• 한국식품조리과학회지
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• 제22권4호통권94호
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• pp.535-544
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• 2006

토마토 김치의 발효특성을 살펴보기 위하여 pH, 산도, 색도, Texture, 미생물수, 당도 및 염도 측정, Na와 K 함량을 측정하였고 DPPH free radical 소거 활성과 퐁 폴리페놀 함량을 조사하였으며 최종적으로 관능적 평가를 한 결과는 다음과 같았다. 1. 토마토김치(Tomato Kimchi, TK)의 pH는 제조 직후, 배추김치(Chinese Cabbage Kimchi, CK)보다 낮은 값을 보였으나 발효 48시간 후 CK의 PH가 급격히 낮아져 이후 거의 비슷한 값을 보였다. 2. TK의 산도는 초기값은 CK보다 높았으나 2일후에는 CK와 동일한 산도를 나타냈다. 3. TK의 명도(L값)는 발효 전 기간에 걸쳐 CK에 비해 낮았다. 적색도(a값)는 TK, CK모두 발효 4시간에 급격히 증가했으며 이후 거의 비슷한 값을 보였다. 황색도(b값)는 발효전반에 걸쳐 TK의 값이 CK보다 다소 낮게 나타났다. 4. TK의 경도(hardness)는 발효와 더불어 낮아졌으나 발효 전반에 걸쳐 CK보다 다소 높은 값을 보였다. 5. TK의 초기 총 균수는 2.7${\times}$10$^4$ cfu/ml으로 CK의 6.1${\times}$10$^4$ cfu/ml보다 적었다. 그러나 24시간에 각각3.1${\times}$10$^6$ cfu/ml, 3.5${\times}$10$^6$ cfu/ml로 거의 비슷해졌다가 발효 120시간까지 약간 높은 값을 보였다. TK의 젖산균수도 초기에는 CK보다 낮았으나 급격히 증가하여 발효 48시간 이후 CK의 3.3${\times}$10$^6$ cfr/ml보다 높은값 5.1${\times}$10$^6$ cfu/ml를 나타내 총 균수의 증가는 젖산균 수의 영향을 받는 것으로 나타났다. 6. 발효 초기의 TK의 당 농도($^{\circ}$Brix)는 7.4, CK는 7.3이었다. TK와 CK는 발효가 진행됨에 따라 당 농도가 감소했다. 발효 48시간에 TK는 6.4, CK는 6.6$^{\circ}$Brix로 발효 120까지 TK의 당 농도가 CK보다 낮은 값을 보였다. 7. TK와 CK의 발효 초기의 염도는 TK가 6.7, CK가 6.5% 였다. TK와 CK는 발효가 진행됨에 따라 염농도가 감소했다. 발효 48시간에 TK 5.1, CK 5.2%로 발효 120시간까지 TK가 CK보다 다소 낮은 값을 보였다. 8. TK와 CK의 Na와 K의 함량을 초기와 숙성적기인 48시간에 분석한 결과, TK와 CK의 Na 함량은 초기에 860.09 895.26 mg/100g이었고, 48시간에는 각각 867.57, 683.98 mg/100g이었다. K 함량은 초기에각각 352.26, 365.77 mg/100g이었고, 48시간에는 343.73, 345.51 mg/100g이었다. 9. TK와 CK의 Methanol 추출액을 대조군 1% BHT에 대해 DPPH free radical 소거 활성을 비교한 결과, TK와 CK의 초기 값은 큰 차이가 없었으나 발효가 진행됨에 따라 TK의 DPPH 활성이 약간 증가되며, 발효 120시간 후에는 초기 값보다 10% 증가한 값을 보였다. 10. 토마토의 총 페놀함량은 280 mg/100g으로 배추 60 mg/100g보다 거의 5배 높았다. 11. TK와 CK의 20$^{\circ}$C 에서 발효 2일후의 관능적 특성은신맛은 유의적인 차이를 보이지 않았다. 외관, 색상,향, 상큼한 맛, 견고성, 매운맛, 짠맛, 전반적인 기호도 면에서도 유의적인 차이를 보였으며 특히, 색상과 상큼한 맛, 매운 맛은 유의적인 차(p<0.01)를 보였으며 관능적 품질이 우수한 것으로 나타났다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제6권1호
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• pp.13-17
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• 1993

This study was conducted to determine the cost of production of semen and the rate of conception for artificial insemination in eight randomly selected districts of Bangladesh. A sample of 640 adopting farms were investigated. Results indicate that the cost of liquid semen per dose on full-cost and cash cast basis were Tk. 16.17 and Tk. 14.48, while the cost of locally produced exotic semen and imported semen were Tk. 31.25 and Tk. 110.00 respectively. The cost of liquid semen per insemination, per conception and per progeny on full-cost were Tk. 26.65, Tk. 50.64, and Tk. 56.27 respectively and on cash cost were Tk. 23.88, Tk. 45.37 and Tk. 50.41 respectively. The average cost of semen paid by the farmers was Tk. 14.00 and it was higher in urban areas than in rural areas. Out of the cost of A.I. centres, government had subsidized 92.16 percent and the rest 7.84 percent accrued as returns. About 40 percent of the produced semen was lost in the system which could not be used at all. The conception rate on first insemination was 53.6 percent. The rate increased to 73.2 percent upto the last insemination. The difference in conception rate between liquid semen (69.97%) and frozen semen (70.48%) was not statistically significant.

• 대한바이러스학회지
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• 제28권3호
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• pp.215-224
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• 1998

Cloning, sequencing and expressing in E. coli of the thymidine kinase (TK) gene of Herpes simplex virus type-1 (HSV-1) strain F was investigated. The TK gene, located in the BamHI 3.74 kb DNA fragment of the plasmid pHLA-12, was amplified by polymerase chain reaction (PCR). The 1,131 kb PCR product was cloned into the BamHI and EcoRI sites of pBacPAK9 plasmid and then named pBac-TK recombinant. The TK gene was subcloned into the BamHI and BglII sites of pQE-30, and named pQE-TK recombinant. The nucleotide sequence of the 1,131 kb TK gene was determined, and the GC content was 65.13%. There were deduced 367 amino acid residues with a total molecular weight of 43 kDa. The weight was confirmed by the protein produced by E. coli M15/pQE-TK on the SDS-PAGE and Western blot. The production of the TK protein in the IPTG induced cells was measured over 4 h. At the end of 1, 2 and 3 h the level increased by 146, 204 and 242%, respectively. The amount of the protein at the highest fraction purified with Ni-NTA resin chromatography was $0.68\;{\mu}g$ per ml. The soluble state TK protein was present in the cytoplasm. In these results the F strain was different in base sequence and amino acid sequence from that of the CL101 strain, which caused difference in their strains.

• Molecules and Cells
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• 제21권1호
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• pp.104-111
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• 2006

Gene therapy with nonviral vectors using the suicide gene/prodrug activating system of herpes simplex virus type-1 thymidine kinase (HSV1-TK)/ganciclovir (GCV) is inefficient in killing malignant tumor cells due to two major factors: (a) an unsatisfactory bystander effect; (b) short-lived expression of the protein. To study the capacity of the protein transduction domain (PTD) of HIV-1 TAT protein to enhance HSV1-TK/GCV cancer gene therapy, we constructed three fusion proteins TAT-TK, TK-TAT and TK. TAT-TK retained as much enzyme activity as TK, whereas that of TK-TAT was much lower. TAT-TK can enter HepG2 cells and much of it is translocated to the nucleus. The transduced HepG2 cells are killed by exogenously added GCV and have bystander effects on untransduced HepG2 cells. Most importantly, the introduced recombinant protein is stable and remains functional for several days at least, probably because nuclear localization protects it from the cytoplasmic degradation machinery and provides access to the nuclear transcription machinery. Our results indicate that TAT fusion proteins traffic intercellularly and have enhanced stability and prodrug cell killing activity. We conclude that TAT has potential for enhancing enzyme prodrug treatment of liver cancers.

• 한국환경성돌연변이발암원학회지
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• 제19권1호
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• pp.7-13
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• 1999

The mouse lymphoma thymidine kinase (tk+/-) gene assay (MOLY) using L5178Y tk+/- mouse lymphoma cell line is one of the mammalian forward mutation assays. It is well known that MOLY has many advantages and more sensitive than the other mammalian forward mutation assays such as x-linked hyposanthine phosphoribosyltransferase (hprt) gene assay. The target gene of MOLY is a heterozygous tk+/- gene located in 11 chromosome of L5178Y tk+/- cell, so it is able to detect the wide range of genetic changes like point mutation, deletion, rearrangement, and mitotic recombination within tk gene or deletion of entire chromosome 11. MOLY has relatively short expression time (2-3 days) compared to 1 week of hprt gene assay. MOLY can also induce relatively high mutant frequency so a large number of events can be recorded. The bimodal distribution of colony size which may indicate gene mutation and chromosome breakage potential of chemicals according to mutation scale such as large normal-growing mutants and small slow-growing mutants can be observed in this assay. The statistical analysis of data can be performed using the MUTANT program developed by York Electronic Research in association with Hazelton as recommended by the UKEMS (United Kingdom Environmental Mutagen Society) guidelines. This report reviewed MOLY using the microtiter cloning technique (microwell assay).

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제18권4호
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• pp.349-357
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• 2015

To reutilize fisheries waste, we isolated a bacterial strain from a coastal area located in Busan. It was identified as Bacillus licheniformis TK3-Y. Using plate assay and 500-mL flask experiments, we found that the isolate simultaneously possessed cellulolytic, proteolytic, and lipolytic activities with salt tolerance. 10% (v/v) inoculums, were used to examine the biodegradation characteristics of the TK3-Y strain on carboxymethylcellulose, skim milk, and olive oil media. The optimum conditions for pH, temperature, agitation speed, and NaCl concentration on each 1% substrate were 6, $50^{\circ}C$, 180 rpm, and 17.5%, respectively. Under optimal conditions, the TK3-Y strain showed 1.07 U/mL cellulolytic, 1,426 U/mL proteolytic, and 6.45 U/mL lipolytic activities. Each enzyme was stable within a range of 17.5-35% NaCl. Therefore, the salt tolerance ability of strain TK3-Y was superior to other related strains. In degradation of a mixed medium containing all three substrates, both the cellulolytic and proteolytic activities were somewhat lower than those on each single substrate, while the lipolytic activity was somewhat higher. From the above results, the TK3-Y strain appears to be a good candidate for use in the efficient treatment of fisheries waste in which components are not collected separately.

• Nuclear Medicine and Molecular Imaging
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• 제40권4호
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• pp.218-227
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• 2006

목적 : 헤르페스 심플렉스 1형 바이러스 티미딘 키나제(Herpes simplex virus type 1 thymidine kinase. HSV1-tk) 유전자는 보고 유전자로서 필요한 조건뿐만 아니라 별도의 치료 유전자를 따로 이입할 필요가 없다는 장점을 가지고 있어 유전자 영상과 치료에서 가장 널리 사용되는 유전자이다. 본 연구에서는 간암세포주에서 HSV1-tk 보고 유전자 발현을 비침습적 PET 영상으로 평가하는데 있어서 $9-(4-[^{18}F]Fluoro-3-hydroxymethylbutyl)$guanine ($[^{18}F]FHBG$)의 유용성을 평가하고자 하였다. 대상 및 방법 : $[^{18}F]FHBG$는 triester로부터 8단계를 거쳐 합성하였다. $[^{18}F]FHBG$는 전구체로 N2-monomethoxytrityl-9-[4-(tosyl)-3-monomethoxytritylmethylbutyl]guanine를 사용하고 kyptofix [2.2.2.]를 이용한 친핵성 반응으로 $120^{\circ}C$에서 20분 동안 반응한 후에 1 N HCl로 보호기를 제거함으로써 합성하였다. HSV1-tk 보고 유전자가 이입되어 있는 세포주인 MCA-tk와 이입되지 않은 MCA 세포주를 이용하여 in vitro 상에서의 $[^{18}F]FHBG$의 섭취 및 방출 실험을 실시하였으며 섭취량과 발현량의 상관성 평가를 위해 세포수 백분율에 따른 섭취실험을 실시하였다. In vivo 상에서의 평가를 위하여 피하 종양 형성 동물모델을 이용하여 microPET생체영상을 획득하였다. 결과: 합성된 $[^{18}F]FHBG$를 역상 HPLC를 사용하여, 머무름 시간 16-18분에서 분리하였다. 반감기를 고려한 방사화학적 수율은 20-25%, 방사화학적 순도는 95% 이상이었으며 비방사능은 55.0 $GBq/{\mu}\;mol$ 이상이었다. HSV1-tk 유전자가 이입된 MCA-tk 세포에서는 특이적인 $[^{18}F]FHBG$의 집적이 발생하였으며 대조군인 MCA에서는 거의 집적이 이루어지지 않았다. 또한, 방출 실험에서 방출 후 1시간 경과까지 86% 이상의 $[^{18}F]FHBG$가 세포내에 잔류하였다. MCA-tk 세포주의 비율이 증가함에 따라 $[^{18}F]FHBG$의 섭취량도 직선적 상관관계($R^2=0.995$)에 따라 증가하여 기질의 섭취량이 유전자 발현량을 잘 반영하고 있음이 확인되었다. MicroPET을 이용한 생체영상에서도 MCA와 MCA-tk 에서 확연한 집적의 차이를 보여주었다. 결론: 간암세포주에서 HSV1-tk 유전자의 발현 정도와 지속성 그리고 위치를 확인하기 위한 비침습적 PET 영상을 위한 기질로서 $[^{18}F]FHBG$는 매우 유용할 것으로 기대된다.

• 한국한의학연구원논문집
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• 제9권1호
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• pp.51-63
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• 2003

The international government committee is progressing their agreements about intellectual property protection of traditional knowledge(TK), gene resource(GR), folklore(FL) in WIPO. It is in the course of selection with precedence of TK, GR, FL in WlPO, focused on discussions about listing of TK documents, standardization of DB construction, sharing and profit distribution of GR. Their are disagreements between developed countries and underdeveloped countries about intellectual property protection agreements of TK, GR. The developed countries insist on using, the existing intellectual property protections, but the underdeveloped countries ask new ones on character of TK, GR, It causes intangible assets to be valuable trade properties in future world trade. We have to make national plans to face agreements about IP of TK, GR in WIPO with our own TK, GR. We must have a basic attitude about laying down these plans such as raising national economy, considering our TK, GR to be relics of mankind culture. In addition to these, it needs accurate analysis about agreements in WIPO, our TK, GR, scientific mechanical level and capital power.

• Nuclear Medicine and Molecular Imaging
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• 제43권5호
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• pp.478-486
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• 2009

목적: 화합물이 가지는 항바이러스 및 항암 작용으로 인하여 5-iododeoxyuridine 유도체들에 관한 연구는 매우 광범위하게 이루어져왔다. 방사 요오드가 치환된 이들 화합물에 대한 연구의 주요 목표는 체내 및 체외 평가 시 효과적 일뿐만 아니라, 보다 안정한 화합물을 개발하는 것이다. 본 연구를 통해, 다양한 방사성의약품의 중간체로도 이용되어질 수 있는 carbocyclic radioiododeoxyuridineanalogue (ddIVDU)를 합성하여 생물학적 평가를 수행하고자 하였다. 대상 및 방법: 목표 화합물의 합성은 Pd(0)-촉매 결합 반응, LAH 환원반응, hetero Diels-Alder 반응을 주요 반응으로 하여 수행하였다$(Sch\;3)^{10-12}$. 합성된 화합물의 생물학적 평가를 위해 MCA와 MCA-tk 세포에 다양한 농도의 GCV와 carbocyclic ddIVDV를 처리하여 MTS 법을 이용해 세포독성을 보았고, [$^{125}I$]carbocyclic ddIVDU를 이용해 MCA와 MCA-tk 세포에서 HSV1-tk에 의한 선택적 섭취를 비교 평가 하였다. 결과: Carbocyclic ddIVDU 및 요오드 도입을 위한 전구물질의 합성을 cyclopentadiene을 출발 물질로 하여 높은 수율에 의해 수행하였다. 방사요오드를 이용한 동위원소 도입 반응은 각각, 80% 이상의 방사표지 수율 및 95 % 이상의 방사 화학적 순도를 나타내었다. 세포독성 결과 MCA-tk 세포에서 carbodyclic ddIVDU는 GCV에 비해 세포독성이 작았고, MCA에서는 유사한 세포 독성을 보였다. [$^{125}I$]carbocyclic ddIVDU는 MCA-tk 세포에서 uptake는 8시간째까지 계속 증가하는 양상을 보였으며, MCA세포에서 uptake는 4시간째까지 일정하게 유지되다가 8시간째 급격히 증가하였다. [$^{125}I$]carbocyclic ddIVDU의 uptake는 MCA보다 MCA-tk에서 약 2-5배 정도 높은 결과를 보였다. 결론: 진행되어진 생물학적 결과로부터 이 유도체는 체내 평가 시 매우 안정할 뿐만 아니라, GCV에 비해 독성이 덜하고, HSV1-tk cell에 선택적임을 보여준다. 따라서 신규 화합물인 carbocyclic ddIVDU는 HSV1-tk를 영상화하는데 유용하게 이용되어질 수 있을 것이다.

• Journal of Pharmaceutical Investigation
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• 제33권4호
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• pp.267-272
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• 2003

Herpes simplex virus (HSV) thymidine kinase (TK) has been widely used for suicidal gene therapy in combination with nucleoside analogs such as ganciclovir (GCV). The use of HSV-TK is limited due to the side effect of GCV at high concentrations. Previous studies showed that stable transfectants of mutant HSV-TK with enhanced affinity to GCV were killed at lower GCV concentrations. In this study, we tested whether mutant HSV-TK can provide enhanced suicidal effect when transiently transfected with Epstein-Barr virus (EBV)-based plasmid. EBV-based plasmid which contains OriP and EBNA-1 sequence is well known for a stable episomal maintenance in human cells. Optimal transfection condition was assessed for SNU-638 gastric cancer cell line using polyetylnimine (PEI). Maximum transfection efficiency was achieved when DNA:PEI was 1:3 (w/v). Cytotoxicities of mutant and wild type HSV-TK were compared before and after partially selecting transfected cells. The cells were sensitive to $100\;{\mu}g/ml$ hygromycin. Following GCV treatment, more cells were killed after hygromycin selection than before selection. The mutant HSV-TK showed enhanced cytotoxicity compared with the wild type HSV-TK. Our results suggest that the EBV-based plasmid encoding mutant HSV-TK may be useful to treat the diseases caused by uncontrolled cell proliferation such as cancer and rheumatoid arthritis.