• The Korean Journal of Physiology
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• 제1권2호
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• pp.151-156
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• 1967

Outward movement of hemoglobin and $K^+$ ion across rabbit erythrocyte membrane after heating, cooling and in acid medium was studied. One milliliter of rabbit blood was centrifuged and packed red cells were obtained. Packed red cells were resuspended by addition of 4 ml of 0.9% NaCl solution and were subjected to heating $(57^{\circ}C\;for\;5\;minutes)$ or cooling $(-4^{\circ}C{\sim}-8^{\circ}C\;of\;-10^{\circ}C{\sim}-11^{\circ}C\;for\;10\;minutes) $. For acid medium experiment packed ref cells were resuspended by addition of 4 ml of acid medium of PH 4.5 consisting of 0.01% glacial acetic acid in 0.85% NaCl solution and kept standing for 10 minutes. All red cell suspensions were centrifuged again and packed red cells were separated. This packed red cells were again suspended in 4 ml of NaCl solution of 0.8%, 0.7%, 0.6%, and 0.5% concentration respectively and kept standing for 20 minutes. The concentration of hemoglobin and $K^+$ in the supernatant of the above red cell suspensions were measured and the following results were obtained. 1. Outward movement of hemoglobin and $K^+$ was greatest in red cells subjected to heating. The movement paralled to the osmolal concentration gradient between extra- and intra-cellular phase of red cells. 2. In acid medium the outflux of hemoglobin and $K^+$ increased as compared to the control. 3. In red cells subjected to the cold of $-10^{\circ}C{\sim}-11^{\circ}C$ the outflux of hemoglobin and $K^+$ increased. Whereas in the environment of $-4^{\circ}C{\sim}-8^{\circ}C$ there was no change in the outflux of $K^+$. The he-moglobin outflux showed rather a decreased as compared to tile control.

• Toxicological Research
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• 제21권3호
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• pp.235-240
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• 2005

Pollen has been used for prevention or treatment of certain diseases such as diabetes arthritis or cancer in traditional medicine. Among various pollens, pine tree pollen is known to relieve hypertension, suppress fatty liver progression, and facilitate the digestion, but its immunological activities are less known. To evaluate immunological reactivities and immunotoxicities of pine tree pollen, BALB/c mice were administered to the poller through oral route. Pine tree pollen suspended in distilled water or extracted with methanol has been administered at the concentration of 0, 10, or 100 mg/kg five days per week for four weeks. Polyclonal activation of splenic T cells with phytohemagglutinins did not induce a significant difference in IL-4 and $IFN_{\gamma}$ production between the pollen-administered mice groups and the control mice. Furthermore, polyclonal activation of splenic B cells with lipopolysaccharides did not result a significant difference in IgG1 and IgG2a production among the groups. These findings imply that the intake of pine tree pollen does not bring any humoral and cellular immune-dysrequlation. Whereas, viability of Listeria monocytogenes was suppressed in the mice administered with 100 mg/kg bw methanol extract, indicating the potential ability of pine tree pollen to enhance cell-mediated immunity mediated by type-1 helper T cells. In addition, aberrant upregulation of plasma IgG1 level was observed in the pollen-administered mice, which suggests a possibility of allergic response induction through the pine tree pollen uptake. Overall, pine tree pollen-mediated modulation of humoral or cellular immunity is worthy of further systematic investigation.

• KSBB Journal
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• 제21권5호
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• pp.384-388
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• 2006

본 연구에서는 고정화 방선균을 이용한 이차대사산물생산 공정 개발에 있어서 고려해야 할 중요한 사항인, 고정화세포의 반복사용 가능성을 조사하였다. 또한 축축한 담체에 균사체 형태의 생산균주의 고정화가능성에 대하여 알아보았다. 셀라이트 담체에 고정화된 고생산성 Streptomyces lincolnensis 돌연변이주를 이용한 반복회분식 배양에서, 회분수가 증가함에 따라 고정화세포의 린코마이신 생산성이 증가하였고 9번째 회분에서는 1007 $({\pm}256)$ mg/L의 린코마이신이 얻어졌다. 10번의 반복회분동안 고정화세포에 의해 얻어진 린코마이신 총양을 기준으로 계산된 고정화세포 배양의 생산성은 현탁회분식 배양에 비해 1.4배 높았다. 축축한 담체와 배지가 포함된 플라스크에 균사체 형태의 생산균주를 접종하고 배양 후 생성된 고정화세포 농도와 린코마이신 양은 건조한 담체에 포자상태의 생산균주를 고정화한 후 배양하여 얻어진 것에 비하여 다소 높음이 관찰되었다. 이는 균사체 형태의 생산균주가 축축한 담체에 쉽게 고정화되는 것을 의미한다. 실제 생산규모를 고려할 때, 본 연구팀에서 개발한 방선균 고정화방법은 담체 멸균 및 세포고정화 단계에서 추가적인 설비가 필요 없으며, 이는 고정화단계에서 숙련된 기술과 추가의 설비를 요하는 다른 방법들에 비하여 실용적이며 경쟁력 있는 생물 공정이라고 사료된다.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제32권4호
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• pp.287-292
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• 2005

Actinidia deliciosa ${\times}$ A. arguta clone 118의 엽조직을 0.5 mg/L 2,4-D, 0.1 mg/L NAA 및 0.05 mg/L BA가 첨가된 MS 배지에서 8주간, 광조건하에서 배양하여 캘러스를 유기시켰다. 유도된 캘러스는 현탁배양을 위해 0.5 mg/L 2,4-D, 0.1 mg/L NAA 및 0.05 mg/L BA가 첨가된 액체 MS배지로 접종시켰다. 현탁배양세포의 대수생장기 혹은 생장 정체기 시기는 세포배양 5-11일, 12일경에 각각 관찰되었다. 현탁세포로부터 유도된 캘러스의 생중량은 생장조절물질 조합에 따라서 차이를 보이지 않았다. 가장 높은 신초유도율 (88.3%)은 2.0 mg/L zeatin의 첨가구였으며 TDZ과 BA 혹은 zeatin이 혼합처리된 처리구에서 또한 신초유도에 효과가 있는 것으로 나타났다. 유도된 신초를 MS +0.2 mg/L zeatin으로 옮겨 더욱 신초생장을 유도하였으며 발근유도를 위해 1.0 gm/L IBA가 첨가된 St배지로 옮겼다. Actinidia deliciosa ${\times}$ A. arguta clone 118의 세포배양으로부터 식물체 재분화까지 가능하였다.

• 폴리머
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• 제32권1호
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• pp.49-55
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• 2008

슈반세포는 강력한 말초신경 재생 효과를 가지고 있다. 그리고 신경 유도관으로 사용된 소장점막하조직(small intestinal submucosa, SIS)은 세포활성을 촉진하는 여러 가지 성장인자를 다량 함유하고 있고 이종이식의 면역 거부반응이 없는 생체물질로서 널리 사용되고 있다. 슈반세포는 Fischer 쥐의 좌골신경으로부터 분리하였고, 순수 배양된 슈반세포를 $2{\times}10^6$ 세포로 계산하여 SIS 스폰지에 파종하였다. 그리고 Fischer 쥐의 좌골신경 5 mm를 제거하여 신경과 제조된 스폰지를 연결하는 신경 외막 봉합을 실시하였다. 그런 후 1, 2주 및 4주 후 재생된 신경을 적출 한 후, H &E 염색과 S-100, GFAP 및 NF 면역조직화학염색을 실시하였다. 그 결과, SIS 스폰지와 슈반세포를 함께 이식한 군(Group II)은 아무것도 이식하지 않은 군(Control II)과 SIS 스폰지만 이식한 군(Group I) 보다 뚜렷한 양성반응을 보였고 손상을 받지 않은 군(Control I)과 별차이가 없는 양상을 보여주었다. 이는 SIS 스폰지와 슈반세포를 함께 이식했을 때 손상된 조직공학적 말초 신경 재생에 중요한 역할을 한 것으로 사료된다.

• 대한치과보철학회지
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• 제17권1호
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• pp.47-59
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• 1979

In order to study the morphologic changes of the unfixed odontoblasts suspended in phenol solution of several different concentrations, the author carried out the extraction of lower incisor of S-D strain rats to collect the odontoblasts, and the cells obtained were suspended immediately in saline solution. After observing the odontoblasts in fresh state, the saline solution was substituted with 0.125%, 0.25% 0.5%, 1% and 2% diluted phenol solutions. The morphologic changes were examined with phase contrast microscope at intervals of 10, 30, and 60 minutes. The results were as follows: 1. In saline solution the odontoblast showed cytoplasmic swelling, slender cytoplasmic process, thick rim nuclear membrane with increased dark contrast, and prominent nucleoli and chromatin granules with lapse of time intervals. In accordance with time intervals, blisters appeared in the supranuclear zone and increased its size and moved outward of the cytoplasmic membrane resulting detachment from the cell membrane. The phase dark cytoplasmic granules were increased in its dark contrast and in its size. 2. In 0.125% and 0.25% phenol solution, the odontoblasts and its nucleus shrunk immeidately and its contrast of cellular components was increased. With the lapse of time, the phase-dark granules in cytoplasm were aggregated, and several blisters were formed in and out of the cells. The outline of cytoplasmic membrane was also obscured. 3. In 0.5% phenol solution, the necleus shrunk at once, but soon after it revealed karyolysis accompanying dark contrast of neclear components such as nuclear membrane, nucleoli, and chromatin granules. On the contrary, the cytoplasmic granules showed aggregation and increased dark contrast, small and large blisters were formed in and out of the odontblasts and the outline of cytoplasmic membrane became obscured. 4. In 1% phenol solution, it showed shrinkage of odontblasts and its nuclei with thick rim nuclear membrane, aggregation of chromatin granules and occasional karyorrhexis. The dark contrast of cytoplasmic granules was increased and aggregated each other. But the blister formation could not be found. 5. In 2% phenol solution, it showed the shrinkage of odontoblasts and pyknotic nuclei with increased dark contrast of nucleoli and chromatin granules. The number of cytoplasmic granules was decreased by aggregation. But the blister formation could not be found as in 1% phenol solution.

• 한국수산과학회지
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• 제29권5호
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• pp.595-602
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• 1996

식품 공장에서 일반적으로 사용하고 있는 살균제인 benzalkonium chloride (BAC)와 sodium hypochlorite (NaOCl)의 Listeria monocytogenes ATCC 15313에 대한 살균 효과를 알아보기 위하여 살균제에 균을 직접 현탁시킨 경우 (in vitro)와 sponge에 균을 접종하여 실험한 경우 (in vivo)를 비교하였다. 먼저 $0\~0.1\%$ BAC와 $0\~150ppm$ NaOCl (유효염소량)을 일정 농도로 조절하여 균을 현탁시킨 결과 BAC의 경우는 $0.25\%$ 이상의 농도에서 0.5분 이내에, 그리고 NaOCl은 100ppm에서 2분이내에 살균효과를 나타내었고 그 이상의 농도에서는 30초 이내에 살균효과를 나타내었다. 그리고 sponge $(6.0{\times}4.0{\times}4.0cm)$에 균 배양액 (약 $10^7\;CFU/ml$, tryptic soy broth) 15ml와 위의 2가지 살균제를 각각 일정 시간 처리한 결과 최초 20분 동안 살균효과가 좋았고 그 이후에는 효과가 감소하였다. BAC $0.1\%$ 이상부터 살균효과가 나타나 $0.25\%$의 경우 20분만에 3-log정도의 균수가 감소되었고 NaOCl도 300ppm 이상에서 살균효과가 나타나 800ppm의 경우 20분만에 3-log 정도의 균수가 감소되었다. 이 sponge를 실제 공장에 응용하기 위하여 modeling하여 살균제의 효과를 실험하였다. 즉 15ml의 배양액과 15ml의 살균제 $(0.25\%\;BAC,\;800ppm\;NaOCl)$를 20분 처리시킨후, 200ml의 멸균증류수로 씻은다음 꼰 짜서 TSB 100m1에 넣어 $5\~37^{\circ}C$에서 배양시키면서 균수의 변화를 관찰하였다. 두 살균제 모두 비슷한 양상을 나타내어 $5^{\circ}C$와 $15^{\circ}C의 경우는 1일 배양에 1-log정도 증가한다음 지속적으로 증식하였고 나머지의 경우도 온도가 높을수록 증식이 활발하였고 배양 $1\~3$일만에 $10^{9}CFU/ml$ 정도로 증식되었다.

• 한국연초학회지
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• 제1권1호
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• pp.1-8
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• 1979

담배 (Va 115) 細胞의 液 培養에서 담배細胞의 多量生産을 할 수 있는 Tank 培養에 關한 基礎調査로 培地造成의 果를 調査하였으며 細胞增殖率에 큰 影響을 미쳤던 2,4-D와 無機燐酸의 果에 關하여 調査하였다. 1. 培地造成에서 細胞增殖率에 많은 影響을 미쳤던 要素는 무糖, 無機燐酸의 濃度,窒素源의 形態 및 植物홀몬,特히 2, 4-D의 有無였다. 2. 무糖의 最適濃度는 3%였으며 3%以上의 濃度에서는 多少 細胞增殖率이 좋은 듯 하였으나 그 差異는 크지 않아 3% 程度로 足하였다. 無機燐酸濃度는 LS 培地內의 無機燐酸의 約 2.5 培인 0.30mg/ml 일 때 細胞增殖率이 가장 좋았다. 3. 液 培地의 窒素源은 암모니아態窒素와 硝酸態窒素가 1 : 2 일 때가 가장 좋았고 窒素源이 암모니아태 만으로 使用하였을 때 細胞增殖率이 가장 낮았으며 硝酸態만 使用되었을 때는 암모니아태만 쓰였을 때 보다는 좋았으나 암모니아태와 硝酸態의 比가 1 : 2 일 때 보다는 떨어졌다. 4. 液 培地에 2,4-D 添加와 無機燐酸濃度를 높이면 細胞增殖率이 增加되는 機作을 調査하기 爲하여 呼吸率과 14C - glucose 吸收利用을 調査하였다. 細胞의 吸收率은 2, 4-D를 添加하면 增加되며 14C-glucose의 吸收는 培地內에 2, 4-D가 包含되거나 (0.2 ppm) 燐酸濃度가 높아지면(對照의 2.5培) 더욱 많았고, 吸收된 14C-glucose는 糖 상태보다 다른 形態,特히 amino 酸이나 有機酸으로 많이 变하였다.

• KSBB Journal
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• 제20권4호
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• pp.285-290
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• 2005

Sanguinarine은 천연 항균성 물질로 의약품, 생활용품 그리고 화장품 등 그 이용은 다양하나 가격이 비싸고 수율이 따르지 못하는 점을 식물세포배양을 통하여 해결할 수 있을 것으로 기대된다. Sanguinarine의 생산을 극대화하기 위하여 전통적인 방법인 환경적 요인을 고려한 cell selection방법과 유전적 접근인 protein의 변화를 동시에 관찰하였다. Yeast extract를 elicitor로 이용하였을 경우에 control에서는 관찰 할 수 없었던 sanguinarine에 해당하는 오렌지색의 형광을 볼 수 있었으며, 실제 metabolite의 분석에서도 sanguinarine의 증가를 확인 할 수 있었다. 세포 내부에서는 sanguinarine이 약 8배의 증가를 보였으며 배지에서는 약 5배의 증가를 보였다. Protein 역시 2-D electrophoresis로 확인한 결과 intensity가 $5\%,\;88\%,\;6.4\%$의 증가, 일정, 감소를 보인 spot들이 elicitor 처리 후 세포에서는 $34\%,\;39.4\%\;26.5\%$로 intensity가 증가된 spot들이 더많이 검출되었다. 본 연구에서는 sanguinarine을 yeast extract를 이용해서 생산량을 증가시키고 sanguinarine의 생산과 관련된 protein의 변화에 대해서 알아보고자 하였다. 본 예와 같은 실험 연구방법이 식물이차대사산물 생산성에 관련된 protein군을 규명하는데 초석이 될 수 있을 것으로 기대된다.

• Journal of Korean Neurosurgical Society
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• 제59권5호
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• pp.437-441
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• 2016

Objective : Recently, regenerative therapies have been used in clinical trials (heart, cartilage, skeletal). We don't make use of these treatments to spinal cord injury (SCI) patients yet, but regenerative therapies are rising interest in recent study about SCI. Neural precursor/stem cell (NPSC) proliferation is a significant event in functional recovery of the central nervous system (CNS). However, brain NPSCs and spinal cord NPSCs (SC-NPSCs) have many differences including gene expression and proliferation. The purpose of this study was to investigate the influence of neural growth factor (NGF) on the proliferation of SC-NPSCs. Methods : NPSCs ($2{\times}10^4$) were suspended in $100{\mu}L$ of neurobasal medium containing NGF-7S (Sigma-Aldrich) and cultured in a 96-well plate for 12 days. NPSC proliferation was analyzed five times for either concentration of NGF (0.02 and 2 ng/mL). Sixteen rats after SCI were randomly allocated into two groups. In group 1 (SCI-vehicle group, n=8), animals received 1.0 mL of the saline vehicle solution. In group 2 (SCI-NGF group, n=8), the animals received single doses of NGF (Sigma-Aldrich). A dose of 0.02 ng/mL of NGF or normal saline as a vehicle control was intra-thecally injected daily at 24 hour intervals for 7 days. For Immunohistochemistry analysis, rats were sacrificed after one week and the spinal cords were obtained. Results : The elevation of cell proliferation with 0.02 ng/mL NGF was significant (p<0.05) but was not significant for 2 ng/mL NGF. The optical density was increased in the NGF 0.02 ng/mL group compared to the control group and NGF 2 ng/mL groups. The density of nestin in the SCI-NGF group was significantly increased over the SCI-vehicle group (p<0.05). High power microscopy revealed that the density of nestin in the SCI-NGF group was significantly increased over the SCI-vehicle group. Conclusion : SC-NPSC proliferation is an important pathway in the functional recovery of SCI. NGF enhances SC-NPSC proliferation in vitro and in vivo. NGF may be a useful option for treatment of SCI patients pending further studies to verify the clinical applicability.