The influence of phenylalanine (Phe) in the medium on protein synthesis of chicken embryo fibroblasts (CEF) was examined. CEF was derived from 9-d-old embryos by trypsin-EDTA digestion. To examine the deficiency of Phe in the medium, CEF was cultured in Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) with or without Phe. CEF was also cultured in Dulbecco's phosphate buffered saline (PBS ($Ca^{2+}$, $Mg^{2+}$)) with or without $400{\mu}m$ Phe in order to examine the effect of Phe supplementation. All media were supplemented with 10% (v/v) fetal calf serum. After incubation for 6, 30 and 54 h, protein synthesis was measured by the incorporation of L-[2, $6-^{3}H$] Phe into CEF for further 18 h. Protein synthesis of CEF cultured in DMEM was higher than that in PBS ($Ca^{2+}$, $Mg^{2+}$). High specific radioactivity of Phe due to the low concentration of Phe in the medium resulted in the apparent increase in protein synthesis of CEF. Protein synthesis cultured in PBS ($Ca^{2+}$, $Mg^{2+}$) with Phe did not increase during 72 h of cell culture.
This paper discusses two important issues of corpus-based synthesis: synthesis unit generation based on phrase break strength information and pruning redundant synthesis unit instances. First, the new sentence set for recording was designed to make an efficient synthesis database, reflecting the characteristics of the Korean language. To obtain prosodic context sensitive units, we graded major prosodic phrases into 5 distinctive levels according to pause length and then discriminated intra-word triphones using the levels. Using the synthesis unit with phrase break strength information, synthetic speech was generated and evaluated subjectively. Second, a new pruning method based on weighted vector quantization (WVQ) was proposed to eliminate redundant synthesis unit instances from the synthesis database. WVQ takes the relative importance of each instance into account when clustering similar instances using vector quantization (VQ) technique. The proposed method was compared with two conventional pruning methods through objective and subjective evaluations of synthetic speech quality: one to simply limit the maximum number of instances, and the other based on normal VQ-based clustering. For the same reduction rate of instance number, the proposed method showed the best performance. The synthetic speech with reduction rate 45% had almost no perceptible degradation as compared to the synthetic speech without instance reduction.
Kim, Yong-Heon;Lee, Won-Su;Lee, Heoung-Yeoun;Koo, Kee-Young;Song, In-Kyu
한국신재생에너지학회:학술대회논문집
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2009.06a
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pp.888-888
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2009
A simulation study on SCR (Steam Carbon dioxide Reforming) process in gas-to-liquid (natural gas to Fischer-Tropsch synthetic fuel) process was carried out in order to find optimum reaction conditions for GTL (gas-to-liquid) process reaction. Optimum SCR operating conditions for synthesis gas to FT (Fischer-Tropsch) process were determined by changing reaction variables such as feed temperature and pressure. During the simulation, overall synthesis process was assumed to proceed under steady-state conditions. It was also assumed that physical properties of reaction medium were governed by RKS (Redlich-Kwong-Soave) equation. SCR process was considered as reaction models for synthesis gas in GTL proess. The effect of temperature and pressure on SCR process $H_2$/CO ratio and the effect of reaction pressure on SCR reaction were mainly examined. Simulation results were also compared to experimental results to confirm the reliability of simulation model. Simulation results were reasonably well matched with experimental results.
Song, Ho-Cheol;Carraway, Elizabeth R.;Kim, Young-Hun
Environmental Engineering Research
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v.10
no.4
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pp.165-173
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2005
Nano-sized iron particles were synthesized by reduction of $Fe^{3+}$ in aqueous solution under two reaction conditions, aerobic and anaerobic, and the reactivity of iron was tested by reaction with trichloroethene (TCE) using a batch system. Results showed that iron produced under anoxic condition for both synthesis and drying steps gave rise to iron with higher reduction reactivity, indicating the presence of oxygen is not favorable for production of nano-sized iron deemed to accomplish reactivity enhancement from particle sized reduction. Nano-sized iron sample obtained from the anoxic synthesis condition was further characterized using various instrumental measurements to identity particle morphology, composition, surface area, and particle size distribution. The scanning electron microscopic (SEM) image showed that synthesized particles were uniform, spherical particles (< 100 nm), and aggregated into various chain structures. The effects of other synthesis conditions such as solution pH, initial $Fe^{3+}$ concentration, and reductant injection rate on the reactivity of nano-sized iron, along with standardization of the synthesis protocol, are presented in the companion paper.
It has been known that, in enzymatic synthesis of cephalexin, the conversion yield was reduced by high loading of ampicillin acylase. In order to elucidate this phenomena, pH-controlled synthesis of cephalexin was examined using a purified Acetobacter turbidans acylase. When the pH of the reaction mixture was maintained at $6.20{\pm}0.04$, the reduction of the maximal conversion rate was not observed even with high enzyme loading. The kinetic parameters also suggest that pH drop during the enzymatic synthesis of cephalexin was mainly attributed to the rapid hydrolysis of D-${\alpha}$-phenylglycine methyl ester to D-${\alpha}$-phenylglycine, rather than the disappearance of 7-amino-3-deacetoxycephalosporanic acid for cephalexin synthesis. At higher molar ratio of two substrates, [D-${\alpha}$-phenylglycine methyl ester]/[7-amino-3-deacetoxycephalosporanic acid], the conversion rate was also elevated under pH-controlled enzymatic synthesis, which implies that the main reason for the pH drop is due to the production of D-${\alpha}$-phenylglycine methyl easter, the effect of a water-methanol cosolvent system on the ester, the effect of a water-methanol cosolvent system on the conversion profile was also examined. Even the though the conversion rate was increased in 10% methanol solution, a higher than 16% methanol in the reaction mixture caused an inactivation of enzyme.
Bovine fibroblasts were cultured in Dulbecco's Modified Eagle's Medium and then treated with control, insulin (I, $1{\mu}g/ml$), cholera toxin (CT, 0.1-100 ng/ml) or CT (0.1-100 ng/ml) + I ($1{\mu}g/ml$). Cholera toxin, an activator of adenylate cyclase, significantly decreased insulin induced DNA synthesis (p<0.05). The modulation of DNA synthesis apparently involves events occurring in early stage of cell growth, at least between the first 4 and 8 hour of CT treatment. Insulin induced collagen as well as noncollagen synthesis in cell layer, however, these syntheses were reduced by addition of cholera toxin (p<0.05) but were not completely reduced. It is not clear whether the reduction of insulin-induced cell layer collagen or noncollagen proteins by CT is involved in the inhibitory effect on insulin-induced DNA synthesis. However, we could rule out the hypothesis that insulin-induced DNA synthesis is reduced by CT-induced cellular differentiation.
The effect of bovine growth hormone digested with trypsin on whole-body protein synthesis in vitro of chicken embryos was investigated by using a whole-embryo culture system. Bovine growth hormone at 5.3 and 530 ng/ml was digested partially and completely with trypsin for 4 min and 18 h, respectively. After culturing chicken embryos with a synthetic medium containing $L-[4-^3H]$ pheylalanine, whole-embryo protein synthesis was determined from the ratio of specific radioactivities of free and protein-bound pheylalanine. Whole-embryo protein synthesis of the control group cultured with no bovine growth hormone was $49.5{\pm}2.2%/d$. There was no significant interaction between digestion time and the concentration of trypsin-digested bovine growth hormone. Tryptic digestion of bovine growth hormone increased fractional synthesis rates of whole-body protein compared to the 0-min groups, and there was no significant difference between the 4-min and 18-h groups. The higher concentration (530 ng/ml) of trypsin-digested bovine growth hormone was more effective in enhancing whole-embryo protein synthesis than the lower concentration (5.3 ng/ml).
Ali, Mussa M.;Obregon, Demian;Agrawal, Krishna C.;Mansour, Mahmoud;Abdel-Mageed, Asim B.
BMB Reports
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v.43
no.11
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pp.732-737
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2010
RNA interference is a post-transcriptional silencing mechanism triggered by the bioavailability and/or exogenous introduction of double-stranded RNA (dsRNA) into cells. Here we describe a novel method for the synthesis of siRNA in a single vessel. The method employs in vitro transcription and a single-stranded DNA (ssDNA) template and design, which incorporates upon self-annealing, two promoters, two templates, and three loop regions. Using this method of synthesis we generated efficacious siRNAs designed to silence both exogenous and endogenous genes in mammalian cells. Due to its unique design the single-stranded template is easily amenable to adaptation for attachment to surface platforms for synthesis of siRNAs. A siRNA synthesis platform was generated using a 3' end-biotinylated ssDNA template tethered to a streptavidin coated surface that generates stable siRNAs under multiple cycles of production. Together these data demonstrate a unique and robust method for scalable siRNA synthesis with potential application in RNAi-based array systems.
Dose response and time dependence of unscheduled DNA synthesis induced by X-rays were measured to determine if any correlation exists between unscheduled DNA synthesis, modal chromosome number, chromosome exchange and mitotic activity in four mammalian cell strains. Unscheduled DNA synthesis occurred in all strains studied. The rate was dose-dependent and strain-specific. Only HeLa $S_3$ showed a staturated dose response after 4, 000 R, other cells were linearly proportional to dose increases. Time dependence of unscheduled DNA synthesis was completed within 2 hours after irradiation regardless of cell strains. Unscheduled DNA synthesis was not directly related to modal chromosome number, total exchange rate and mitotic activity. Mitotic activity and chromosome exchange were both dose-dependent, but the rates of them were inversely related.
An accurate substructural synthesis method including random responses synthesis, frequency-response functions synthesis and mid-order modes synthesis is developed based on rigorous substructure description, dynamic condensation and coupling. An entire structure can firstly be divided into several substructures according to different functions, geometric and dynamic characteristics. Substructural displacements are expressed exactly by retained mid-order fixed-interfacial normal modes and residual constraint modes. Substructural interfacial degree-of-freedoms are eliminated by interfacial displacements compatibility and forces equilibrium between adjacent substructures. Then substructural mode vibration equations are coupled to form an exact-condensed synthesized structure equation, from which structural mid-order modes are calculated accurately. Furthermore, substructural frequency-response function equations are coupled to yield an exact-condensed synthesized structure vibration equation in frequency domain, from which the generalized structural frequency-response functions are obtained. Substructural frequency-response functions are calculated separately by using the generalized frequency-response functions, which can be assembled into an entire-structural frequency-response function matrix. Substructural power spectral density functions are expressed by the exact-synthesized substructural frequency-response functions, and substructural random responses such as correlation functions and mean-square responses can be calculated separately. The accuracy and capacity of the proposed substructure synthesis method is verified by numerical examples.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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