This study is concerned with alterations in chromosomes (numbers and morphology) when the culture of Chinese hamster cells (FAF-28 strain) was treated by steroids, testosterone and DOC. 1. In 200 cells of normal untreated cells as control population the chromosome of stemline was decided as which was contained in 158 cells ; that is , in 79 percent of the population. The average chromosome number in above 20 cells observed was calculated as 23.95 with minimum limit at 20 and maximum limit at 70. 2. Many different chromosome numbers, ranging from 19 to 352 were observed in the 200 cells treated by testosterone. The diploid number of 22 showed the peak of variation curve was counted in 71 cells (35.5%) and an average chromosome number of stemline was 22 which was counted in 74 cells (37%). While all of the chromosome number of stemline was 22 which was counted in 74 cells (37%). While all of the chromosome numbers in the 200 cells observed ranged from 20 to 181 , an average chromosome number was also found to be 30.09. 4. The chromosome component in the cultured normal FAF-28 cells with 22 diploid chromosomeswas as follows ; 9a) 2 paris were long and metacentric (LM), (b) 3 pairs were medium length and metacentric (MM), (c) 3 pairs were small and subtelocentric (SS) and (d) 3 pairs were small and metacentric (SM). 5. The twenty cells with 44 chromosomes were selected at random from each cell population treated with testosterone and DOC , so that chromosome idiogram and morphology could be studies. In the twenty cells of the testosterone treated population the average ratio of above four groups, LM ; MM;Ss:SM, was found to be 8.6 : 10.8:13.5:10.7. On the other hand, the average ratio in the same number of cells of the DOC treated one was 7.7 :11.4:12.5:12.7. 6. The five types of the altered chromosomes morphologically in the hundred cells selected at random from each cell population treated by testosterone and DOC were observed (Type I-V). The thirty-one altered chromosomes were found to be in the testosterone treated cell population and the sixteen in DOC treated.
Coenzyme Q은 긴 isoprenoid 사슬을 갖는 quinone의 유도체이다. Coenzyme Q는 진핵생명체의 미토콘드리아의 내막과 원핵생명체의 세포막에 위치하는 전자전달계에 존재하는 지용성 물질이며, 또한 항산화제로의 기능도 갖는다. Coenzyme Q는 Saccharomyces cerevisiae의 호기적 성장에 필수적이며, coq 돌연변이체는 발효가 불가능한 탄소 원에서의 성장이 불가능하다. S. cerevisiae의 $coq^7$p 효소들과 유사성을 나타내는 단백질을 암호화하는 Neurcspora crassa cDNA를 효모의 발현 벡터에 삽입하였다. N. crassa COQ7의 예상 서열은 S. cerevisiae의 효소와 58% homology를 보였다. N. crassa $coq^{-7}$ 유전자의 S. cerevisiae $coq^7$ 형질전환체는 야생형 균주와 유사한 성장률을 보였다. 형질전환 균주들은 발효가 불가능한 탄소원인 글리세롤을 유일한 탄소원으로 배양하였을 경우에도 정상적인 성장을 나타냈다. 또한 불포화지방산인 linolenic acid를 성장 배지에 첨가하여도 야생형 균주와 유사한 생존율이 관찰되었다.
Heme 합성의 중간체이며 또한 광수용체로도 작용하는 protoporphyrin IX의 세포 내 농도 및 성장 배지에 존재하는 농도가 야생형 M. xanthus DK1622 균주로부터 측정되었다. Protoporphyrin IX의 세포 내 농도는 배양 시간이 경과함에 따라 계속 증가하여, 안정기에 최고치에 이르는 것으로 나타났다 안정기에 도달한 세포 내에는 6.4 picomoles/mg of protein의 protoporphrin IX이 존재하는 것으로 밝혀졌다. Protoporphyrin IX은 대수기 중간 시기부터 세포외로 분비가 시작되어, 안정기에 도달한 세포의 배양액에서는 세포의 단백질 대비하여 3.0 picomoles/mg of protein이 존재하는 것으로 측정되었다. 영양분의 고갈에 기인하여 형성된 포자에서도 protoporphyrin IX의 농도는 6.5 picomoles/mg of protein이 존재하는 것으로 관찰되었다. Succinylacetone을 $500\muM$ 농도로 성장 배지에 첨가하였을 경우에 protoporphyrin IX의 생산은 검출이 불가능할 정도로 방해를 받았으며, 세포성장이 저해되고 세포 성장은 정상의 절반 수준인 약 100 Klett unit에서 정지하는 것으로 나타났다. 하지만 포자의 형성은 succinylacetone의 첨가에 관계없이 89-100%의 생성율을 보였음으로 정상 농도의 protoporphyrin IX가 M. xanthus의 성장을 위해서는 중요하지만, 포자 형성 과정에 필수적인 것으로 보이지는 않는다. 안정기 세포에서 나타나는 photolysis 현상도 succinylacetone의 첨가 여부에 관계없이 유사한 수준으로 관찰되었다.
식물체에서 당 조절 인자의 병 저항성 생리적 특성을 살펴보길 위하여, 원형질막에 존재하는 glucose 조절인자인 애기장대 AtPGR 유전자의 과발현 및 RNAi 형질전환체를 사용하였다[3]. AtPGR 유전자는 병원균 처리에 의하여 전사 발현양이 증가하였을 뿐만 아니라, JA와 SA 처리 시에도 AtPGR 전사 발현양이 증가함을 확인하였다. 과발현 형질전환체를 이용하여 병 저항성을 살펴본 결과, AtPGR 유전자는 병원균에 대해 저항성을 유도함을 알수 있었다. 또한 병원균 유도 증가 유전자로 알려진 PDF1.2 및 PR1 유전자 발현 양상을 qPCR을 통해 살펴본 결과, AtPGR 유전자는 PDF1.2 유전자를 SA 경로 하에서는 증가시키는 반면, JA 경로 하에서는 발현 증가량을 감소시키는 경향이 있음을 나타내었고, PR1 유전자의 발현은 JA 경로를 통해 조절할 것으로 생각되어진다. 이러한 결과를 바탕으로, AtPGR 유전자는 glucose 뿐만 아니라 병원균 반응에도 관련되어져 있음을 알 수 있다.
본 연구에서는 평면응력 파괴인성치의 거동에 관한 일련의 연구로서 위와 같 은 점을 고려하여 얇은 두께의 시험편을 이용하여 z의 변화에 대한 평면응력 파괴인성 치와 J저항곡선을 실험적으로 고찰하였으며 크랙성장을 고려한 J적분식도 검토하였다. 크랙길이는 하중제거 컴플라이언스법에 의하여 구하였고, ASTM E813의 방법으로J= .sigma.$_{f}$ .DELTA.(2a)인 크랙둔화선과 J저항곡선의 교점에서 구한 J적분값을 J$_{c}$로 정 의하였다. 또한, 재료를 변형경화재료로 가정하여 HRR응력변형율장의 특성을 이용 하여 J적분값을 구한 후 실험치와 상호 비교 검토하였다.이때 입력자료는 실험치의 그것과 동일하게 하였다. 동시에 z의 변화에 대한 T의 변화도 함께 고찰하였다.다.
한국미생물학회 2006년도 International Meeting of the Microbiological Society of Korea
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pp.105-107
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2006
Two kinds of nucleoside hydrolases (NHs) encoded by rih1 and rih2 were cloned from Corynebacterium ammoniagenes using deoD- and gsk-defective Escherichia coli. Sequence analysis revealed that NH 1 was a protein of 337 aa with a deduced molecular mass of 35,892 Da, whereas NH 2 consisted of 308 aa with a calculated molecular mass of 32,310 Da. Experiments with crude extracts of IPTG-induced E. coli CGSC 6885(pTNU23) and 6885(pTNI12) indicated that the Rihl enzyme could catalyse the hydrolysis of uridine and cytidine and showed pyrimidine-specific ribonucleoside hydrolase activity. Rih2 was able to hydrolyse both purine and pyrimidine ribonucleosides with the following order of activity-inosine>adenosine>uridine>guanosine>xanthosine>cytidine-and was classified in the non-specific NHs family. rih1 and rih2 deletion mutants displayed a decrease in cell growth on minimal medium supplemented with pyrimidine and purine/pyrimidine nucleosides, respectively, compared with the wild-type strain. Growth of each mutant was substantially complemented by introducing rih1 and rih2, respectively. Furthermore, disruption of both rih1 and rih2 led to the inability of the mutant to utilize purine and pyrimidine nucleosides as sole carbon source on minimal medium. These results indicated that rih1 and rih2 play major roles in the salvage pathways of nucleosides in this micro-organism.
Insertion sequence IS1112 is a repetitive element with a relatively high number of copies in Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo), the causal agent of bacterial blight of rice (Oryza sativa L.). Three new loci of IS1112 were identified in seven Chinese strains of Xoo using a single oligonucleotide primer J3; 5'-GCTCA GGTCAGGTGGCCTGG-3' by insertion-sequence-based polymerase chain reaction (IS-PCR). Among the three new loci of IS1112, two were located in the open-reading frame region of genes fhuA and cirA, which encode TonB-dependent receptors, and the third in ISXo2, another type of insertion sequence in Xoo genome. Three variants of IS1112 were identified in those three loci based on their sequence similarities: two were identical to IS1112a and IS1112b, reported in strain PXO86 from the Philippines, while the third was a new member of IS1112, defined as IS1112d. Inserting IS1112 in gene fhuA caused three bases, GGT, to be duplicated at the target site, but inserting it in gene cirA did not cause any duplication in the target site. The diversity of IS1112 sequence and insertion loci in Xoo genome and their potential effects are discussed.
Bacterial cell surface components are the major factors responsible for pathogenesis and bioremediation. In particular, the surface of a Gram-negative bacterium cell has a variety of components compared to that of a Gram-positive cell. In our previous study, we isolated an isogenic mutant of Bradyrhizobium japonicum, which exhibited altered cell surface characteristics, including an increased hydrophobicity. Polyacrylamide gel electrophoretic analysis of the lipopolysaccharide (LPS) in the mutant demonstrated that the O-polysaccharide part was completely absent. Meanwhile, a gel permeation chromatographic analysis of the exopolysaccharide (EPS) in the mutant demonstrated that it was unaltered. Since LPSs are known to have several anion groups that interact with various cation groups and metal ions, the mutant provided an opportunity to examine the direct role of LPS in metal binding by B. japonicum. Using atomic absorption spectrophotometry, it was clearly demonstrated that LPS was involved in metal binding. The binding capacity of the LPS mutant to various metal ions $(Cd^{2+},\;Cu^{2+},\;Pb^{2+},\;and\;Zn^{2+})$ was 50-70% lower than that of the wild-type strain. Also, through an EPS analysis and desorption experiment, it was found that EPS and centrifugal force had no effect on the metal binding. Accordingly, it would appear that LPS molecules on B. japonicum effect the properties, which precipitate more distinctly metal-rich mineral phase.
Small rectangular explosion chamber of its size 25cmX25cmX32cm with a circular bursting diaphram at the top was used to study the mechanism of gas explosion to fire transition phenomena, the process of ignition of solid combustibles during a gas explosion. To visulize the explosion to fire transition phenomena, transparent acryl window and high speed camera system were used. The test piece of solid combustible in this experiments was a 5cm$\times$5cm square sheet of newspaper which was placed in the explosion chamber filled with a LPG-air mixture. The mixture was ignited by an electric spark at the center of the chamber. Explosion to fire transition phenomena and the behavior of out flow and in flow of gas through the opening yielded by bursting the diaphram was visualized with shlieren system and without shlieren system. Diameter of a bursting dlaphram at the top of the explosion chamber was varied 5cm, 10cm, and 15cm, and the position of test piece were varied with 6 point. Explosion pressure was measured with strain type pressure transducer, and the weight difference of the test piece before and after each experimental run was measured. By comparing the weight difference of solid combustibles before and after the experiment and the behavior of out flow and inflow of gas after explosion, it was found that the possibility of ignition was depends on the LPG-air mixture concentration and the exposure period of test piece to the burnt gas. Test result of this experiments it was found that the main factor of this phenomena are that heat transfer to the test piece, and the pyrolysis reaction of test piece. Based on the results, the mechanism of the explosion to fire transition phenomena were inferred ; gas explosion- heat transfer to solid combustibiles ; pyrolysis reaction of solid combutibles : air inflow ; mixing of the pyroly gas with air ignition.
A strain producing a high amount of chitinase was isolated from soil, identified as Pseudomonas sp., and tentatively named Pseudomonas sp. YHS-A2. An extracellular chitinase of Pseudomonas sp. YHS-A2 was purified according to the procedure of ammonium sulfate saturation, affinity adsorption, Sephadex G-100 gel filtration and Phenyl-sepharose CL-4B hydrophobic interaction column chromatography. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be 55 kDa on SDS-PAGE was confirmed by active staining. Optimal pH and temperature of the enzyme are pH 7.0 and $50^{\circ}C$, respectively, and the enzyme is stable between pH 5.0 and 8.0 and below $50^{\circ}C$. The main products of colloidal chitin by the chitinase were N-acetyl-D-glucosamine and N,N'-diacetylchitobiose both of which were detected by HPLC analysis. The enzyme is supposed to be a random-type endochitinase which can degrade any position of ${\beta}$-l,4-linkages of chitin and chitooligosaccharides. The chitinase inhibited the growth of some phytopathogenic fungi, Fusarium oxysporum, Botrytis cineria, and Mucor rouxii and these antifungal effects were thought to be due to the characteristics of endochitinase.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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