A rapid and sensitive high performance liquid chromatographic method with UV detection for the analysis of polyamines(putrescine, spermidine, spermine) has been developed. The benzoyl chloride derivatives of putrescine, spermidine and spermine are separated on a mc-Bondapak C18 reverse-phase column with 50% methanol as the mobile phase. This method was applied to the analysis of polyamines in the serum of normal human and uterine cancer patients. The results show that the mean level of polyamines in cancer patients serum is much higher than that in normal human serum.
복숭아는 다른 과수에 비하여 개화기가 빨라 저온으로 인한 화분발아 장해로 결실율이 저하되고 있다. 이러한 문제점을 해결하기 위하여 저온에서 복숭아의 화분 발아를 증진시킬 수 있는 방법을 강구하고자 화분발아 배지에 아미노산, polyamine, flavonoid 등을 첨가하여 일련을 실험을 수행하였다. 저온에서 배지내 첨가물질로써 asparagine, glutamine, spermine, putrescine, kaemferol이 유효하였으며, 이들의 적정농도는 asparagine과 glutamine는 10 mM, spermine 100 mM, putrescine 1000 uM, kaemferol은 1.0 uM 이였다. 저온에서 발아율이 높았던 처리는 $100\;mg{\cdot}L^{-1}\;H_3BO_3+10\;mM$ asparagine 혼용조합이었고, 다음이 $100\;mg{\cdot}L^{-1}\;H_3BO_3+10\;mM$ glutamine 혼용조합, $100\;mg{\cdot}L^{-1}\;H_3BO_3+200\;{\mu}M$ spermine 혼용조합 순이었다. 기본배지에 치상된 ‘장택백봉’의 화분 발아율은 25.4%, '수봉' 13.9% 불과하였으나, $100\;mg{\cdot}L^{-1}\;H_3BO_3+10\;mM$ asparagine 첨가된 배지는 두 품종 모두 대조구보다 화분 발아율이 $18{\sim}19%$ 증진되었다. 아미노산과 폴리아민 첨가에 의한 화분발아율 증진 효과는 '장택백봉' 보다는 '수봉'에서 더욱 현저하였다.
The effects of polyamines on auxin polar transport were studied in corn coleoptile segments. Among putresine, spermidine and spermine tested in labelled auxin transport, spermidine inhibited auxin polar transport most strongly. Its inhibitory effect appeared after 1 h of transport period. Spermidine inhibited labelled auxin and 14C-benzoic acid accumulation into the tissue in the various pH range tested (pH 4.0-8.0). These results suggest that the inhibition of auxin transport may not be due to decrease in pH by spermine the effect of decreased pH in the extracellular space.
We have purified and characterized a deoxyribonuclease from zygotes of the eukaryotic green alga, Chlamydomonas reinhardtii and investigated effects of the polyamines, putrescine, spermidine and spermine on the purifed endonuclease-catalyzed cleavage of plasmid DNA. The enzyme has a molecular weight of about 37 kDa as measured by gel filtration and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. There is no requirement for a divalent cation. The activity is sensitive to ionic strength, as NaCl and KCl result in inhibition. The cleavage of plasmid DNA by the purified endonuclease was effectively inhibited by polyamines. The enzyme activity was inhibited more effectively by spermine than by spermidine. The inhibition by putrescine was lower than the other two polyamines.
Chan-Yong Lee;Hyeong-Won Ryu;Moon-Jip Kim;Thong-Sung Ko
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제12권3호
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pp.262-264
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1991
An anomalous absorbance-temperature profile of calf thymus DNA, having a hypochromic trough just before the rise the $T_m$-region phase, occurs at the spermine concentration where the DNA collapses into a compact structure. The trough phase can be eliminated by the addition of ethidium bromide and also by a hydrophobic environment.
olyamine 합성 저해제와 polyamine이 부정근 형성에 미치는 영향을 알아보고자 대두 자엽 절편을 이용하여 5$\times$$10^{-6}$ M NAA와 5$\times$$10^{-7}$ M kinetin으로 조성한 부정근 형성 배지에 polyamine 합성 저해제와 Polyamine을 처리하여 Polymine 저해제에 의한 부정근 형성 억제와 부정근 형성능회복을 조사하였다. 부정근 형성 배지에 $\alpha$-difluoromethylornithine (DFMO), $\alpha$-difluorornethyla.ginine (DFMA), cyclohexyl ammonium sulfate(CHA), dicyclohexylamine(DCHA) 및 methylglyoxal-bis (guanylhydrazone) (MGBG)등의 polyamine 합성 저해제를 $10^{-4}$ -$10^{-2}$ M농도로 단용 또는 혼용 처리한 결과 $10^{-3}$ M MGBG에서 부정근 형성이 가장 억제되었으며 $10^{-3}$ M MGBG에 각 Polyamine을 처리한 결과 spermine $10^{-5}$ M을 동시 처리시 부정근 형성능이 다소 회복되었다. Polyamine 함량은 대조구에 비하여 각 실험구에서 배양 초기에 급격히 증가하였으며 spermine 동시 처리구에서 각 polyamine 함량의 증가가 가장 현저하였다.
발효기간동안 된장에서 검출된 biogenic amine은 putrescine cadaverine, tryptamine $\beta$-phenylethylamine, spermidine, spermine, histamine, tyramine 및 agmatine 등으로 총 9가지 종류이며 , 검출된 biogenic amine 중 agmatine의 함량이 가장 높은 것으로 나타났다. 된장의 발효기간에 따른 biogenic amine함량은 종류에 따라 증가 혹은 감소하는 경향을 보였다. 감마선 조사에 의해 발효기간 중 대부분의 biogenic amine함량이 20~60% 가량 유의적(p<0.05)으로 감소하였는데, 이 중 spermine 및 agmatine은 대조구와 유의적인 차이를 보이지 않아 감마선 조사에 의한 영향을 받지 않는 것으로 나타났다. 따라서, 감마선 조사기술은 된장숙성 중의 biogenic amine 생성을 억제시킬 수 있는 것으로 나타났다.
세포내 polyamine은 DNA 구조 뿐 아니라 전사과정, 세포의 성장, 분화, 및 증식 등에 간여하는 바, 배양 흉선세포의 apoptosis 을 억제한다고 한다. 따라서 dexamethasone에 의한 생쥐 흉선세포의 apoptosis 반응에 대한 polyamine의 억제작용을, polyamine 생성과 대사억제제들로 처치한 흉선세포의 일차배양실험에서 관찰하여, 그 결과를 A23187과 DHEA의 작용과 비교하였다. 1) 흉선세포 생존율이 dexamethasone, DHEA, A23187, DFMO, MGBG들에 의하여 직접 현저히 억제되며, aminoguanidine, putrescine, spermidine, 및 spermine들에 의해서는 영향을 받지 않았다. 2) 흉선세포 DNA의 분절화가 dexamethasone과 A2318T에 의하여 유의하게 증강되어 있으며 DHEA에 의하여도 다소 증가되었으나, DFMO, MGBG, aminoguanidine, putrescine, spermidine, 및 spermine들에 의하여는 크게 영향을 받지 않았다. 3) Dexamethasone에 의한 흉선세포의 apoptosis는 DHEA에 의하여 억제된 반면, DFMO, MGBG, 및 aminoguanidine에 의하여는 영향을 받지 않았다. Spermine은 dexamethasone과 A23187에 의한 세포생존율 감소를 유의하게 억제하였으며, A23187에 의한 세포생존율 감소는 putrescine과 spermidine에 의하여도 억제되는 경향을 보였다. 4) DFMO 및 MGBG에 의한 흉선세포 생존율 감소는 spermine에 의해 현저히 억제되었으나, putrescine과 spermidine에 의하여는 영향을 받지 않았다. 5) Dexamethasone을 DFMO 또는 MGBG와 병합처치하여 나타나는 흉선세포 생존율 감소는 각각 spermine과 putrescine에 의하여 유의하게 억제되었으나, aminoguanidine 또는 DHEA와 dexamethasone의 병합처치에 의한 생존율 감소는 polyamine 전처치에 의해 감소되지 않았다. 이상의 결과는 polyamine이 흉선세포의 apoptosis 반응을 억제할 수 있고, 이같은 억제효과의일부가 $[Ca^{2+}]_i$ 증가에 관련되는 신호전달과정과 연관될 뿐 아니라, 세포막의 polyamine transporter를 통한 polyamine 섭취가 이들의 생합성 또는 유리기능과 함께 세포내 polyamine 함량을 조정하므로, 흉선세포의 apoptosis에 억제적으로 작용할 수 있음을 시사하는 것으로 사료된다.
본 연구는 숙주의 발아 과정 중 오옥신 과련 대사작용에서의 strontium의 역할을 구명코자 실시하였다. 오옥신 첨가 용액에 strontium을 첨가하여 발아시킨 결과 침지 한 후 IAA 산화가 일어남이 밝혀졌다. 3-5배의 IAA 산화효소 활성화가 측정되었다. 이러한 결과는 strontium에 의한 생장억제의 직접적인 증거였다. 더 나아가 1-10 mM의 strontium 첨가 용액에서 생장한 배축에서의 spermine과 spermine 함량이 2-3배 높은 것으로 밝혀졌다. 이러한 증가는 생체중에 근거한 결과였다. 결론적으로 strontium에 의한 배축생장 억제는 오옥신 산화 및 polyamine 생합성과 관계가 있는 것으로 밝혀졌다.
항혈전성 약물로서 그의 항 혈소판 작용력은 dipyridamole보다 강하나 심혈관계 등에 대한 부작용이 적어 clinical efficiency가 유의하게 높은 약물개발에 대한 연구는 임상적 응용성 뿐 아니라, 혈소판-응고기전의 규명에 기여할 것으로 사료되는 바 본 연구에서는 cyclic nucleotide phosphodiesterase(PDE-I)들의 항혈소판 작용을 검토하여 그들의 혈관 내피세포와 혈관평활 근세포의 중식에 대한 영향을 항혈소판성 작용을 보이며 혈관세포들의 증식에 없어서는 안되는 spermine의 그것과 비교 검색하였다. Johnson 등(1985)의 방법에 따라서 제조한 aequorin부하-가토혈소판의 thrombin(0.25 units: TB)에 대한 응집반응에서, pyridazinone 유도체인 KR30075, sodium nitroprusside(SNP), imazodan, isobutylmethylxanthine(IBMX), rolipram, 및 spermine의 응집억제성 $IC_{50}$/ (M)은 각각 2.21 $\times$$10^{-7}$, 1.26 $\times$$10^{-6}$, 6.96 $\times$$10^{-6}$, 7.78 $\times$$10^{-6}$, 8.11 $\times$$10^{-4}$, 및 4.28 $\times$$10^{-3}$ M으로써 이들은 TB-응고반응에 동반되는 혈소판 [Ca$^{++}$]$_{i}$-증가에 대한 각각의 $IC_{50}$/과 차이를 보이지 않았으며, 유의한 상관성을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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