• Journal of Genetic Medicine
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• 제1권1호
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• pp.51-56
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• 1997

Spermatogenesis is known to be regulated by a number of genes and several factors such as hormones, growth factors, cytokines and others. This study was done to evaluate the relationship between HSPs and DAZ genes in human spermatogenesis; we observed the expression pattern of HSP gene in azoospermia men with DAZ gene that regulated the gene expression related with human spermatogenesis. RT-PCR method was used to detect DAZ, HSP70A, and HSP70B transcripts in all RNA samples. Total RNA was extracted from 21 testis tissues using TRIZOL reagent. cDNAs were synthesized with reverse transcriptase, AMV. All PCR reaction were performed on a PCR themocycler with DAZ, HSP70A, and HSP70B-specific primers. Semen analysis, karyotyping and testis histology were performed. DAZ gene, known as a candidate gene of azoospermia factor(AZF), was deleted in 2 of 21 patients. To evaluate the only effects of HSPs in this patients, 2 DAZ deleted cases were removed. We observed the mRNA of HSP70B in 5 whereas none could be seen with regard to HSP70A. Furthermore, the sperm of these 5 men were discovered to be immature. In conclusion, HSP70B as well ad DAZ gene seem to be involved causing spermatogenic failure. We suggest that HSP70B plays an important role in spermatogenesis and it is one of factors induced sperm maturation in human.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제23권12호
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• pp.1557-1565
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• 2010

Methyl paraben (MP), which is used as a preservative in pharmaceutical and cosmetic (shampoo) products, foods and beverages, enters into the aquatic environment and can pose a potential fish health hazard. In this experiment, effects of MP were evaluated in adult male common carp (Cyprinus carpio) by exposing them to fractions (1/$143^{rd}$ to 1/29th) of the $LC_{50}$ dose with every change of water for 28 days. Vitellogenin induction, metabolic enzymes, somatic indices and bioaccumulation were studied at weekly intervals. The $96^{th}$ h $LC_{50}$ of MP in fingerlings was 120 mg/L. Compared to the control, except for increases (p<0.01) in alkaline phosphatase (EC 3.1.3.1), alanine aminotransferase (EC 2.6.1.2) and liver size, there were decreases (p<0.01) in activity of acid phosphatase (EC 3.1.3.2), aspartate aminotransferase (EC 2.6.1.1), and testiculosomatic index following exposure to any dose of MP. Vitellogenin induction was significantly higher (p<0.01) in exposed than unexposed (control) fish. The bioaccumulation of MP in testis, liver, brain, gills and muscle tissues of fish increased significantly (p<0.01) with increase of dose from 0.84 ppm to 1.68 ppm. Dose and duration of exposure (p<0.01) indicated that an exposure period of 1 to 2 weeks was sufficient to cause changes in the quantifiable parameters studied. Fish exposed to 4.2 ppm MP became lethargic after the $26^{th}$ d. Histologically, degeneration, vacuolization and focal necrotic changes in liver and fibrosis-like changes in testicular tissue were noted.

• 한국수산과학회지
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• 제33권3호
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• pp.184-191
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• 2000

포항 형산강 하구에 서식하는 참재첩, Corbicula leana을 대상으로 생식세포 형성과정 및 생식주기를 조직학적으로 조사하였다. 참재첩은 자웅이체로서 난생이며, 생식소는 완숙하면 암컷은 흑갈색, 수컷은 유백색을 띤다. 생식소관은 내장낭의 간중장선 하방으로 부터 근충의 외벽근층내에 있는 섬유성 망상결체조직까지 분포되어 있다. 난소는 수지상으로 연결된 난소소관으로 구성되어 있고, 정소 역시 많은 소관상의 정소소관으로 구성되어 있는데 이들 소관의 내강상피가 생식상피 기능을 하고 있다. 성숙난모세포는 배포의 변화로 알 수 있으며, 그 크기는 $70{\~}80{mu}m$ 정도이다. 난소 및 정소의 초기 발달에는 간충조직과 색소과립세포들이 영양세포로 관여하고 있으며 난소와 정소가 발달하면서 점차적으로 사라진다. 생식소 발달은 수온과 밀접한 연관성이 있고, 비만도의 변화도 주기성이 일치하였다. 생식주기는 분열증식기, 성장기, 성숙기, 방출기, 퇴화기 그리고 회복기 둥의 연속적인 주기로 구분할 수가 있다. 산란기는 6월 하순부터 9월 중순까지이고, 산란성기는 7월과 8월이었으며 생물학적 최소형은 10.0 mm 이상으로 조사되었다.

• Anatomy and Cell Biology
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• 제56권4호
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• pp.508-517
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• 2023

In cancer patients, chemo/radio therapy may cause infertility by damaging the spermatogenesis affecting the self-renewal and differentiation of spermatogonial stem cells (SSCs). In vitro differentiation of stem cells especially mesenchymal stem cells (MSCs) into germ cells has recently been proposed as a new strategy for infertility treatment. The aim of this study was to evaluate the proliferation and differentiation of SSCs using their co-culture with Sertoli cells and conditioned medium (CM) from adipose tissue-derived MSCs (AD-MSCs). Testicular tissues were separated from 2-7 days old neonate Wistar Rats and after mechanical and enzymatic digestion, the SSCs and Sertoli cells were isolated and cultured in Dulbecco's modified eagle medium with 10% fetal bovine serum, 1X antibiotic, basic fibroblast growth factor, and glial cell line-derived neurotrophic factor. The cells were treated with the CM from AD-MSCs for 12 days and then the expression level of differentiation-related genes were measured. Also, the expression level of two major spermatogenic markers of DAZL and DDX4 was calculated. Scp3, Dazl, and Prm1 were significantly increased after treatment compared to the control group, whereas no significant difference was observed in Stra8 expression. The immunocytochemistry images showed that DAZL and DDX4 were positive in experimental group comparing with control. Also, western blotting revealed that both DAZL and DDX4 had higher expression in the treated group than the control group, however, no significant difference was observed. In this study, we concluded that the CM obtained from AD-MSCs can be considered as a suitable biological material to induce the differentiation in SSCs.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제14권4호
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• pp.281-286
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• 2010

최근 고장성(20%) 생리식염수를 흰쥐 정소에 직접 주사할 경우, 혈중 테스토스테론 수준이 최저 수준에 도달하는 화학적 거세 상태에 들어감이 보고되었다. 본 연구는 이러한 간단한 생리 식염수 주사 모델의 효용성을 더 검증하기 위해 정소의 미세 해부 구조상의 변화를 조사하였다. 실험군으로는 무처리군(intact, control), 정소제거군(orchidectomy), 그리고 식염수 주사군(saline-injection)으로 하였으며, 식염수 주사군에는 정소당 $750{\mu}{\ell}$의 멸균한 20% 식염수를 직접 주사하였다. 정소 제거 수술은 식염수 주사가 행해진 날에 시행하였다. 주사후 30일 경과 후에 동물을 희생하여 생식조직들을 채취하고 무게를 측정한 후 조직학적 조사를 위해 고정시켰다. 체중의 경우 무처리 대조군과 비교하여 정소절제군과 식염수 주사군 모두에서 유의한 변화는 없었다. 식염수 주사군의 정소 무게는 무처리 대조군에 비해 유의하게 감소하였다. 부정소와 저정낭의 무게의 경우 무처리 대조군에 비해 정소절제군과 식염수 주사군 모두에서 유의하게 감소하였으며, 전립선의 경우 무처리 대조군에 비해 정소절제군에서는 유의하게 감소하였으며, 식염수 주사군에서는 감소하는 경향은 있었지만 유의성은 없었다. 외양상으로 식염수 주사군의 정소에는 약간의 위축이 나타났으며, 백막이 정상적으로 보였다. 그러나 조직학적으로 정소 대부분에서 괴사가 발견되었으며, 헤마톡실린-에오신으로 거의 염색되지 않았다. 동일한 절편에서, 주사 부위의 정반대 부분은 비정상적인 세포층들이 염색되었다. 대부분의 세정관에서 미성숙한 생식세포들이 기질 막에서 분리되고, 내강 쪽으로 세포들이 떨어져 나간 것이 확인되었다. 본 연구는 정소내 고장성 식염수 직접 주사가 부속 생식기관에 정소절제와 유사한 테스토스테론 제거 효과를 유발할 수 있음을 확인하였다. 비록 심층적인 연구들이 더 요구되지만, 본 연구는 정소 내 고장성 식염수 직접 주사법이 비용이 덜 들고 덜 침습적이면서 정소절제술이나 화학적 거세와 거의 동일한 효용성을 가졌음을 시사한다.

• 한국수산과학회지
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• 제19권6호
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• pp.563-574
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• 1986

한국산 맛조개류 중 가장 다산되며, 식용되고 있는 맛조개와 붉은맛을 대상으로 생식세포형성과정, 난경조성변화, 생식년주기, 군성숙도등을 조사하였다. 1. 맛조개와 붉은맛은 자웅이체로서 난생이다. 생식소는 내장낭에서부터 족부의 근육결체섬유층 사이에 수지상 소낭 및 소엽으로 구성 분포하고 있다. 2. 분열증식중인 난원세포는 $10{mu}m$내외의 크기로 핵과 단일인이 뚜렷하고, 초기의 난모세포는 난병을 형성하여 생식상피위에 부착한 채 직접 영양을 흡수하는 한편 부분화간충직과 호산성과립세포들이 성장에 관여하고 있다. 성숙난모세포는 내강내에 유리되며 나오며 완숙난의 크기는 맛조개는 $80{\sim}85{\mu}m$정도이고 붉은맛은 $80{\sim}90{\mu}m$이다. 3. 정소소엽 상피위에는 정원세포, 정모세포, 정세포 및 변태한 정자 순으로 내강을 향하여 층상배열을 하며 성숙발달해 간다. 4. 방난, 방정을 마친 생식소는 퇴화되면서 조직이 완전 해체되어 휴지기상태를 거치고 이듬해 새로 분화된 조직이 재배치 되면서 새로운 성장을 하게된다. 5. 생식소의 발달단계는 분열증식기, 성장기, 성숙기, 방출기, 퇴화 및 휴지기등의 연속적인 연주기로 구분할 수 있었다. 6. 맛조개의 산란기는 다대포산이나 군산산 공히 환경수온이 $20^{\circ}C$ 이상으로 상승하는 6월부터 시작하여 $25^{\circ}C$ 이하인 7월까지 산란이 지속되는데 이들의 주산란기는 다대포산은 6월이고, 군산산은 7월이다. 그리고 붉은맛의 산란기는 $5{\sim}6$월이며 주산란기는 6월이다. 7. 맛조개의 경우, 다대포산이나 군산산맛조개의 군성숙도가 $50\%$를 넘는 개체는 암수 공히 각장이 $5.1{\sim}6.0cm$인 개체들이었으며, 암수 전개체가 방난, 방정하여 재생산에 $100\%$ 참여하는 개체의 크기는 각장이 $7.1{\sim}8.0cm$이상인 개체들이었다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제31권6호
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• pp.835-841
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• 2018

Objective: The aim of this study was to investigate the reversibility and safety of KISS1 metastasis suppressor (KISS1) gene vaccine in immunocastration. Methods: Six eight-week old ram lambs were randomly divided into vaccinated and control groups. The vaccine (1 mg/ram lamb) was injected at weeks 0, 3, and 6 of the study. Blood samples were collected from the jugular vein before primary immunization and at weeks 2, 4, 6, 10, 14, 22, and 30 after primary immunization. All ram lambs were slaughtered at 38 weeks of age, and samples were collected. Results: The specific anti-KISS1 antibody titers in vaccinated animals were significantly higher and the serum testosterone level was significantly lower than those in the control groups from week 4 to 14 after primary immunization (p<0.05). No significant difference was observed at weeks 22 and 30 after the primary immunization. Similar results were also found for scrotal circumference, testicular weight, length, breadth, and spermatogenesis in seminiferous tubules in week 30 after primary immunization. KS (KISS1-hepatitis B surface antigen S) fusion fragment of KISS1 gene vaccine was not detected in host cell genomic DNA of 9 tissues of the vaccinated ram lambs by polymerase chain reaction. Conclusion: The effects of KISS1 gene vaccine in immunocastration were reversible and no integration events were recorded.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제12권3호
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• pp.215-220
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• 2008

눈동자개, Pseudobagrus koreanus의 성분화 과정을 밝히기 위해 부화 직후부터 250일령까지 생식소의 분화 및 발달을 조사하였다. 원시생식세포는 부화 후 1일(전장: $6.63{\sim}6.95\;mm$)에 나타났으며, 부화 후 5일($7.50{\sim}9.36\;mm$)에 생식융기를 형성하는 원시생식소 구조를 나타내었다. 부화 후 25일($11.58{\sim}13.21\;mm$)에서는 생식소 후단부 한쪽 끝에서 신장된 체세포 돌기가 생식소와 융합되어 작은 난소강이 형성되었다. 부화 후 30일($12.19{\sim}13.72\;mm$)에는 생식소 하단부에 정소관 원기가 출현하여 정소의 분화가 시작되었다. 부화 후 50일째 자어($16.28{\sim}17.06\;mm$)의 난소내에서는 주변인기 난모세포로 채워지기 시작하였으며, 정소내에서는 정원세포(spermatogonia, SG)의 활발한 증식을 관찰할 수 있었다. 부화 후 250일째 자어($35.49{\sim}51.12\;mm$)에서는 난소의 크기가 더욱 커지고 난모세포들로 가득 채워져 있었고, 정원세포의 수가 증가하기 시작하였다. 이상의 결과 눈동자개의 성분화 양상은 자웅이체형 중 분화형이었다.

• 환경생물
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• 제20권3호
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• pp.224-231
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• 2002

광주기(하루 중 빛의 길이)는 골든 햄스터의 생식을 조절하는 주된 요인이다. 광주기 정보는 멜라토닌을 통하여 생식 내분비계로 전달된다. 따라서 멜라토닌이 생식에 미치는 효과를 여러 광주기에 노출시킨 햄스터에서 조사하였다. 단주기(하루 중 12시간 이하의 조명)에 노출시킨 동물들과 저녁에 멜라토닌을 주사한 동물들의 정소 무게는 현저하게 줄어들었으나, 장주기 (하루 중 12.5시간 이상의 조명)에 유지된 동물과 오전에 멜라토닌을 투여한 동물들의 정소 무게는 줄어들지 않았다. 퇴화된 정소를 조직학적으로 조사한 결과, 세정관 직경이 감소되었고, 세정관내 세포수가 두드러지게 줄어들었다. 또한 생식 능력이 퇴화된 동물의 혈중 여포자극호르몬과 황체호르몬의 수준도 생식 능력을 보유하고 있는 동물에 비해 뚜렷하게 감소하였다. 멜라토닌 수용체가 역전사 polymerase chain reaction으로 동정되었고 조직특이성 또한 조사하였다. 동정된 멜라토닌 수용체는 309염기였으며, 시상하부와 뇌하수체를 포함하는 다양한 장기에서 발현되었다. 생식을 조절하는 핵심 물질인 gonadotropin releasing hormone (GnRH) 유전자의 발현 또한 동정되었다. 그러나 멜라토닌 처리와 광주기 처리는 GnRH유전자 발현에 영향을 미치지 않았다. 종합하면, 광주기의 효과는 멜리토닌을 경유하여 발휘되며, 멜라토닌은 GnRH유전자의 발현보다는, 생성된 GnRH의 분비에 영향을 미쳐 생식내분비계에 간접적으로 작용함을 알 수 있었다.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제4권2호
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• pp.195-201
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• 2000

점농어, Lateolabrax maculatus의 성분화 과정을 밝히기 위해 부화 직후부터 365일령까지 생식소의 분화 및 발달을 조사하였다. 원시생식세포와 생식융기는 부화 후 30일령(전장: 11.7~13.2 mm)에 나타났으며,40일령 자어(12.5~14.0 mm)에서 서로 융합되어 미분화 생식소를 형성하였다. 60일령 치어(23.6~27.0 mm)에서는 생식소 양쪽 끝의 체세포조직이 분열ㆍ신장되어 난소의 분화가 개시되었고, 80일령 치어(33.1~42.5 mm)에서는 완전한 난소강이 나타났다. 70일령 치어(24.8~31.6 mm)에서는 생식소 중앙에 정소관 원기가 출현하여 정소의 분화가 시작되었다. 168일령 치어(88.0~l15.4 mm)의 난소내 생식세포는 감수분열을 시작하였으며, 287일령 치어(175.1 ~233.6 mm)에서는 염색 인기와 주변인기 의 난모세포가 출현하였다. 245일령 치어(124.4~168.3 mm)에서는 정소내 생식세포의 감수분열이 시작되었고, 365일령 치어(162.5~253.8 mm)의 세정관은 정자로 충만되었다 암ㆍ수 성비는 1:1.38이었으며 성분화 양상은 자웅이체형 중 분화형이었다.