and airway hyper-responsiveness. Furthermore, HspX enhanced OVA-induced decrease of regulatory T cells in the mediastinal lymph nodes. This study provides evidence that HspX plays critical roles in the amelioration of asthmatic inflammation in mice. These findings provide new insights into the immunotherapeutic role of HspX with respect to its effects on a murine model of asthma.
To study the effects of anti-cancer, anti-metastasis and immune response improvement effects of herbal-accupunture with Orostachys japhonicus A.Berger, infusion solution put into Kansu(BL18) of mouse induced by Colon26-L5 human colon cancer cells, which are corresponding to humanbody. We observed the change of body weight, surviving number, median surviving time, increase of life span, changes in amount of leukocyte, erythrocyte, platelet, total protein, creatinine, glucose and LDH, weight of spleen and kidney, histological analysis on tissue metastasis of liver, splenic cell proliferation, the expression of cytokine gene, the number of CD4+, CD8+, CD9+ and NK cell, and concluded like this. The results were obtained as follows ; 1. In acute and sub-acute cytotoxicity experiment, significantly signs were not appeared in all groups. 2. Antimetastatic experiment in vitro and in vivo showed that Orostachys Japhonicus A.Berger Herbal-acupuncture at Kansu(BL18) has antimetastatic effects. 3. The spleen cells proliferation of the experimental groups treated with Orostachys Japhonicus A.Berger infusion solution extract has increased significantly compared with that of the control group. 4. As compared with control, the population of total T cell, helper T cell, cytotoxic T cell and macrophage were increased. 5. The production of Th 1 type cytokines from splenocyte and cytokines which is associated with anti-tumor activity form macrophage were increased significantly. Above the results revealed that herbal-accupunture with Orostachys Japhonicus A.Berger infusion solution has effects of anti-cancer, anti-metastasis and immune response improvement.
Objectives : Gal-Geun-Tang (GT) has been described from SANGHAN in Korean traditional medicine and known to act against cold, fever, hypertension, and nasal catarrh. However, little has yet been learned about the effect of GT on immune function. In the current study, in vitro and in vivo immunomodulatory activity of GT (water extract) was investigated.Methods : Water extract of GT induced in vitro proliferation of spleen cells and significantly increased their proliferative responses during anti-CD3 activation. Using purified splenic T and B cells, it was revealed that GT has a mitogenic activity to B cells and promotes their proliferation induced by lipopolysaccharide, whereas T cell proliferation was not triggered and GT was rather inhibitory to T cell activation caused by anti-CD3 antibody. In the presence of antigen presenting cells (APC), GT addition resulted in a significant increase of IFNγ and IL-4, but not IL-2, production. However, addition of high concentration (1,000㎍/㎖) of GT led to a marked reduction in T cell cytokine production and under such condition, GT facilitated apoptosis of T cells when examined by flow cytometry with propidium iodide staining.Results : In vivo immunomdulation of GT was also investigated using a mouse model. Following keyhole limpet hemocyanin (KLH) immunization, GT (1 ㎎/day) was orally administered for 9 days. Cell numbers in thymus, spleen and peripheral blood were not altered by GT administration, indicating that such dose is not immunotoxic. Cell numbers in draining lymph nodes (LN) and ex vivo Ag-specific proliferation of LN cells were significantly elevated by GT administration. However, any preferential stimulation of T or B and CD4+ or CD8+ T cell subpopulations was not observed in a flow cytometric analysis of LN cells. This result shows that GT does not promote in vivo B cell proliferation while GT enhances Ag-specific proliferation of LN cells, unlike what was observed in vitro.Conclusions : For a further understanding of in vivo immunomodulatory activity of GT, ex vivo cytokine production of LN cells obtained from KLH-immunized mice was evaluated. Ag-specific IFNγ production was significantly higher in GT-treated mice when compared to PBS-treated control mice. In contrast, IL-4 production in GT-treated group was comparable to control group unlike to in vitro data. In addition, GT administration did not result in any significant differences in serum levels of Ig (IgM, IgG1 and IgG2a) between GT-treated and control groups. Taken together, these data strongly support that GT promotes immune response, more profoundly type 1 helper T cell (Th1) activity and GT may be applicable for treatment of intracellular parasite infection such as viral diseases.
The study was conducted to determine the effect of Salmonella typhymurium lipopolysaccharide (LPS) challenge on egg-laying performance, inflammatory response, zinc metabolism in layer fed diets supplemented with organic or inorganic zinc since 3-wk-old. The three dietary treatments were corn-soybean meal basal diet without supplemental zinc or with supplemental zinc at 60 mg/kg zinc from $ZnSO_4$ or zinc amino acid complex (ZnAA). At the age of 58 wk-old, twelve hens from each dietary treatment were allotted into two sub-groups. On day 1, 3, 5, 7 of the $58^{th}$ week of age, six birds of one sub-group were injected intraperitoneally (i.p.) with 2 ml LPS (1.0 $\ell$/ml) or sterile saline. Neither zinc source ${\times}$ immune challenge interaction nor zinc source effect on egg production performance was observed (p>0.05), LPS-challenge decreased egg production (p<0.04) and increased percentage of cracked eggs (p <0.01). With LPS challenged, the fever response of hens fed ZnAA peaked and subsided earlier than in hens fed $ZnSO_4$ or basal diet. Serum IL-1$\beta$ at 3 h was higher (p<0.01), but lower (p<0.001) at 12 h post-challenge with LPS in hens fed ZnAA than $ZnSO_4$. In salinetreated groups, serum IL 1$\beta$ was higher in hens fed ZnAA than the basal diet at 3 h post-injection (p<0.01). LPS-challenged birds had lower serum zinc and higher zinc sequestered in liver and spleen (p<0.001). In saline-treated birds, there was no difference in zinc concentration of serum, liver and spleen among different dietary treatments (p>0.05). Supplementation of 60 mg/kg zinc from either ZnAA or $ZnSO_4$ significantly (p<0.05) elevated metallothionein (MT) concentration in liver and spleen. MT concentration in liver of birds fed ZnAA diet was higher than in those fed $ZnSO_4$ diet (p<0.05). The magnitude of increase of hepatic and splenic MT due to LPS challenge was higher by supplementation of ZnAA than $ZnSO_4$. The results suggest that zinc amino acid complex enhanceed MT synthesis and zinc sequestered in liver and spleen and increased the sensitivity to immune response due to LPS challenge.
Objectives : This study was designed to examine the effects of Daecheonglyong-tang(DCL) on atopic dermatitis induced by DNCB in mice Methods : The Nc/Nga mice were divided into 5 groups, and four groups excluding the normal group were applied by 2,4-dinitrochlorobenzene(DNCB), to cause AD and were orally administered with distilled water(negative control), dexamethasone(positive control), and DCL 200 or 400mg/kg once a day for 4 weeks respectively. The visual changes on skin, changes in skin tissue thickness and eosinophil infiltration were observed. IgE, Histamine, Cytokines, immune cells and the amount of gene expression of filaggrin, VEGF, $TGF-{\beta}1$, EGF were measured. Results : Dermatitis score showed a gross improvement on all DCL groups, similar to or better than positive control. All DCL groups showed no significant change in the basophils, while neutrophils and eosinophils decreased. In only DCL 400 mg/kg groups, white blood cells and mononuclear cells were decreased and lymphocytes were increased. In particular, neutrophils had similar or better effects than the positive control. In all DCL groups, IgE, Histamine, $IL-1{\beta}$, IL-4, IL-5, IL-6 and $TNF-{\alpha}$ were decreased and IL-2 was increased. In only DCL 400 mg/kg groups, IL-10 decreased and $IFN-{\gamma}$ increased. In particular, $IL-1{\beta}$ and $IFN-{\gamma}$ showed a similar rate of increase and decrease comparing positive control in DCL 400 mg/kg. $TGF-{\beta}$1 was increased in all DCL groups, filaggrin and VEGF were increased in only DCL 400 mg/kg groups. EGF did not make any changes. Epidermis, dermis thickness and eosinophil infiltration were also decreased in all DCL groups. Conclusions : By increasing Th1 cytokine and decreasing Th2 cytokine, DCL extracts appear to be effective in controlling immune response imbalances, anti-inflammatory and skin regeneration and are likely to be available as a treatment for AD.
Arabinoxylan, a complex polysaccharide in cereal cell walls, has recently received research attention as a biological response modifier. The immunomodulating effect of arabinoxylans from rice bran (AXrb) was studied using a combined process of extrusion and commercial hemicellulase treatment in order to elucidate the augmentation mechanism of cell-mediated immunity in vitro. The cytotoxicity of mouse spleen lymphocytes against YAC-1 tumor cells was significantly enhanced by treatment with AXrb at $10-100\;{\mu}g/mL$. In an attempt to investigate the mechanism by which AXrb enhance NK cytotoxicity, we examined the effect of AXrb on cytokine production by spleen lymphocytes. Culture supernatants of the cells incubated with AXrb were collected and analyzed for IL-2 and IFN-${\gamma}$ synthesis by ELISA. IL-2 and IFN-${\gamma}$ production were increased significantly. These results suggest that AXrb may induce Th1 immune responses. Macrophages play an important role in host defenses against tumors by killing them and producing secretory products, which protect against bacterial, viral infection and malignant cell growth. AXrb were examined for their ability to induce secretory and cellular responses in murine peritoneal macrophages. When macrophages were treated with various concentrations ($10-100\;{\mu}g/mL$) of AXrb, AXrb induced tumoricidal activity, as well as increasing phagocytosis and the production of NO, $H_2O_2$, TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, and IL-6. These results indicate that reactive oxygen species, reactive nitrogen species, and inflammatory cytokines are likely to be the major mediators of tumoricidal activity in AXrb-treated macrophages. Therefore, AXrb may be useful in cancer immunotherapy and it is anticipated that AXrb obtained using extrusion and subsequent enzyme treatment can be used as an ingredient in nutraceuticals and cereal-based functional food.
Supplementation with probiotics can protect against the development of food allergies by modulating the host immune response; however, the mechanisms are not fully understood. The objective of this study was to investigate the allergy-reducing effects of regulatory dendritic cells (regDCs) induced by Lactobacillus paracasei L9 (L9) in β-lactoglobulin (BLG)-sensitized mice. The L9 supplement suppressed the aberrant balance of Th1/Th2 responses to BLG in mice, via upregulation of the CD4+CD25+Foxp3+Treg cell responses. The amount of CD4+CD25+Foxp3+Treg cells in mesenteric lymph nodes increased by 51.85%. Furthermore, administration of L9 significantly induced the expression of CD103 and reduced the maturation status of DCs in mesenteric lymph nodes, Peyer's patches, and spleen. Bone marrow-derived dendritic cells (BM-DCs) were activated by L9 in vitro, with an approximate 1.31-fold and 19.57-fold increase in expression of CD103 in CD11c+DCs and the level of IL-10 production, respectively, while the expression of CD86 did not change significantly. These data demonstrate that L9 reduced the BLG allergic sensitization, likely through regDCs mediated active suppression.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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