The growth promotion of a Taxus brevifolia cell suspension culture was investigated using conditioning factors. The conditioning factors produced and secreted from cultured cells usually stimulate cell division and the production of secondary metabolites. Therefore, the effective incubation time for the optimal secretion of conditioning factors was firstly determined for the promotion of cell growth. Conditioned media obtained by cultivating for 2 and 5 days showed the promotion of initial cell growth during the early cell growth period. However, the positive effect of the conditioning factors on the initial cell growth did not continue because of the depletion of the medium nutrients. Accordingly, the addition of a carbon source to the conditioned medium prolonged the positive effect on the cell growth. The addition of sucrose to the conditioned medium resulted in the maximum cell density being reached 4 days earlier compared to the control group and an increased substrate yield.
Human skin equivalents, also designated as cultured skin substitute (Boyce and Warden, 2002) or organotypic co-cultures (Maas-Szabowski et al., 1999, 2000, 2003), are three-dimensional systems that are engineered by seeding fibroblasts into a three-dimensional dermal matrix. Such a dermal equivalent is then subsequently seeded with human keratinocytes. After cell attachment, the culture is kept first under submerged condition to allow keratinocyte proliferation. Thereafter, the culture is lifted the air-liquid interface (A/L) to expose the epidermal compartment to the air, and to further induce keratinocyte differentiation. During the air-exposure, nutrients from the medium will diffuse through the underlying dermal substrate towards the epidermal compartment and support keratinocyte proliferation and differentiation. Under these conditions, a HSE is formed that shows high similarity with the native tissue from which it was derived (Figure 1) (Bell et at., 1981; Boyce et al., 1988; Ponec et al., 1997;El Ghalbzouri et al.., 2002).
Twelve Microorganisms capable of utilizing diaminododecane were isolated from the soil by enrichment culture technique. Seven strains of these were identified as Corynebacterium. The isolated strains were tested for the ability to utilize as carbon source, 10 different kind of alkane derivatives containing CN, $NH_2$, Cl, and SH groups. Laurylcyanide, dicyanooetane, chlorodecane, and dichlorodecane were not utilized by any of the isolated strains; putrescine dihydrochloride, cadaverine dihydrochloride, diaminododecane, and n-dodecane were utilized by all of the isolated strains; and all of the isolated strains except DAD 2-3 could utilize dodecylmercaptan. The alkane derivatives that did not serve as ,growth substrates were tested further in oxidation tests using resting cell preparation. Alkane derivatives that are being oxidized by all of the isolated strains are laurylcyanide and dichlorodecane. Dicyanooctane was also oxidized by all of the isolated strains except DAD 30L, chlorodecane was the only oxidized by the three isolated strains. The most remarkable substrate that is being oxidized is dichlorodecane containing CN groups diterminally. Evidence obtained with thin layer chromatography of ,ethyl acetate extracts of culture broth of isolated strains grown in some alkane derivatives shows that these alkane derivatives are degraded.
콜레스테롤 에스테라아제를 생산하는 미생물 strain CES506 균주를 토양으로부터 분리하여 Aeromonas속의 한 세균으로 동정하였다. 이 균주는 배양액 1ml당 0.023 단위의 콜레스테롤 에스테라아제를 생산하였다. 이 균주가 생산하는 본 효소를 균주 배양액으로부터 약 370배, 24%의 수율로 균질한 상태의 단백질로 정제하였다. 본 효소의 분자량은 SDS-PAGE로 산출한 결과 64,000으로 계산되었다. 본 효소는 cholesteryl-palmitate에 대해 높은 기질 특이성을 나타내었으며 cholesterylpalmitate의 가수분해에 대한 Km값은 0.15mM이었다.
펄라이트자루를 사용한 수경재배에서 급액관리방식의 일종인 배액전극제어법에 필요한 배액 이동매개체를 선발하기 위해서 시판되고 있는 친수성 매트 중에서 극세사, 융, 면 등의 배양액 흡수속도를 분석했다. 또한, 선택된 매트가 배액전극제어법을 적용하였을 때에도 높은 흡수속도를 갖는지 알아보기 위해 연구를 수행하였다. 실험결과 면이 가장 수분보유력이 뛰어났으며, 배액전극제어법을 적용했을 때에도 가장 적합한 것으로 나타났다.
본 연구에서는 Slow Release Substrate(SRS)로 사용되는 TBOS의 분해특성과 TBOS 분해생성물인 acetate와 butyrate를 적용한 탈염소화 효율을 파악하고자 하였다. 회분식 실험은 GC/FID를 이용하여 TCE 및 cis-dichloroethene(cis-DCE), 1-butanol, TBOS를 분석하였으며, acetate와 butylate는 HPLC를 이용하여 분석하였다. 혐기성 가수분해 반응을 통해 1M의 TBOS는 4M의 1-butanol로 전환 및 축적되었으며, 가수분해율은 $0.186{\mu}M/day$로 나타났다. 또한, 1-butanol은 퇴적토 내 토착균주에 의해 acetate와 butyrate로 분해되었다. 이 결과 TBOS는 자연에서의 탈염소화 공정에서 SRS로 사용하기에 적합한 것으로 판단된다. Acetate와 butyrate를 전자공여체로 적용한 TCE 탈염소화 반응은 초기 TCE 농도가 낮아짐에 따라 탈염소화 효율은 높아지는 것으로 나타났다. 또한, acetate를 적용한 탈염소화 반응의 1차 반응 상수가 butyrate를 적용한 경우보다 높게 나타났다. 이는 탈염소화 반응에서 Geobacter lovleyi의 기질친화도 및 생분해성, 그리고 다양한 기질에 대한 적응도의 영향으로 판단된다. 그러나 Geobacter lovleyi의 TCE 탈염 소화 반응에 따른 cis-DCE의 축적이 발생할 경우 Geobacter lovleyi의 탈염소화 능력이 감소하는 것으로 나타났다. 결론적으로 SRS는 Geobacter lovleyi를 이용한 TCE 탈염소화 공정 향상에 도움이 될 것이며, 이에 따라 발생되는 cis-DCE는 영가철 같은 환원성 금속이나 공존 가능한 탈염소화 미생물을 이용한 처리가 함께 필요할 것으로 판단된다.
고점성을 갖는 미생물 생물 고분자에 대한 발효공정 분석 및 조절 연구의 일환으로 알카리 내성 Ba cillus sp.를 사용한 생물고분자의 발효 중 배양액의 유변학적 성질에 대한 경시변화를 조사하였으며, 균 체생육 및 생물 고분자의 생산과 유변학 특성 변화와의 상관관계를 검토하였다. 배양액의 유변학은 배양시간 경과에 따라 현저하 게 변화하여 더욱 점성이 있고, 또 의가소성이 증대 하면서 비뉴우톤 유체로서 거동하였다. 발효 중 유 통지수, 점조도지수, 항복융력 빛 겉보기 점도 등 유 변학 특성값은 균체증식에는 거의 영향을 받지 않고, biopolymer의 합성과 밀접한 상관성을 보였다. 또 유변학적 특성값의 변화는 생물고분자 농도만의 함수가 아니고 발효진행과 상관성을 보였고, 생물고 분자의 생성이나 기질 소비의 완료 직전에 최대값을 나타내었다. 따라서 이들 변화의 특성화는 발효경과 또는 완료에 대한 양호한 지표를 공급할 수 있음을 시사하였다.
농산 폐자원 중에서도 감귤 가공공정에 따라 부생되는 감귤과피를 발효 기질로서의 이용을 목적으로 분리균 Asp. niger를 사용하여 구연산 발효에 미치는 배양조건 및 영향인자를 조사하였다. 그 결과 고 체 배양에서의 최적조건 즉 감귤과피와 물을 동량 혼합하고 여기에 NH$_4$NO$_3$0.2%, MgSO$_4$7$H_2O$ 0.1%, Methanol 2.5%를 첨가하여 PH4.5로 조절한 다음포자 현탁액(1x$10^8$ spore/$m\ell$) 2%를 접종하여 균체증식 초기에 35$^{\circ}C$, 20시간 배양하고 4시간 저온 처리한 다음 구연산 생성기에서 3$0^{\circ}C$로 48시간 배양했을 때 당에 대해 80.4%의 높은 수율의 구연산을 얻었다.
Kim, Bella;Ko, Na-Young;Hwang, Seong-Soo;Im, Gi-Sun;Kim, Dong-Hoon;Park, Jin-Ki;Ryoo, Zae-Young;Oh, Keon-Bong
Reproductive and Developmental Biology
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제35권3호
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pp.301-306
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2011
Fibroblasts of large animals are easy to isolate and to maintain in vitro culture. Thus, these cells are extensively applied to donor cell for somatic cell nuclear transfer, and to substrate cells to generate induced pluripotent stem cells after transfection of requited genes to be essentially required for direct reprogramming. However, limited mitotic activity of fibroblasts to differentiate along a terminal lineage becomes restrictive for their versatile application. Recently, commercial culture medium and systems developed for primary cells are provided by manufactures. In this study, we examined whether one of the systems developed for primary fibroblasts of human are effective on porcine ear skin fibroblasts. To this end, we performed proliferation assay after five days culture in vitro of porcine fibroblasts in medium DMEM, which is generally used for fibroblasts culture, and medium M106 for human dermal fibroblasts, supplemented with various concentrations of FBS and LSGS contained mainly growth factors, respectively. Consequence was that presence of 15% FBS and 0.1 ${\times}$ concentrations of LSGS in DMEM showed most active proliferation of porcine fibroblasts.
Acridine은 fungal laccase의 기질이 아님에도 불구하고 acridine을 Pycnoporus cinnabarinus SCH-3 배양액에 첨가했을 때 acridone으로 산화되었다. P. cinnabarinus SCH-3균주는 배양 중에 다량의 laccase와 3-hydroxyanthranilic acid (3-HAA)와 cinnabarinic acid (CA)를 생성했다. 정제된 laccase와 acridine을 완충용액에서 직접 반응시켰을 때 acridine은 변화되지 않았다. 그러나 laccase의 기질인 2,2'-azino-bis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS)나 3-HAA를 laccase와 acridine 혼합액에 첨가했을 경우에는 acridine이 acridone으로 산화되었다. 특히 ABTS 첨가구는 3-HAA 첨가구보다 acridine 산화율이 2배 이상 높았다. 한편 정제된 laccase와 3-HAA를 완충액에서 반응시켰을 때 3-HAA는 CA로 전환되었다. 이와 같은 실험결과들은 P. cinnabarinus SCH-3의 laccase가 배양중에 생산된 3-HAA를 매개체로 사용하여 acridine을 acridone으로 산화하고 CA는 laccase에 의하여 3-HAA로부터 합성됨을 나타낸다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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