A total of 191 samples collected from the commercial swine farms located in Chungnam province were investigated by PCR to estimate the prevalence of Lawsonia (L.) intracellularis infection. In the group of the pigs with proliferative enteritis, 14 (93.3%) of 15 intestinal samples and 12 (80.0%) of 15 feces were positive in PCR. In contrast, a relatively low positive rate (18.0%, 29 of 161 samples) was determined in the group of normal healthy pigs. The group of pigs over 120 days showed the highest positive rates (26.8%, 15 of 56 samples). In the comparison of the sequences of 210bp for species specific fragments and 301bp for outer membrane protein, the isolates (L1. L2) showed almost 100% identity with the reference L. intracellularis (L08049, USA). For the sequences of partial 16s rDNA, the homologies among the 5 isolates (L1-L5) were 97.4% to 99.3%, and those of 5 sequences (L1-L5) versus 5 overseas reference strains of L. intracellularis ranged from 98.6% to 99.8%. In the comparison of the nucleotide sequences among 5 isolates and other species in Desulfovibrionales showed 82.4 to 99.5% identities. The 5 isolates shared relatively low identities (76.9% to 84.4%) with the species of alpha-proteobacteria. In phylogenetic analysis based on the 16s rDNA sequences, all of the 5 isolates (L1-L5) were located in the same branch with the strains of L. intracellularis that were previously isolated from the pigs in USA and China. Seven strains of Desulfovibrio sp. were clustered in the neighboring branches, whereas alpha and gamma Proteobacteria showed distant relationship with L. intracellularis strains. The present findings suggest that L. intracellularis infection is endemic in the swine farms in the regions, and that the domestic isolates maintained very limited genetic variation.
Sungwoo Park;Eunseok Cho;Amal Senevirathne;Hak-Jae Chung;Seungmin Ha;Chae-Hyun Kim;Seogjin Kang;John Hwa Lee
Journal of Veterinary Science
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제25권1호
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pp.4.1-4.14
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2024
Background: Lawsonia intracellularis is the causative agent of proliferative enteropathy and is associated with several outbreaks, causing substantial economic loss to the porcine industry. Objectives: In this study, we focused on demonstrating the protective effect in the mouse model through the immunological bases of two vaccine strains against porcine proliferative enteritis. Methods: We used live-attenuated Salmonella Typhimurium (ST) secreting two selected immunogenic LI antigens (Lawsonia autotransporter A epitopes and flagellin [FliC]-peptidoglycan-associated lipoprotein-FliC) as the vaccine carrier. The constructs were cloned into a Salmonella expression vector (pJHL65) and transformed into the ST strain (JOL912). The expression of immunogenic proteins within Salmonella was evaluated via immunoblotting. Results: Immunizing BALB/c mice orally and subcutaneously induced high levels of LI-specific systemic immunoglobulin G and mucosal secretory immunoglobulin A. In immunized mice, there was significant upregulation of interferon-γ and interleukin-4 cytokine mRNA and an increase in the subpopulations of cluster of differentiation (CD) 4+ and CD 8+ T lymphocytes upon splenocytes re-stimulation with LI antigens. We observed significant protection in C57BL/6 mice against challenge with 106.9 times the median tissue culture infectious dose of LI or 2 × 109 colony-forming units of the virulent ST strain. Immunizing mice with either individual vaccine strains or co-mixture inhibited bacterial proliferation, with a marked reduction in the percentage of mice shedding Lawsonia in their feces. Conclusions: Salmonella-mediated LI gene delivery induces robust humoral and cellular immune reactions, leading to significant protection against LI and salmonellosis.
Rectal stricture occurred in 2 finishing pigs submitted for necropsy from Moguchon, the meat processing plant, chonbuk. Grossly, the wall of the rectum was harden and thickened by fibrous tissue. Anteriro to the stricture, the descending colon was dilated up to 30cm in diameter, filled with gas and pasty green fluidal feces. Histologically, the epithelia of rectal mucosa were necrotized. The mucosa and submucosa of rectum were infiltrated by macrophages, eosinophils and lymphocytes. This infiltration was the most extensive in the deeper layer of submucosa and intensive fibrosis was observed in deeper submucosa layer. This case is report for rectal stricture of finishing pig.
본 연구는 돈분, 계분, 우분을 온도별 혐기배양시 휘발성 저급지방산 발현 양상을 구명하기 위해 수행하였다. 축분은 축산기술연구소에서 사육하는 35일령 산란계의 계분, 체중 50-60kg 육성돈의 돈분, 체중 550kg 한우의 우분을 이용하였다. 축분의 VFAs 발현 양상을 구명하기 위해 밀폐된 상태에서 $10^{\circ}C$, $25^{\circ}C$, $37^{\circ}C$로 하여 6일간 배양하였으며 배양기간 중 24시간마다 canister를 이용하여 VOC 분석용 시료를 채취하였다. 그 결과는 다음과 같다. 1. 배양온도에서 검지 된 아세트산의 량은 6일동안 돈분에서 1,128.05mg/kg, 계분에서628.21mg/kg, 우분에서 592.50mg/kg이 발현되었으며 돈분의 경우 83.87%(946.10mg/kg)가$25^{\circ}C$에서 발현되었고 이 중 83.57%가 3일령, 4일령과 5일령에 집중적으로 나타났다. 계분의 경우 $25^{\circ}C$ 처리구에서 45.36%(284.93 mg/kg), $37^{\circ}C$에서 35.05%(220.17mg/kg)로 나타나 주로 $25^{\circ}C$ 이상에서 발현한 것으로 특징지어졌다. 우분의 경우 57.49%(340.63mg/kg)가 $25^{\circ}C$에서 발현되었고 이 중 78.79%가 3일령, 4일령과 5일령에 발현되었다. 2. 배양온도에서 검지 된 프로피온산의 량은 6일 동안 돈분에서 238.56mg/kg, 계분에서 162.14mg/kg, 우분에서 155.49mg/kg이 발현되었으며 돈분의 경우 78.52%(187.32mg/kg)가 $25^{\circ}C$에서 발현되었고 이 중 79.1%가 3일령, 4일령과 5일령에 집중적으로 나타났다. 계분의 경우 $25^{\circ}C$ 처리구에서 35.12%(56.95mg/kg), $37^{\circ}C$에서 45.89%(74.40mg/kg)로 나타나 주로 $25^{\circ}C$ 이상에서 발현한 것으로 특징지어졌다. 우분의 경우 $10^{\circ}C$ 처리구에서 28.21%(43.86mg/kg), $25^{\circ}C$에서 49.30% (76.66mg/kg)로 나타나 주로 $25^{\circ}C$ 이하에서 발현한 것으로 나타났다. 3. 배양온도에서 검지 된 뷰틸산의 량은 6일 동안 돈분에서 1,463.87mg/kg, 계분에서 96.72mg/kg, 우분에서 129.18mg/kg이 발현되었으며 돈분의 경우 93.31%(1,365.95mg/kg)가 $25^{\circ}C$에서 발현되었고 이 중 87.92%가 3일령, 4일령과 6일령에 집중적으로 나타났다. 계분의 경우 $37^{\circ}C$ 처리구에서 76.60%(74.09 mg/kg)로 발현되었고 이 중 88%가 1일령, 2일령과 5일령에 집중적으로 나타났다. 우분의 경우 61.55%(79.51mg/kg)가 $25^{\circ}C$에서 발현되었고 이 중 89.6%가 1일령, 3일령과 4일령에 집중적으로 나타났다. 4. 배양온도에서 검지된 이소밸릭산의 량은 6일 동안 돈분에서 6,885.99mg/kg, 계분에서 307.47mg/kg, 우분에서 399.28mg/kg이 발현되었으며 돈분의 경우 $25^{\circ}C$ 처리구에서 28.22%(1,943.52mg/kg), $37^{\circ}C$에서 68.76%(4,734.90mg/kg)로 나타나 주로 $25^{\circ}C$ 이상에서 발현한 것으로 나타났다. 계분의 경우 $37^{\circ}C$ 처리구에서 59.89%(184.13mg/kg)로 발현되었고 이중 100%가 2일령과 3일령에 집중적으로 나타났다. 우분의 경우 $25^{\circ}C$ 처리구에서 48.56%(193.90mg/kg), $37^{\circ}C$에서 46.93%(187.40mg/kg)로 나타나 주로 $25^{\circ}C$ 이상에서 발현한 것으로 나타났다.
Interest in marine organisms as potential sources of bioactive agents has increased in recent years. The red seaweed, Callophyllis (C.) japonica, is abundant in the coastal regions of Jeju Island in South Korea. A previous study shows that C. japonica extracts have antioxidant activity and radioprotective effects. In this study, an methanol extract of C. japonica was tested whether it has antibacterial effects against the bacteria from swine. In vitro antibacterial activities of the crude extracts prepared from the C. japonica using 80 % methanol were tested for inhibitory activity against the Escherichia (E.) coli (S175), Enterococcus (E.) faecium (ATCC 51558), Salmonella (S.) Typhimurium and Staphylo-coccus (S.) aureus (ATCC 25923) by using broth dilution method. All organisms were incubated in brain heart infusion medium containing 1% extract at 0, 4, 8, 12 and 24 hrs. The 3 days-old piglets were fed an experimental diet supplemented with 1% C. japonica for 1 week. And the change of the coliform bacteria in feces were examined after supplement of C. japonica for 1 week. When the inocula containing $10^2{\sim}10^3$CFU/ml of each organism were used the extracts of C. japonica showed various degrees of antibacterial effects on all bacteria tested. The CFU value ($6.3\times10^8$CFU/ml) of C. japonica for E. coli was decreased 30% compared with vehicle controls ($9.0\times10^8$CFU/ml) after 8 hrs incubation. The proliferation rate of E. faecium was inhibited about 68% at 4 hrs, 81% at 8 hrs and 76% at 12 hrs after incubation, respectively. The proliferation rate of S. Typhimurium was inhibited about 96% at 4 hrs, 90% at 8 hrs and 72% at 12 hrs after incubation with extracts of C. japonica. The proliferation rate of S. aureus was inhibited more than 90% each time courses. Conclusively, a red seaweed extract of C. japonica was found to be effective against a number of gram negative and gram positive bacteria such as E. coli, E. faecium, S. Typhimurium, and S. aureus. The number of coliform bacteria was increased in the 1% C. japonica-treated group, as compared to those of controls. This result suggests that C. japonica extracts be added as an effective natural antibacterial agent. The precise mechanism of antibacterial effects and its application on swine industry remains to be further studied.
Park, Hyun-Eui;Shin, Min-Kyoung;Park, Hong-Tae;Shin, Seung Won;Jung, Myunghwan;Im, Young Bin;Yoo, Han Sang
대한수의학회지
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제55권3호
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pp.191-197
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2015
Escherichia (E.) coli is commensal bacteria found in the intestine; however, some pathogenic strains cause diseases in animals and humans. Although E. coli does not typically produce hydrogen sulfide ($H_2S$), $H_2S$-producing strains of E. coli have been identified worldwide. The relationship between virulence and $H_2S$ production has not yet been determined. Therefore, characteristics of $H_2S$-producing isolates obtained from swine feces were evaluated including antibiotic resistance patterns, virulence gene expression, and genetic relatedness. Rates of antibiotic resistance of the $H_2S$-producing E. coli varied according to antibiotic. Only the EAST1 gene was detected as a virulence gene in five $H_2S$-producing E. coli strains. Genes conferring $H_2S$ production were not transmissible although the sseA gene encoding 3-mercaptopyruvate sulfurtransferase was detected in all $H_2S$-producing E. coli strains. Sequences of the sseA gene motif CGSVTA around Cys238 were also identical in all $H_2S$- producing E. coli strains. Diverse genetic relatedness among the isolates was observed by pulsed-field gel electrophoresis analysis. These results suggested that $H_2S$-producing E. coli strains were not derived from a specific clone and $H_2S$ production in E. coli is not associated with virulence genes.
양돈농가에서의 계절별 돈사배출수 발생량은 돈사내에서 스크레퍼 및 인력으로 돈분을 분리수거하여 분은 퇴비화하고 배출수는 활성오니법을 이용하여 정화처리하고 있는 농가를 6농가를 선정하여 돈사배풀수랸 및 배출수의 특성을 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 돈사배출수량의 평균배출량은 4.15 l/일/두였으며, 계절별로는 여름철 5.02, 겨울철 4.11, 겨울철에 3.44, 봄철에 4.04 l/일.두로 여름철에 가장 많은 세정수가 발생되었다. 2. 돈사배출수 조사농가의 돈분은 수분 함량은 평균 82.9%였고 돈분의 BOD 및 SS농도는 각각 56,847mg/l, 119,750mg/l였으며, 돈사배풀수의 BOD, SS농도는 각각 2,951, 1,983mg/$\ell$였다.
본시험은 비육돈사료에 미생물제제를 사료에 미생물제제 A 및 B 0.1 미생물제제 C를 0.2% 혼합 급여할 경우 사료섭취량 및 돈분의 오염물질 배설농도에 미치는 영향을 분석하기 위하여 4처리$\times$반복당 5두로서 총 20두를 공시하여 실시하였는데 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 비육돈의 일일 평균사료섭취량은 대조구 3.15 kg/일.두였고 미생물A, B, C구는 각각 3.14kg/일/두, 3.31, 3.42로 미생물제제 C구에서 일일 사료섭취량이 가장 높게 조사되었으며(p<0.05), 2. 일일평균 음수량은 사료섭취량이 높았던 미생물 C구에서 3.95kg/일/두로 가장 높게 조사되었다(p<0.05). 3. 미생물제제 처리구별로 분뇨배설량은 사료섭취량이 높았던 미생물제제 C구에서 가장 많이 배설되는 것으로 조사되었으며(p<0.05), 돈뇨의 배설량도 미생물제제 C구에서 2.23kg/일/두에서 높았다(p<0.05). 4. 돈분뇨의 수분 함량은 및 비료성분인 T-N, $P_{2}O_{5}$, $K_{2}O$ 성분도 처리 간에 큰 차이를 보이지 않았다(p<0.05). 5. 돈분뇨의 평균 BOD 농도는 돈분의 경우 미생물제제 B, C제제 급여구가 유의적으로 높게 조사되었다(p<0.05). 그리고 돈뇨의 BOD의 경우에는 대조구에서 $8,657.5mg/{\ell}$로 가장 높은 것으로 조사되었다(p<0.05). 6. COD 농도는 대조구에서 가장 높게 조사되었으며(p<0.05). 돈뇨의 경우에는 미생물제제 A급여구에서 평균 $9,545mg/{\ell}$로 가장 높았다(p<0.05). 7. SS 농도는 미생물제제 B급여구에서 가장 높게 조사되었으며(p<0.05), 돈분뇨중의 T-N 농도는 처리구간에 유의적인 차이가 나타나지 않았다(p<0.05). 그리고 T-P 농도의 경우에는 미생물제제 C급여구에서 유의적인 차이가 나는 것으로 조사되었다(p<0.05). 이상의 결과를 요약해보면 비육돈에 미생물제제 혼합급여시 사료섭취량과 음수량을 증가시키는데 효과가 있는 것으로 조사되었으나, 비료성분 배설량에는 큰 차이를 보이지 않는 것으로 조사되었으나, BOD 등 오염물질농도의 경우에는 미생물제제 A급여구에서 가장 낮게 조사되어 비육돈사료에 미생물제제 급여시 오염물질 저감효과가 있는 것으로 조사되었다.
고농도의 질소를 함유하는 축산폐수에 대한 문헌고찰 및 실제 운전사례를 통해 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 전국의 축산농가에서 하루 발생하는 축산폐수발생량은 약 197천$m^3$로서 이중 법적규제대상 미만 축산폐수가 50%를 차지하고 인근하천으로 직방류시 부영양화의 원인이 되고 있다. 2. 축산폐수의 특성중 가축의 분과 뇨에 따라 유기물 및 질소${\cdot}$인의 농도차가 크기 때문에 축산폐수처리시는 반드시 분과 뇨의 분리가 이루어져야하고 또한 축산폐수공공처리시설의 계획에 있어서 처리대상 축산폐수의 정확한 오염농도의 산정이 필요하다. 3. 기존 처리장에 화학적처리공정인 응집반응조와 질소제거를 위한 혐기${\cdot}$호기조를 설치하여 운영한 K시의 실제 운전사례 결과 유입수의 총질소 농도가 $1,500{\sim}3,000mg/l$인 것을 120mg/l 이하로 방류하므로써 $92{\sim}96%$의 제거효율을 나타내었고 유입수의 총인농도가 $131{\sim}156mg/l$인 것을 $0.15{\sim}1.00mg/l$로 처리하므로써 99%이상의 제거효율을 나타내었다. 4. 혐기조에서 탈질 미생물의 원활한 대사활동을 위해서는 지속적인 유기탄소원 공급과 pH의 영향이 중요하데 조사기간동안 혐기조의 pH는 평균 9.0정도를 유지하였다. 5. 질소${\cdot}$인제거 공법들의 현장적용을 위해서는 적절한 적응성 및 처리성 실험 그리고 각 공정의 올바른 운전과 유지관리의 기술이 확립되어야 한다. 6. 정부에서는 축산폐수의 적정처리 및 관리대책 방안으로 법규 및 수질기준강화, 개별 축산농가에 대한 지원, 지도${\cdot}$점검 및 홍보강화와 기술지원 등 장차의 엄격한 방류수수질기준을 안정적으로 유지할 수 있는 기술보급과 이의 적정 관리방안에 대한 적극적 검토가 요구된다.
Background: Major amino acids in pig diets are Lys, Met, Thr, and Trp, but little is known about the requirements for the other essential amino acids, especially on odorous compounds and microbial characteristics in feces of growing-finishing pigs. To this end, different levels of amino acid composition added to diets to investigate the effects of amino acid composition on microbial characteristics and odorous compounds concentration. Methods: A total eight (n = 8) barrows (Landrace ${\times}$ Yorkshire ${\times}$ Duroc) with an average bodyweight of $89.38{\pm}3.3kg$ were individually fed diets formulated by Korean Feeding Standards 2007 (old version) or 2012 (updated with ideal protein concept) in metabolism crates with two replication. After 15-day adaptation period, fresh faecal samples were collected directly from pigs every week for 4 weeks and analysed for total volatile fatty acids (VFA), phenols and indoles by using gas chromatography. The nitrogen was determined by Kjeldahl method. Bacterial communities were detected by using a 454 FLX titanium pyrosequencing system. Results: Level of VFA tended to be greater in 2012 than 2007 group. Among VFAs, 2012 group had greater (p < 0.05) level of short chain fatty acids (SCFA) than control.Concentration of odorous compounds in feces was also affected by amino acid composition in pig diet. Levels of ammonium and indoles tended to be higher in 2012 group when compared with 2007 group.Concentration of phenols, p-cresol, biochemical oxygen demand, and total Kjeldahl nitrogen, however, were lower (P < 0.05) in 2012 treatment group compare to 2007. The proportion of Firmicute phylum were decreased, while the Bacteriodetes phylum proportion increased and bacterial genera includingCoprococcus, Bacillus, and Bacteroides increased (p < 0.05) in 2012 compare to 2007 group. Conclusion: Results from our current study indicates that well balanced amino acid composition reduces odor by modulating the gut microbial community. Administration of pig diet formulated with the ideal protein concept may help improve gut fermentation as well as reduce the odor causing compounds in pig manure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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