The effects of four tanshinones isolated from Tanshen (the root of Salvia miltiorrhiza Bunge, Labiatae) were tested for their inhibition of nitric oxide production in macrophage cells, and the underlying molecular mechanisms studied. Of the four tanshinones used, 15, 16-dihydrotanshinone- I, tanshinone-IIA and cryptotanshinone, but not tanshinone I, demonstrated significant inhibition of the LPS-induced nitric oxide production in RAW 264.7 cells, with calculated $IC_{50}$ values of 5, 8, and 1.5 ${\mu}M$ , respectively. Tanshinones exerted inhibitory activities on the LPS-induced nitric oxide production only when applied concurrently with LPS, and tanshinone- IIA and cryptotanshinone were found to inhibit LPS-induced NF-$_KB$ mobilization and extracellular- regulated kinase (ERK) activation, respectively. These results suggest that tanshinones inhibit LPS-induced nitric oxide generation by interfering with the initial stage of LPS-induced expression of certain genes. NF-$_KB$ and ERK could be the molecular targets for tanshinones for the inhibition of LPS-induced nitric oxide production in macrophage cells.
We screened natural products to find compounds with anti-osteoporotic potential using a coculture-based system by which osteoclast differentiation is effectively achieved. We found that methylene chloride soluble fraction of the root of Salvia miltiorrhiza Bunge (Labiatae) suppressed osteoclast differentiation. Five tanshinones, tanshinone IIA (1), tanshinone I (2), cryptotanshinone (3), 15,16-dihydrotanshinone I (4), and ferruginol (5) were subsequently isolated from fraction. Among the five compounds, compounds 1-4 reduced the formation of TRAPpositive multinuclear osteoclasts. These results suggest that the identified tanshinones may be useful candidates for development of therapeutic agents to treat osteoporosis and other bone-resorptive diseases.
The inhibitory activity of tanshinones from Salvia miltiorrhiza was tested on rat liver diacylglycerol acyltransferase (DGAT). Cryptotanshinone (1) and 15,16-dihydrotanshinone I (3) exhibited potent DGAT inhibitory activities dose-dependently with $IC_{50}$ values of $10.5 {\;}{\mu\textrm{g}}/ml{\;}and{\;}11.1{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$. However, tanshinone IIA (2) and tanshinone I (4) showed very weak inhibition ($IC_{50}{\;}value:{\;}>{\;}250{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$). A dihydrofuran moiety was seemed to be responsible for the stronger inhibitory activity
The kinetics of Ti-transformed Salvia miltiorrhiza cell cultures was studied in 250-$m\ell$ shake flasks by using B5 medium with addition of 30 gfL of sucrose. In the cell cultures, the maximum cell mass obtained was 11.5 g DW/L on day 15. The highest amount of phenolic compounds - rosmarinic acid (RA) and lithospermic acid B (LAB) reached 871.3 mg/L (day 15) and 121.3 mg/L (day 13), respectively. The total tanshinone production, i.e., intracellular plus extracellular cryptotanshinone, tanshinone 1, and tanshinone IIA, was 5.3 mg/L on day 13. For the cultivations in 2.4-L stirred bioreactors, the residual sugar level and medium conductivity were a little higher in a small turbine impeller reactor ($T_s$) than those in a large turbine impeller reactor ($T_L$), while a higher cell density was obtained in the $T_L$. For the production of tanshinones and phenolics, better results were obtained in the $T_L$ than in the $T_s$. In the $T_L$, similar or even a little higher production titers of tanshinones and phenolic compounds were achieved compared to those in the flasks. The results suggest that the shake flask results could be successfully scaled up to the $T_L$ reactor. Such a large impeller reactor like $T_L$ may be better than a small impeller one for the large-scale production of the valuable metabolites by the suspension cultures of Ti transformed S.miltiorrhiza cells. This is considered due to the beneficial culture environment in the $T_L$, such as low shear rates as estimated theoretically.
The aim of this present study was to investigate the antifungal effect of tanshinones isolated from Salvia miltiorrhiza against Candida ablicans, a polymorphic fungus. For the work, tanshinone IIA (TSN), cryptotanshinone (CTS), and dihydrotanshinone I (DTS) were chosen. Initially, their antifungal effect was analyzed by in-vitro susceptibility test. Data from the susceptibility test showed that while all of these three compounds had antifungal activity, DTS was the most potent. At $100{\mu}g$ DTS/ml, there was about 80% CFU (colony forming unit) reduction as compared to DTS-untreated C. albicans yeast cells (P<0.05). Thus, DTS was selected to determine its antifungal activity in a murine model of disseminated candidiasis due to C. albicans. Results showed that DTS enhanced resistance of mice against disseminated candidiasis. During the entire period of 30-day observation, 60% of DTS-given mice groups survived whereas control animals all died within 14 days (P<0.05). Moreover, DTS inhibited the hyphal production, one of the virulence factors of this fungus, from the blastoconidial form of the fungus. Therefore, the tanshinone appears to have antifungal activity specific for C. albicans infection, which could possibly be mediated by the blockage of hyphal production.
단삼(丹蔘)을 bioassay-directed fractionation에 의한 에탄올 추출물의 클로로포롬 분획물을 silica gel column chromatography, recycling preparative-HPLC 등을 실시하여 항균활성을 나타내는 2개의 화합물을 분리하여 이화학적 성상 및 spectra data (IR,$^1H-NMR,\;^{13}C-NMR$ 및 Mass)에 의해 각각 Cryptotanshinone과 dihydrotanshinone I으로 동정하였으며, 이들 화합물의 항균성 (MIC)은 각각 S. epidermidis에 대하며 $6.3,\;3.1\;{\mu}g/ml$와 S. pyogenes에 대해 $6.3\;{\mu}g/ml$로 비교적 높은 활성을 나타내어 항생제로서 개발 가능성을 보여주었다.
Objectives; Bioassay-directed fractionation of the dried roots of Salvia miltiorrhiza led to the isolation of abietane tanshinones, crptotanshinone and dihydrotanshinone. Methods: Their structures were elucidated using 1H-and 13C-NMR, UV, IR and mass spectral analysis. Result and Conclusions : These compounds exhibited a moderate antimicrobial activities against Staphylococcus epidemidis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus pyogene. Actinobacillus actinomycetemcomitans, Escherichia coil, Enterbacter cloacae, Pseudomonas aeruginosa, Citrobacter freundii, and Samonella typhimurium.
Objectives : Gram-positive bacteria have became increasing resistant to antibacterial agents, and hence multi-drug-resistant bacterial pathogens are now a major problem in clinical medicine. There is, therefore, a need for new antibacterial agents. In the course of our screening program for potent antibacterial agent from medicinal plants, the extract of Salvia miltiorrhiza (S. miltiorrhiza) showed antibacterial activity against methcillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and antibiotic-resistant S. aureus. Methods : S. miltiorrhiza was extracted with 80$\%$ EtOH. The extract was suspended in H2O and fractionated successively with hexane chloroform, ethyl acetate, and n-buthanol. The chloroform fraction, which showed the highest antibacterial activity(MICs, 78㎍/ml) against MRSA, was chromatographed on a silica gel column and recycling prep-LC to give the pure antibacterial component. Results and Conclusions : The second fraction among the chloroform soluble portion of an aqueous EtOH extract of S. miltiorrhiza root showed outstanding antibacterial activity against MRSA and antibiotic-resistant S. aureus compared to the other fraction. An active compound was isolated from the second fraction using silica gel column chromatoraphy and recycling prep-LC. Based on these data together with the IH-, 13C-NMR, mass and mp, the active compounds were identified tanshinone Ⅰ, dehydrotanshinone Ⅰ and cryptotanshinone. Among tanshinones, cryptotanshinone and dihydrotanshinone Ⅰ MICs against MRSA and antibiotics-resistant S. aureus were 12.5, 12.5 and 6.3㎍/ml, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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