• 제목/요약/키워드: TLC analysis

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화분의 추출성분 (Extractives from Pollen)

  • 이상극;김진규;함연호;박재군;배영수
    • 임산에너지
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    • 제22권1호
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    • pp.30-36
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    • 2003
  • 화분을 98%의 EtOH로 추출하고 hexane, CH₂Cl₂, EtOAc, 그리고 H₂O용성으로 분획하여 동결건조 시켰다. 그 중에서 EtOAc 분획을 Sephadex LH-20으로 충진한 칼럼에서 MeOH와 EtOH-hexane혼합액을 용리용매로 사용하여 칼럼크로마토그래피를 실시하였다. 단리된 화합물들은 TLC로 확인한 후 NMR스펙트럼을 사용하여 정확한 구조규명을 하였고 FAB-MS로써 분자량을 측정하였다. 주로 quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside와 kaempferol-3-O-β-D-rutinoside같은 flavonol 유도체들과 flavanonol계 화합물인 aromadendrin-5-methyl ether, 그리고 acid 화합물인 p-methoxybenzoic acid가 적은 양으로 단리 되었다.

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감귤의 Bioflavonoids 분리, 정제 및 혈압강하효과 (Isolation, Purification and Hypotensive Effect of Bioflavonoids in Citrus sinensis)

  • 손흥수;김현숙;권태봉;주진순
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제21권2호
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    • pp.136-142
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    • 1992
  • 냉동 건조한 귤(Citrus sinensis)의 껍질로 부터 methanol과 butanol추출물인 crude bioflavonoids를 건조중량으로 최초 시료대비 약 0.26%의 수율을 얻을수 있었다. 이 crude bioflavonoids를 gel filtration, HPLC를 이용하여 분리, 정제하였고 TLC, HPLC, UV spectrum, NMR spectral analysis를 통해 narirutin과 hesperidin으로 동정할 수 있었다. 또한 HPLC 정량분석 결과, narirutin과 hesperidin은 crude bioflavonoids의 g당 42mg과 530mg을 얻을 수 있었으며 귤 껍질의 주요 bioflavonoid는 hesperidin으로 판명되었다. 한편 실험 동물인 Sprague-Dawley종의 흰쥐를 대상으로 혈압 변화를 측정한 결과 귤 껍질의 주요 bioflavonoid성분인 hesperidin은 약물 투여 후 유의성있게 (p< 0.001) 혈압 저하효과가 있음을 관찰 할 수 있었다.

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진생베리 아미노산 복합체로부터 분리한 펩타이드의 항염, 주름개선 효과 (Anti-inflammatory and Wrinkle Improvement Effects of Peptides from Ginseng Berry Amino Acidic Complex)

  • 강상문;박청
    • 대한화장품학회지
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    • 제45권3호
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    • pp.299-306
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    • 2019
  • Ginseng berry(GB)는 진세노사이드Re를 함유하고 있으며, 항염, 피부 주름 완화의 기능을 가지고 있다. 본 연구에서는 Ginseng berry 아미노산 복합체의 TLC 분획 fraction 1, 2, 4를 확인하고 HPLC로 분석하였으며, fraction 1의 LC/MASS 분석을 통해 peptide (AP-1)를 동정하였다. AP-1에 의한 NO 생성 억제 효과를 조사하여 항염증 활성을 확인하였다. 또한 procollagen type I C-peptide (PIP) ELISA kit를 이용한 collagen 합성은 대조군 대비 50% 이상의 효과를 보였다. 이상의 결과로부터 진생베리 아미노산 복합체로부터 분리한 펩타이드는 항염과 주름개선 효능을 가진다고 사료되며, 향후 항염 및 항노화 화장품 원료로서의 이용 가능성을 보였다.

나문재 추출물의 성분 분석 (Component Analysis of Suaeda asparagoides Extracts)

  • 양희정;박수남
    • 대한화장품학회지
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    • 제34권3호
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    • pp.157-165
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    • 2008
  • 이전 연구에서 저자들은 나문재 추출물의 항산화 작용과 추출물 함유 크림의 유화 안정성에 대한 결과를 보고한 바 있다[1,2]. 본 연구에서는 thin layer chromatography(TLC), high performance liquid chromatography (HPLC)와 liquid chromatography/Electrospray Tandem mass spectrometry (LC/ESI/MS/MS), $^1H$-NMR을 이용하여 나문재 추출물에 대한 성분 분석을 수행하였다. 나문재 추출물 중 ethyl acetate분획의 TLC는 5개의 띠($SA1{\sim}SA5$)로 분리되었다. Ethyl acetate 분획의 당 제거반응 후 얻어진 aglycone 분획에 대한 HPLC 크로마토그램은 2개의 피이크(SAA 2 및 SAA 1)를 나타냈고, 각각 그 용리 순서는 quercetin, kaempferol이었으며 조성비는 quercetin 16.88%, kaempferol 83.12%로 kaempferol의 함량이 큰 것으로 나타났다. 또한 LC/ESI-MS/MS를 통해서 SA 2는 kaempferol-3-O-gluco-side로 SA 3는 quercetin-e-O-glucoside, SA 4는 kaempferol-3-O-rutinoside, SA 5는 quercetin-3-O-rutinoside로 확인되었다. LC/ESI-MS/MS의 스펙트럼에서 SAA 1은 탈양성자화된 aglycone 분획에 상용하는 분자이온 $[M-H]^$-(m/z285) 피이크를 나타냈으며, $^1$v 분석을 실시한 결과 [${\delta}$ 6.19 (1H, d, J=1.8Hz, H-6), ${\delta}$ 6.44 (1H, d, J=1.8Hz, H-8), ${\delta}$ 6.92 (2H, d, J=9.0Hz, H-3',5'), ${\delta}$ 8.04 (2H, d, J=9.0Hz, H-2',6')]에서 피이크들이 나타났다. 따라서 SAA 1은 kaempferol임이 확인되었다. SAA 2는 aglycone 분획에 상응하는 분자이온 $[M-H]^-$ (m/z 301)을 생성하였고, $^1H$-NMR 스펙트럼은 [${\delta}$ 6.20 (1H, d, J=2.0Hz, H-6), ${\delta}$ 6.42 (1H, d, J=2.0Hz, H-8), ${\delta}$ 6.90 (1H, d, J=8.6Hz, H-5'), ${\delta}$ 7.55 (1H, dd, J=8.6, 2.2Hz, H-6'), ${\delta}$ 7.69 (1H, d, J=2.2Hz, H-2')]에서 피이크들을 나타냈고, 따라서 SAA 2는 quercetin으로 확인되었다. 결론적으로, 이미 보고된 나문재 추출물의 항산화 작용 그리고 안정성 실험과 더불어 나문재 추출물의 성분분석은 새로운 기능성 화장품원료로서 응용이 가능함을 시사한다.

Acinetobacter sp. B-W의 온도 의존적 2,3-dihydroxybenzoic acid 생산 (Temperature dependent 2,3-dihydroxybenzoic acid production in Acinetobacter sp. B-W)

  • 김경자;이재훈;양용준
    • 미생물학회지
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    • 제51권3호
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    • pp.249-255
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    • 2015
  • 철 스트레스($2{\mu}M$ 이하 농도) 하에서 시데로포어를 생산하는 균주를 토양에서 분리하여 16S rDNA 염기 서열 분석과 생화학적, 생리학적 분석 및 전자 현미경 관찰 등으로 동정한 결과, Acinetobacter sp.로 밝혀졌다. 시데로포어의 카테콜 특성은 Arnow법으로 조사되었다. 철을 제한한 배지에서 균주를 배양한 결과, $36^{\circ}C$에서도 잘 자랐지만 시데로포어 생산은 $28^{\circ}C$에서 높았다. $36^{\circ}C$에서는 시데로포어 생산이 강하게 억제되었다. $10{\mu}M\;FeCl_3$를 첨가한 배지에서는 시데로포어 생산이 완전히 억제되었다. 균주 상등액을 부탄올 추출 후, Sephadex LH-20 컬럼 크로마토그래피와 HPLC를 이용하여 시데로포어를 분리, 정제하였다. 분리, 정제된 시데로포어의 구조는 HPLC, TLC와 IR 분석 결과로부터 2,3-dihydroxybenzoic acid로 확인되었다.

조각자(皂角刺)에서 PC-3 생장 억제 성분 정제 (Purification of Anti PC-3 Prostate Cancer Agents from Gleditsiae Spina)

  • 임세현;이병호;김영균;조수인;김용성;임지연
    • 대한한방내과학회지
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    • 제33권2호
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    • pp.197-208
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    • 2012
  • Objectives : Gleditsiae Spina has the effects of expelling toxins, draining pus, invigorating blood and resolving abscesses. Some clinicians apply the herb for patients suffering from cancer. However, its anti-cancer activities are not well understood. In the present study, anti-tumor agents from Gleditsiae Spina were purified. Methods : The viability of the PC-3 cell line was determined using MTT assay, and the induction of apoptosis by Gleditsiae Spina extract in PC-3 cells was measured by Annexin-V/propidium iodide double staining assay detected by flow cytometry. TLC and HPLC analysis were used to separate and identify the anti-cancer agents. Results : Treatment of the extract resulted in significant decreased cell viability of PC-3 cells in a dose- and time-dependent manner. Dose-dependent apoptotic cell death was also measured by flow cytometry analysis. The anti-cancer agents were successfully separated and identified by using TLC and HPLC analysis and the most potential agent among them was separated from EtOAC fraction. Conclusions : These results might be applied in developing new drugs from natural resources like Korean traditional medicine, and also support the clinical usefulness of herbal medicine.

국내산 컴프리의 형태학적 특성 및 Pyrrolizidine Alkaloids 분석 (Studies of Morphological Properties and Pyrrolizidine Alkaloids Analysis of Comfrey Cultivating in Korea)

  • 김희연;홍진환;김동술;한상배;이은주;강길진;육창수;박종희;배기환
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제32권6호
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    • pp.790-794
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    • 2003
  • 본 연구에서는 국내에서 재배되고 있는 컴프리의 형태학적 특성 및 pyrrolizidine alkaloids을 분석하기 위해서 수행되었다. 국내에서 채취한 12개 지역의 컴프리를 대상으로 형태학적 인 연구를 실시한 결과 모두 한 종류의 Symphytum officinale임을 확인할 수 있었다. 또한 이들 시료를 hot methanol과 ultra-sonification으로 추출하여 pyrrolizidine alka loids 함유 여부를 확인하기 위하여 TLC 시험을 실시한 결과, 12개 시료의 컴프리는 o-chloranil과 Ehrlich's reagent의 발색시약이 pyrrolizidine alkaloids와 반응하여 특이적인 purple spot을 나타내었다. 그러나 치커리, 호박잎 및 깻잎을 사용하여 동일한 시험을 실시한 결과 purple spot이 관찰되지 않음을 알 수 있었다. HPLC 패턴을 분석 결과, 12개 시료의 컴프리는 retention time 30 부근에 특이적인 peak를 나타내었으나, 치커리, 호박잎 및 깻잎은 peak를나타내지 않았다. 따라서 국내 재배중인 컴프리 12종은 형태학적 특성 및 pyrrolizidine alkaloids로 조사한 결과, S. officinale 종임을 확인할 수 있었다.

진피류(陳皮類) 한약재의 Hesperidin과 정유성분 비교 (Analysis of the Content of Hesperidin and Essential Oils from the Peels of Various Citrus Species)

  • 함인혜;정의동;이경진;이제현;부영민;김호철;최호영
    • 대한본초학회지
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    • 제23권4호
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    • pp.159-170
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    • 2008
  • Objectives: This study was carried out to evaluate the quality of the peels of various Citrus species. Method: The contents of hesperidin from fruit peels used as Citri Pericarpium such as C. natsudaidai, C. grandis, C. unshiu, and C. sunki, were analyzed by HP-TLC, HPLC, and essential oils of those were analyzed by GC/MS. Results: HPLC analysis showed that the hesperidin from the peel of C. unshiu and C. reticulata was satisfied the standard of Korean Pharmacopoeia. The essential oil was analyzed by GC/MS. As a result, limonene, furfural, 5-methyl-2-furfural, linalool oxide(cis), linalool oxide(trans), terpinen-4-ol, $(-)-{\alpha}$-terpineol, germacrene D, 4-methyl-2,6-di-tert-butylphenol was detected in all 4 kinds of Citrus species. Conclusions: As a result of chemotaxonomical similarity analysis with essential oils, the peels of C. natsudaidai and C. grandis are closely related, while C. unshiu is distantly related to the others.

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시판 쪽 분말염료의 색소 함량에 따른 면직물의 색상 및 항균성 비교연구 (Analysis of the Pigment Contents of Commercial Indigo Powders and Their Effect on the Color and the Antimicrobial Function of Dyed Cotton Fabrics)

  • 오지은;안춘순
    • 한국의류학회지
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    • 제37권1호
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    • pp.17-26
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    • 2013
  • Market available fermented indigo powders of Indian origin (FI1, FI2), Chinese origin (FC1, FC2), and raw indigo powders of Indian origin (R1, R2) were examined using TLC and HPLC analyses to investigate their pigment contents. TLC analysis gave $R_f$ values of 0.81 and 0.72 for blue and red pigments, respectively. All the powder products and the synthetic and natural indigo standards eluted at 6.9 min and 8.3 min in the HPLC chromatograms, and the peaks showed the ${\lambda}_{max}$ at 610nm and 542nm, representing indigotin and indirubin, respectively. The pigment content calculated based on the area of indigotin and indirubin peaks in the HPLC chromatograms showed that the indigotin content was higher in FC1 and FC2, while FI1 and FI2 had a higher indirubin content. The relative percentage of indirubin was the highest in R2, but the HPLC peak intensity was quite low. Despite the higher indigotin content in FC1 and FC2, cotton dyed with FI1 and FI2 (versus cotton dyed with FC1 and FC2) showed a higher blue (B) hue, the highest K/S values, and the highest antimicrobial effect.

Kinetics of Malonyl-CoA Synthetase from Rhizobium trifolii and Evidences for Malonyl-AMP Formation as a Reaction Intermediate

  • Kang, Sang-Won;Hong, Sung-Yu;Ryoo, Hyung-Don;Rhyu, Gyung-Ihm;Kim Yu-Sam
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제15권5호
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    • pp.394-399
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    • 1994
  • The catalytic mechanism of malonyl-CoA synthetase from Rhizobium trifolii was investigated by the steady state kinetics and intermediate identification. Initial velocity studies and the product inhibition studies with AMP and PPi strongly suggested ordered Bi Uni Uni Bi Ping-Pong Ter Ter system as the most probable steady state kinetic mechanism of malonyl-CoA synthetase. Michaelis constants were $0.17{\pm}0.04 {\mu}M,\;0.24{\pm}0.18 {\mu}M\;and\;0.045{\pm}0.26 {\mu}$M for ATP, malonate and CoA, respectively. The TLC analysis of the $^{32}P-labelled$ products in reaction mixture containing $[{\gamma}-^{32}P]$ ATP in the absence of CoA showed that PPi was produced after the sequential addition of ATP and malonate. Formation of malonyl-AMP, suggested as an intermediate in the kinetically deduced mechanism, was confirmed by the analysis of $^{31}P-NMR$ spectra of AMP product isolated from the $^{18}O$ transfer experiment using $[^{18}O]$malonate. Two resonances were observed, corresponding to AMP labelled with zero and one atom of $^{18}O$, indicating that one atom of $^{18}O$ transferred from $[^{18}O]$malonate to AMP through the formation of malonyl-AMP. Formation of malonyl-AMP was also confirmed through the TLC analysis of reaction mixture containing $[{\alpha}-^{32}P]$ATP. These results strongly support the ordered Bi Uni Uni Bi Ping-Pong Ter Ter mechanism deduced from the initial velocity and product inhibition studies.