Caballeronia sordidicola 균주 PAMC 26577은 다산 기지 근처에서 채집된 지의류인 Cladonia 종에서 분리되었다. Illumina 방식으로 분석한 균주 PAMC 26577의 초안 유전체 서열은 182개의 콘티그로 이루어졌으며, N50값은 159,226 염기쌍 길이에 해당하였다. 초안 유전체로 총 8,334,211 염기쌍을 확인하였으며, 59.4% G+C 함량을 나타냈다. 유전체는 단백질을 코드하지 않는 8개의 rRNA 유전자와 51개의 tRNA 유전자를 포함하였다. 8,065개의 단백질 유전자는 기본 대사 과정뿐 아니라 부탄올/부티르산 생합성, 폴리하이드록시부티르산 대사, serine cycle methylotrophy 및 글라이코겐 대사 유전자들을 가지고 있었다. 2백개 이상의 막 전달 단백질은, 인산화 전달 시스템과 TRAP 전달시스템이 부재하였다. PAMC 26577은 CRISPR 관련 서열 및 단백질이 없었으며, 파아지 유전자의 감염흔적으로 인한 11개의 파아지 관련 유전자를 찾아낼 수 있었다.
We investigated the transcriptional profiles of Japanese indigenous grape cultivar 'Koshu' (Vitis vinifera) leaf and berry skin during ripening. In leaf, 64 genes were abundantly transcribed at the end of $v{\acute{e}}raison$ (14 weeks post-flowering), whereas the expression of 61 genes was upregulated at the end of ripening (20 weeks post-flowering). In berry skin, 67 genes were abundantly transcribed at the end of $v{\acute{e}}raison$, whereas the expression of 86 genes was upregulated at the end of ripening. Gene expression associated with biological processes was activated in both tissues at the end of ripening. The expression of genes associated with photosynthesis, sugar synthesis, anthocyanin synthesis, cinnamic acid synthesis, and amino acid metabolism was observed in leaf and berry skin during ripening, together with the accumulation of sugars, anthocyanins, cinnamic acids, and amino acids. Transcripts of AUX/IAA family proteins that repress the activities of auxin-induced proteins were expressed in berry skin at the end of $v{\acute{e}}raison$. Transcripts of genes related to the ubiquitin-proteasome system that degrades AUX/IAA family proteins were abundantly expressed in berry skin at the end of ripening, suggesting that the expansion of skin cells at $v{\acute{e}}raison$ is suppressed by AUX/IAA family proteins, and that the ubiquitin-proteasome system induces the expansion of skin cells during ripening by degrading AUX/IAA family proteins. These transcriptional profiles, which provide new information on the characteristics of 'Koshu' grapevine during ripening, may explain the unique characteristics of 'Koshu' grape in comparison with those of European grapes used for winemaking, and may contribute to the improvement of 'Koshu' grape quality.
Phosphate-solubilizing bacteria (PSB) have the ability to dissolve insoluble phosphate and enhance soil fertility. However, the growth and mineral phosphate solubilization of PSB could be affected by exogenous soluble phosphate and the mechanism has not been fully understood. In the present study, the growth and mineral phosphate-solubilizing characteristics of PSB strain Burkholderia multivorans WS-FJ9 were investigated at six levels of exogenous soluble phosphate (0, 0.5, 1, 5, 10, and 20 mM). The WS-FJ9 strain showed better growth at high levels of soluble phosphate. The phosphate-solubilizing activity of WS-FJ9 was reduced as the soluble phosphate concentration increased, as well as the production of pyruvic acid. Transcriptome profiling of WS-FJ9 at three levels of exogenous soluble phosphate (0, 5, and 20 mM) identified 446 differentially expressed genes, among which 44 genes were continuously up-regulated when soluble phosphate concentration was increased and 81 genes were continuously down-regulated. Some genes related to cell growth were continuously up-regulated, which would account for the better growth of WS-FJ9 at high levels of soluble phosphate. Genes involved in glucose metabolism, including glycerate kinase, 2-oxoglutarate dehydrogenase, and sugar ABC-type transporter, were continuously down-regulated, which indicates that metabolic channeling of glucose towards the phosphorylative pathway was negatively regulated by soluble phosphate. These findings represent an important first step in understanding the molecular mechanisms of soluble phosphate effects on the growth and mineral phosphate solubilization of PSB.
Sugar beet (Beta vulgaris L.) is known as a key product for agriculture in several countries across the world. Beet soil-borne virus (BSBV) triggers substantial economic damages to sugar beet by reducing the quantity of the yield and quality of the beet sugars. We conducted the present study to report the complete genome sequences of two BSBV isolates in Turkey for the first time. The genome organization was identical to those previously established BSBV isolates. The tripartite genome of BSBV-TR1 and -TR3 comprised a 5,835-nucleotide (nt) RNA1, a 3,454-nt RNA2, and a 3,005-nt RNA3 segment. According to sequence identity analyses, Turkish isolates were most closely related to the BSBV isolate reported from Iran (97.83-98.77% nt identity). The BSBV isolates worldwide (n = 9) were phylogenetically classified into five (RNA-coat protein read through gene [CPRT], TGB1, and TGB2 segments), four (RNA-rep), or three (TGB3) lineages. In genetic analysis, the TGB3 revealed more genetic variability (Pi = 0.034) compared with other regions. Population selection analysis revealed that most of the codons were generally under negative selection or neutral evolution in the BSBV isolates studied. However, positive selection was detected at codon 135 in the TGB1, which could be an adaptation in order to facilitate the movement and overcome the host plant resistance genes. We expect that the information on genome properties and genetic variability of BSBV, particularly in TGB3, TGB1, and CPRT genes, assist in developing effective control measures in order to prevent severe losses and make amendments in management strategies.
Magnaporthee grisea causes the devastating blast disease of rice. Entensive research has been conducted on infection mechanisms, particularly on appressorium formation and penetration, of this fungus during the last decade. However, the role(s) of cell-wall-degrading enzymes (CWDEs) on pathogenesis is not clearly demonstrated at molecular level. Many CWDES in plant pathogenic fungi including M. grisea are redundant; that is, there are multiple genes encoding enzymes with a similar or overlapping spectrum of activities. It is laborious to isolate all of the genes encoding related enzymes and to construct mutants lacking all 9f them. Thus, we considered alternative strategies to address the role of CWDEs in pathogenesis. Since expression of CWDE genes Is repressed by a simple sugar, as the first step, we cloned a Snfl (sucrose non-fermenting) gene (MgSnf1) from M. grisea. The predicted amino acid sequence showed a high identity with other Snf1 genes from various fungi. To elucidate molecular function of MgSnf1, a transformant lacking MgSnf1 was created by targeted gene replacement. En glucose, sucrose, and xylan the MgSnf1 mutant grew normally but in pectin and complex media, it grew slower than wild type. Expression of various CWDEs in MgSnf1 mutant was investigated and found that expression of some CWDEs is repressed. However, no significant difference was observed in conidial germination, appressorium formation, and pathogenicity in MgSnf1 mutant. However, MgSnf1 functionally complemented a yeast MgSnf1 mutant. These results suggest that MgSnf1 is involved in regulation of CWDEs and MgSnf1 is dispensable in pathogenicity of M. grisea.
A xylanolytic and cellulolytic anaerobic bacterium strain CtC72 was isolated from cattle rumen liquor. Phylogenetic analysis of 16S rRNA gene sequences revealed that strain CtC72 shared only 97.78% homology with its nearest phylogenetic affiliate Actinomyces ruminicola, showing its novelty. The strain could grow on medium containing xylan, carboxymethyl cellulose and avicel producing $CO_2$, acetate, and ethanol as major fermentation products. The whole genome analysis of the strain CtC72 exhibited a broad range of carbohydrate-active enzymes required for the breakdown and utilization of lignocellulosic biomass. Genes related to the production of ethanol and stress tolerance were also detected. Further there were several unique genes in CtC72 for chitin degradation, pectin utilization, sugar utilization, and stress response in comparison with Actinomyces ruminicola. The results show that the strain CtC72, a putative novel bacterium can be used for lignocellulosic biomass based biotechnological applications.
Choi, Bongsoo;Hyeon, Do Young;Lee, Juhun;Long, Terri A.;Hwang, Daehee;Hwang, Inhwan
Molecules and Cells
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제45권5호
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pp.294-305
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2022
E3 ligase BRUTUS (BTS), a putative iron sensor, is expressed in both root and shoot tissues in seedlings of Arabidopsis thaliana. The role of BTS in root tissues has been well established. However, its role in shoot tissues has been scarcely studied. Comparative transcriptome analysis with shoot and root tissues revealed that BTS is involved in regulating energy metabolism by modulating expression of mitochondrial and chloroplast genes in shoot tissues. Moreover, in shoot tissues of bts-1 plants, levels of ADP and ATP and the ratio of ADP/ATP were greatly increased with a concomitant decrease in levels of soluble sugar and starch. The decreased starch level in bts-1 shoot tissues was restored to the level of shoot tissues of wild-type plants upon vanadate treatment. Through this study, we expand the role of BTS to regulation of energy metabolism in the shoot in addition to its role of iron deficiency response in roots.
An appropriate amount of nitrogen fertilizer input during rice cultivation is essential for rice growth, quality control, and reduction of greenhouse gases in paddy fields. Therefore, it is necessary to develop a technology that can check whether an appropriate amount of fertilizer is applied in paddy fields. In this study, we tried to derive a method for diagnosing nitrogen fertilization level using spectroscopic diagnosis, physiological analysis, and molecular indicator genes. Nitrogen fertilization treatment was performed in a greenhouse by dividing into five treatment conditions: no fertilization (N0), low fertilization (N0.5), standard fertilization (N1.0), excessive fertilization (N1.5), and double fertilization (N2.0), respectively. Growth characteristics analysis was investigated by nitrogen fertilization conditions and growth stages, and the height of the canopy was analyzed using a laser scanner. Physiological and spectroscopic analyses were performed by analyzing chlorophyll and sugar contents and measuring SPAD and leaf spectrometer on rice leaves. In addition, real-time PCR experiment was performed to check the relative expression levels of several known nitrogen metabolism related genes. These results suggest that spectroscopic techniques can be helpful in diagnosing the level of nitrogen fertilization in rice paddy fields.
본 연구에서는 기후변화로 인한 온도상승에 따른 과실 착색 불량 등의 문제를 해결하는데 필요한 기초자료를 제공하고자 고온에 의해 과피에서 발현되는 유전자들의 발현 양상 특성을 분석하였다. '하례조생'과 '부지화' 감귤 과실을 숙기 별로 수확하여 온도 조건(25, 30, $35^{\circ}C$)을 처리하고 당대사, 과피 착색, 세포벽 연화에 관련된 유전자들의 발현을 확인하였다. 유전자들은 '하례조생'과 '부지화'에서 각각 다른 양상으로 발현하였는데, beta-amylase(BMY), phenylalanine ammonia-lyase(PAL), chalcone synthase(CHS), flavanone 3-hydroxylase(F3H) 등의 유전자 발현은 대체적으로 유도되었고, polygalacturonase(PG) 유전자는 발현이 감소되는 경향이었다. '하례조생'은 과피 착색과 관련된 유전자인 CHS와 F3H는 성숙이 진행된 2-3단계에서 $25^{\circ}C$에 비해 고온에서 유전자 발현이 감소하였으며, PAL과 stilbene synthase(STS) 유전자는 $25^{\circ}C$에 비해 $30-35^{\circ}C$ 처리구에서 유전자 발현이 증가하였다. 2-3단계의 '부지화'에서는 BMY 유전자가 $25^{\circ}C$에 비해 $30-35^{\circ}C$에서 유전자 발현이 증가하였으며, F3H와 STS 유전자의 발현은 과실 성숙단계에서 모두 감소하는 경향이었고 온도의 영향은 크지 않았다. 성숙 1, 2단계에서 유전자의 발현 양상은 두 품종 모두에서 대체로 비슷한 경향이었는데, 3단계에서 '부지화' 과실의 유전자 발현은 '하례조생'과는 다르게 감소하는 경향이었다. 성숙이 진행되는 감귤류인 '하례조생'에서 '부지화'에 비해 7종류의 유전자의 발현이 많았으며, 고온에 따른 반응의 차이도 크게 나타났다. 본 연구에서 도출한 결과를 바탕으로 과실의 전사체를 분석함으로써 고온에 의한 감귤 과실의 성숙불량 문제를 이해하는 주요한 정보를 획득할 수 있을 것이다
UK-58,852의 생합성에 관여하는 유전자를 분리하기 위해 Actinomadura roseorufa의 genomic DNA와 E. coli-Streptomyces shuttle cosmid vector인 pOJ446이 genomic library를 만들었다. Genomic library는 dehydratase PCR product와 eryA 유전자를 probe로 하여 sugar 생합성 유전자와 polyketide typel 유전자가 집단으로 존재하는 cosmid pHD54를 분리하였고, 이를 제한 효소인 BamHI, SmaI와 Sonicater를 이용해서 subcloning 하였다. 이들의 염기서열을 부분 분석한 결과, polyketide 생합성에 관여하는 ketoacyl synthase, methylmalonyl acyltransferase, ketoreductase, enolreductase 그리고 PKS loading domain 등 polyketide synthase type I 임을 보여주고 있고, BLAST 분석된 결과를 보면 polyketide synthase 유전자는 rifamycin 생합성 유전자와 유사성이 높다. 그리고 sugar 생합성에 관여하는 유전자로는 oxidoreductase, dTDP-D-glucose 4,6 dehydratase, dTDP-D-glucose synthase 그리고 dTDP-4-keto-6-deoxy-D-glycose 3,5-epimerase으로 구성된 gene cluster를 확인하였다. 그리고 염기서열 분석된 유전자중 dTDP-D-glucose synthase를 발현하여 유전자의 기능을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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