본 연구는 튀김식품의 종류에 따른 대두유의 가열산화변화를 여러 이화학적 품질지표들을 측정함으로써 장시간 가열처리에 따른 대두유의 산화안정성을 살펴보았다. 튀김유로 대두유를 사용하여 $180^{\circ}C$에서 72시간 동안 프렌치프라이, 치킨너겟, 도넛을 튀겼다. 튀김유의 가열산화 변화를 알아보기 위해 유리지방산가, 과산화물가, 총극성화합물 함량, 공액이중산가를 측정하였고, 유전항수, 굴절률, 요오드가, 발연점, 지방산 조성 중 불포화지방산과 포화지방산의 비(U/S)를 분석하였다. 튀김 시간에 비례하여 유리지방산가, 총극성화합물 함량, 공액이중산가, 유전항수, 굴절률은 증가하고, 요오드가, 발연점, U/S 비는 감소하였다. 모든 튀김유 시료에서 법적 규제치인 산가는 2.0% 이하와 총극성화합물 함량 25% 이하를 나타냈다. 그러나 과산화물가는 튀김 시간과 무관하게 증가와 감소를 반복하였다. 치킨너겟 튀김유가 프렌치프라이나 도넛 튀김유에 비해 가열산화에 더 안정한 것으로 나타나, 튀김식품의 종류가 튀김유 변질 속도에 영향을 주는 것을 알 수 있었다. 튀김유의 품질을 나타내는 여러 이화학적 지표 중 굴절률이나 유전항수는 간편법으로 산업 현장에서 유용하게 이용될 수 있을 것이다.
토양으로부터 alkaline protease 생성능이 강한 Streptomyces griseus HC-1141을 분리하였으며, 정제 효소의 최적작용 pH 와 온도는 8.0, 60'C 였으며, pH 7.0-9.0의 범위와 $60^{\circ}C$이하에서 안정하였다. 금속 이온중 $Mn^{2+}$, $Ca^{2+}$, 등에 의해 활성이 증대되었으나 $Hg^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Zn^{2+}$, $Ba^{2+}$, $Fe^{2+}$ 등에 의해 효소 활성이 저해되었고, 효소활성 저해제 중 Epsilon-aminocaproic acid, 2,4-dinitrophenol, iodine 등에 의해서는 현전한 효소활성저해가 관찰되지 않았으나 ethylenediaminetetraacetic acid와 p-chloromercuribenzoic acid에 의해 활성저해가 관찰되어 효소분자 중 SH기가 활성에 어느정도 관여하는 metallo enzyme으로 추정되었다. 정제효소의 $K_m$, $V_{max}$ 및 활성화에너지는 $2.229{\times}10^{-4}$M, $46.08 {\mu}$g/min, 3.643 kcal/mol 이었으며 hemoglobin과 egg albumin보다 casein을 더 잘 가수분해하였다. 또한 여러 가지 detergent에 대하여 강한 저항성을 가지고 있었다.
토양으로부터 tyrosinase 저해제를 생산하는 방선균 F-97을 분리하여, 이 균이 생산하는 tyrosinase 저해제를 정제하였다. 먼저 배양액을 원심분리하고 이 여액을 pH 4.0으로 조절한 후 IRC-120($NH_4^+$ type column chromatography, Silica gel column chromatography, C18 column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography를 사용하여 정제하였다. 정제도 확인은 ODS HPLC를 이용하여 확인하였으며, 최종 정제 수율은 5.24%이었다. 물리 화학적 특성으로 tyrosinase 저해제는 water, methanol, ethanol 등에는 잘 녹았으나, acetone, butanol, ethylacetate, chloroform 등에는 녹지 않는 수용성 물질이었다. 물을 용매로 UV 흡광도를 측정한 결과 194nm에서 최대 흡광도를 나타내었다. 본 tyrosinase 저해제는 Iodine, Ninhydrin, Millon, Sakaguchi, Xanthoproteic, Emerson 시험에서는 음성이었고, Molish, Benedict, conc. $H_2SO_4$, $KMnO_4$ 시험에서는 양성이었다. 저해제의 열 안정성은 $100^{\circ}C$ 50분까지 안정하였고, pH $4{\sim}9$에서 안정하였다. Tyrosinase 저해제의 mushroom tyrosinase에 대한 $IC_{50}$ 값은 $19.2{\mu}g/ml$이었고, Streptomyces bikiniensis NRRL B-1049에 대한 저해활성은 $1,000{\mu}g/ml$ 일 때 27mm이었다. 그리고 본 저해제의 저해 양상은 경쟁적 저해로 확인되었다.
포유동물조직의 세포내에 존재하는 lysosomal cysteine계 cathepsin B 효소는 암 발병과 전이, 류머티스 관절염, 염증 및 노인성치매 등의 여러 질병에 관여하고 있다. 이 cathepsin B를 저해하는 저해물질이 Streptomyces luteogriseus KT-10에 의해 생산되어 분리되었다. S. luteogriseus KT-10이 생산하는 cathepsin B 저해물질은 열에 안정하며 산, 알칼리에도 안정한 물질로 구성되어 있다. Cathepsin B 저해물질은 DEAE-Sephadex A-25, Sephadex G-15, silica gel, Sephadex LH-20의 column chromatography 과정을 거친 후 분취용 HPLC를 이용 분취한 후 백색분말의 cathepsin B 저해물질을 정제하였다. 이 정제한 저해물질은 UV 상의 전 범위에서 특이한 검출부위를 확인할 수 없었으며, $H_2$O, methanol, ethanol, n-butanol에는 녹지만 비극성인 chloroform, n-hexane, benzene 등에는 불용성이었다. 또한 ninhydrine, $H_2$$SO_4$, iodine에 양성 반응이지만 Ehrlichs, Pauly, Sakaguchi, phthalic acid, DNS, aniline 등의 단백반응과 당 반응에는 음성 반응으로 나타났다. IR 기기에서는 OH 기와 CH 기의 peak를 확인하였으며 $^1$H NMR 기기로 OH peak와 NH peak 또한 확인할 수 있었다. $^{13}$ C NMR spectrum은 4개의 탄소 peak를 가진 물질로 확인된 분자량이 207 dalton인 저해물질이다. 원소 분석기를 이용한 저해물질 분석 결과 분자식이 $C_4$$H_{11}$$O_4$$N_{6}$로 나타났다. 이 cathepsin B 저해물질의 저해양식은 competitive 저해로 작용함을 확인할 수 있었다.
Erythritol 생합성에 중요한 효소인 erythritol 4-phosphate dehydrogenase를 Penicillium sp. KJ81로부터 분리 정제하여 효소의 특성을 조사한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. Erythritol 4-phosphate dehydrogenase의 최적 생산 조건은 30% sucrose, 0.5% yeast extract, 0.5% $(NH_4)_2SO_4$, 0.1% $KH_2PO_4$ 그리고 0.05% $MgCl_2$ (pH 7.0) 배지에서 1 vvm aeration, 교반속도 200 rpm, $37^{\circ}C$로 Penicillium sp. KJ81을 배양한 결과 8일 배양 시 최대의 생산량을 보였다. Penicillium sp. KJ81주의 균체 추출액으로부터 ultrafiltration, 조제용 disc gel electrophoresis를 이용하여 erythritol 4-phosphate dehydrogenase를 분리 정제하였다. 최종 수율은 33%이었으며 정제배수는 39.5였다. 정제된 효소의 pI값은 4.6으로, erythrose 4-phosphate에 특이적으로 반응하였으며, Km값은 1.07mM이었다. Native-PAGE에서 single band를 보인 효소의 분자량은 약 1,500 kDa이었다. 효소활성의 최적 pH와 온도는 pH 7.0, $30^{\circ}C$였으며, 효소는 pH 4.0~9.0, 그리고 $30^{\circ}C$까지 안정하였다. 다양한 금속이온 중 $Cu^{2+}$, $Zn^{2+}$에 의하여 효소의 활성이 저해되었다. 다양한 아미노산 반응 잔기 변형시약 중 iodine과 NBS에 의해 효소의 활성이 저해되는 것을 확인하였다.
Rhizopus oryzae CJ-2114가 생성하는 polygalactur-onase의 최대활성을 위한 pH는 4.0, 최적온도는 4$0^{\circ}C$ 였으며, 효소활성화 에너지는 2.049㎉/㏖이었다. 정제효소의 Km값과 $V_{max}$ 값은 54.05mM, 13.9m mole/min이었고, pectin보다 polygalacturonic acid를 특이적으로 분해하였다. 이 효소는 약산성의 pH에서 안정성을 보였으며, 온도에 의한 안정성은 4$0^{\circ}C$였으며, 5$0^{\circ}C$이상에서는 급격한 효소단백질의 불활성화가 진행되었다. 금속이온중 $Na^{+}$ 이온에 의해 활성이 유지되며 C $u^{2+}$, P $b^{2+}$, $Mn^{2+}$, $Zn^{2+}$이온 등은 효소활성을 저해하였다. 효소저해제 중 maleic anhydride와 iodine등에 의해 효소활성이 저해되어 효소분자중의 histidine의 imidazole기 와 cystein의 SH기가 효소활성에 관여함이 입증되었다. 이 효소의 기질분해양상을 여지 크로마토그라피로 확인한 결과 반응초기에는 monomer, dimer, oligomer 등이 생성되었고, 시간이 경과할수록 oligomer는 사라지고 monomer, dimer만이 생성되는 것으로 보아 endo 형인 것으로 판단되었으며, 효소의 과즙청징도 측정에서는 약 18.2$\times$$10^3$unit에서 거의 청징화 되었다.
The production cost of biodiesel from microalgae is still not competitive, compared with that of petroleum fuels. The genetic improvement of microalgal strains to increase triacylglycerol (TAG) accumulation is one way to reduce production costs. One of the most promising approaches is the isolation of starch-deficient mutants, which have been reported to successfully increase TAG yields. To date, such a stable mutant is not available in an oleaginous marine microalga, despite several advantages of using marine species for biodiesel production. Algae in the genus Dunaliella are known to tolerate high salt concentration and other environmental stresses. In addition, the cultivation processes for large-scale outdoor commercialization have been well established for this genus. In this study, Dunaliella tertiolecta was used to screen for starch-deficient mutants, using an iodine vapor-staining method. Four out of 20,016 UV-mutagenized strains showed a substantial reduction of starch content. A significantly higher TAG content, up to 3-fold of the wild-type level, was observed in three of the mutants upon induction by nitrogen depletion. The carotenoid production and growth characteristics of these mutants, under both normal and oxidative stress conditions, were not compromised, suggesting that these processes are not necessarily affected by starch deficiency. The results from this work open up new possibilities for exploring Dunaliella for biodiesel production.
In this study, an Ag-polyaniline-silica (Ag-PANI-silica) nanoparticle was evaluated as a radioisotope carrier. An Ag-PANI-silica nanoparticle was incubated in the $^{125}I$ solution for a duration of 24 hr to test its radioisotope absorptivity. During the incubation, radioactivity of the nanoparticle was measured at 3, 6, 12, and 24 hr. After a 24 hr incubation, $^{125}I$-Ag-PANI-silica nanoparticle was incubated in a fresh saline for a duration of 48 hr to check its stability. Additionally, the $^{125}I$-Ag-PANI-silica nanoparticle was injected to the ICR mouse to investigate its in-vivo distribution characteristics. The $^{125}I$ absorption yield of the Ag-PANI-silica nanoparticle was higher than 95% after a 6 hr incubation period in the $^{125}I$ solution. And $^{125}I$-Ag-PANI-silica was stable for 48 hr at 80% yield at room temperature. The SPECT/CT image of a mouse that received $^{125}I$-Ag-PANI-silica complex showed that the $^{125}I$-Ag-PANI-silica complex was distributed in the lung, stomach and thyroid at 30 min post injection. From these results, the Ag-PANI-silica nanoparticle has good radio-iodine carrying property and can be applicable for the purpose of diagnosis and therapy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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