Jo Hwang-Yun;Jo Seong-Geun;Yun Hui-Jun;Park Mi-Ryeong;Im Yeo-Jeong;Park Jong-Ju;Kim Jin-Hoe
한국동물번식학회:학술대회논문집
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한국동물번식학회 2002년도 춘계학술발표대회 발표논문초록집
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pp.86-86
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2002
To examine the feasibility of using a sperm vector system for gene transfer, we have investigated the binding and the uptaking of foreign DNA into the sperm nucleus by PCR, in situ hybridization and LSC. We have also examined the transportation of exogenous DNA into oocytes by immunofluorescene via PCR. Sperm cells were incubated with DNA/liposome complexes (1:4 ratio) in fertilization medium with BSA or without BSA. (omitted)
황소개구리의 정자변태과정과 정자형성단계 중에 글리코겐이 정자 성숙에 미치는 역할을 알아보기 위하여 관찰한 결과는 다음과 같았다. 정자변태과정은 핵과 세포질 소기관의 형태적 특징을 토대로 하여 3단계로 나눌 수 있었다. 특히, 정자형성단계 중에서 글리코겐은 정원세포부터 정모세포발생 단계까지는 관찰되지 많았지만, 정자변태단계인 초기 정자세포부터 성숙기까지는 정자세포의 핵과 첨체 및 세포질 내에 존재하고 있었고, 성숙한 정자의 중편부에도 위치하고 있었다. 이러한 사실은 글리코겐이 정자 성숙에 중요한 역할을 수행할 뿐만 아니라 정자의 파동운동에 에너지원으로서 중요한 역할을 할 것으로 사료된다.
Gonad index, spermatogenesis and the reproductive cycle of Meretrix petechialis were investigated by cytological, histological observations. Monthly changes in the gonad index coincides the gonadal development. The morphology of the spermatozoon had a primitive type and is similar to that of other bivalves having a short mid-piece with five to six mitochondria surrounding the centrioles. The morphology of the sperm nucleus type and the acrosome shape of this species were cylindrical type and cap-like shape, respectively. The spermatozoon was approximately 40-45 ${\mu}m$ in length including the sperm nucleus length (about 1.50 ${\mu}m$), acrosome length (0.60 ${\mu}m$) and tail flagellum. The axoneme of the tail flagellum consisted of nine pairs of microtubules at the periphery and a pair at the center. The axoneme of the sperm tail showed 9 + 2 microtubular arrangement. The spawning period was from June to September and the main spawning occurred from July to August when seawater temperatures were higher than $20^{\circ}C$. The reproductive cycle of this species could be categorized into five successive stages: early active stage (February to March), late active stage (February to May), ripe stage (April to July), partially spawned stage (June to September), and spent/inactive stage (September to February).
To investigate the process of spermiogenesis of the Korean eastern Daubenton's bat, Myotis daubentonii ussuriensis, the testis obtained from mature male bats was studied by transmission electron microscope and were based on the variety and diagnostic characters of cell organells. The results obtained from the present study are as follows. According to the differentiation of the cell organells, the spermiogenesis of the Korean eastern Daubenton's bat, M. d. ussuriensis, was divided into Golg, cap, acrosome, maturation and spermiation phases. Besides, these Golgi, cap, acrosome, and maturation phase were subdivided into the steps of early and late phases repectively and matruation phase was subdivided into step of early, mid and late phases. Therfore, the spermiogenesisof M. d. ussuriensis has been divided into a total of 11 phases. The chromatin granules began to condense at the early cap phase, regularized at the acrosome phase, and a perfect nucleus of sperm was formed at the maturation phase. The chromatoid body was occurred in the upper cytoplasm of nucleus at the early Golgi phase, and it was accurred the posterior cytoplasm of the nucleus at the early maturatio phase. The formation of sperm tail began to be develop in the early golgi phase, and completed at the spermiation phase. The fiber structure of middle piece was consisted of nine outer doublets and two central singlet microtubules and Nos. 1, 5, 6 and 9 in the outer dense were larger than the others(2, 3, 4, 7, 8).
To investigate the ability to decondense sperm head penetrated into cytoplasm of the oocytes and the relationship between this ability and the level of glutatione (GSH) in mouse oocyte at various maturing stages. The fertilizability of oocytes at various stages of maturation the decondensation of sperm nucleus and the formation of male pronucleus, were observed and the levels of GSH were measured in oocyte at same stages. Besides, the relation between fertilizability and level of GSH in oocyte cytoplasm treated with L-buthionine-S, R-sulfoxmine (L-BSO), the inbitor of biosynthesis of GSH, was determined. The decondensation of sperm head was not found in GV stage and L-BSO treated oocytes. In maturing oocytes (GVBD, MI), the decondensation was found, but the formation of male pronucleus was not. The levels of GSH in oocyte cytoplasm were measured; 2.2 pmol per oocyte in the ovulated and the matured in vitro each, 1.0 pmol in GV intact oocyte, 1.3 pmol in GVBD, and 1.5 pmol in MI phase oocyte. In L-BSO treated oocytes the levels of CSH were measured 0.08~o.09 pmol per oocyte, slightly lower than GV stage oocyte. In conclusion, GSH in oocyte is supposed to be synthesized and storaged in cytoplasm during maturation. The failure of decondensation in the cytoplasm of GV stage and L-BSO treated is suggested that GSH is an essential factor in decondensing the sperm head and that the a certain level of GSH, more than in GV oocyte cytoplasm, is required in decondensation.
바다잉어과(Osmeridae)에 속하는 빙어(Hypomesus niponesis)의 정소 내 성숙한 정자들을 전자현미경을 이용하여 조사하였다. 빙어의 정소는 한 쌍으로 부레와 창자 사이에 위치하였고 좌측 정소가 우측 정소보다 큰 것으로 나타났으며 흰색이었다. 정소 내의 성숙한 정자의 길이는 $26{\mu}m$ 정도였다. 두부는 난형으로 직경은 400 nm 정도였으며 첨체는 관찰되지 않았고, 특히 염색질의 이질적 응축이 관찰되었다. 두부의 핵이 함입되어 핵와(nuclear fossa)가 깊게 형성되었으며 핵와 내 기저부에서 편모가 직선으로 분포하였고 편모의 미세소관은 전형적인 9+2 구조를 이루고 있었다. 또한 편모의 외측에는 두개의 axonemal fin이 관찰되었으며, 중편에는 미토콘드리아가 하나만 존재하였다.
Objective: In a nucleus breeding scheme, the sire of dam's pathway plays an important role in producing genetic improvement. Selection proportion is the key parameter for predicting selection intensity, through truncating the normal distribution. Semen sexing using flow cytometry reduces the number of vials of sperm that can be obtained from a proved bull. In addition, a lower fertility of this kind of sperm is expected because of the lower sperm dosage in sex sorted semen. Both of these factors could affect the selection proportion in the sire of dam's pathway ($p_{SD}$). Methods: In the current study, through a deterministic simulation, effect of utilizing sex sorted semen on selection ($p_{SD}$) was investigated in three different strategies including 1: continuous use of sex sorted semen in heifers (CS), 2: the use of sex sorted semen for the first two (S2) and 3: the first (S1) inseminations followed by conventional semen. Results: Results indicated that the use of sex sorted semen has a negative impact on the sire of dams (SD) pathway due to increase in selection proportion. Consequently selection intensity was decreased by 10.24 to 20.57, 6.38 to 8.87 and 3.76 to 6.25 percent in the CS, S2, and S1 strategies, respectively. Conclusion: Considering the low effect of sexed semen on genetic improvement in dam pathways, it is necessary to consider the joint effect of using sex sorted semen on the sire and dams pathway to estimate about the real effect of sexed semen on genetic improvement in a nucleus breeding scheme.
한국산 등줄쥐의 정자변태 과정을 알아보기 위하여 세정관 상피의 세포분화에 따른 특징들과 정소상체 미부의 성숙정자의 형태적 특징들을 조사하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 세포구조물의 특징에 따라 골지, 두모, 첨체, 이탈단계는 각각 전, 후기로 구분하였고 성숙단계를 1단계로 하여 한국산 등줄쥐의 정자변태의 전 과정을 9기로 나눌 수 있었다. 핵질의 변화에 있어서, 염색질 과립들은 두모단계에서 응축하기 시작하여 첨체단계에서 구형의 형태로 진행되고, 성숙단계에서 균질화하여 완전히 정자의 핵을 형성하였다. 정자두부는 낫꼴모양을 가지며, 중편부의 외측섬유는 편자모양으로 배열되어 있고, 이들 외측 섬유는 NO. 1,5,6,9가 다른 것 보다 크다.
우리나라 서해안에서 채집된 서해낙지(Octopus minor)의 정자 완성과정을 전자현미경을 통해 관찰한 결과 다음과 같았다. 서해낙지의 정자 완성 과정은 초기 중기 후기 정세포 그리고 성숙정자 등 4단계로 나눌 수 있었다. 초기 정세포는 구형의 세포로서 전자밀도가 낮아 밝게 보였으며 핵의 상단부 골지체로부터 형성된 첨체는 전자밀도가 높아서 어둡게 관찰되었다. 핵의 하단 근위 중심소체에서 유도된 것으로 보이는 extra-nuclear rod(enr)는 처음에는 구형에서 타원형으로 변모되면서 핵의 상단부위까지 신장되었으며, 원위중심소체로부터는 축삭이 형성되는 모습도 관찰되었다. 핵막 주위에서 많은 수의 미세소관으로 형성된 만췌트(manchette)도 관찰되었다. 중기 정세포는 핵내 염색질이 가는 실모양으로 응축 되었고, 이 시기에서도 만췌트가 핵막의 주위에서 관찰되었다. 특히 구형의 첨체는 긴 타원형으로 변모되면서 많은 수의 가로무늬를 형성하였고 전자밀도는 중등도로 나타났다. 후기 정세포는 핵내 염색질이 굵고 짧게 응축되었고, 중편에서는 미토콘드리아가 축삭을 감싸고 있는 mitochondrial sleeve를 형성하였다. 축삭은 전형적인 9+2 구조를 보였으며 축삭 주위에서는 9개의 금은 섬유(coarse fibres)도 관찰되었다. 성숙정자의 첨체 내강에서도 가로무늬가 관찰되었는데 특이하게도 가로무늬 사이에서 일정한 간격의 돌기물들이 관찰되었다. 성숙정자의 전체 길이는 약 $390{\mu}m$였으며 첨체는 나선형으로 꼬여 있었으나 머리부위는 꼬여 있지 않고 바나나 모양으로 약간 휘어져 있었다. 또한 정자의 중편에는 $11\sim12$개의 미토콘드리아가 굵은 섬유들을 둘러싸고 있었으며, 이 금은 섬유들은 꼬리의 주편 (main piece)까지만 연결되고 단편 (end piece)에서는 9+2구조의 축삭만이 관찰되었다.
This paper describes the magnetic orientation of the intact and demembranated bull sperm treated by DTT or heparin in a 5,400 G static field. Semen samples collected from four bulls (Japanese Black) were mixed to the same sperm density. One percentage triton X-100 was used to extract the plasma membrane. The intact and demembranated sperm suspensions were treated with 20, 200, 2,000 mM DTT, 100, 1,000 or 10,000 units heparin solutions at $4{^{\circ}C}$ for 6 days. The decondensation of the sperm nuclei treated by DTT or heparin was examined by measuring the sperm head area at 1, 3, and 6 days. After measuring the area, each sperm sample was exposed to a 5,400 G static magnetic field generated by Nd-Fe-B permanent magnets for 24 hours at room temperature. Results showed that the decondensation of bull sperm nuclei was not induced by the heparin treatment, however, incomplete decondensation was induced by the DTT treatment. During the magnetic orientation, bull sperms treated by DTT or heparin had low percentages of long axis perpendicular to the magnetic lines of force. However, different aspects were obtained for long axis perpendicular orientations following treatment of DTT or heparin. Through the DTT treatment, the decline of long axis perpendicularly oriented percentages was due to the increase of long axis parallel orientation with the head of the flat plane perpendicular to the magnetic lines of force, whereas, using the heparin treatment, the decline of long axis perpendicular orientation was due to the increment of long axis parallel orientation with the head of the flat plane parallel to the magnetic lines of force. Also, percentages of the head of the flat plane perpendicular were decreased by the heparin treatment. These findings suggest that maintaining the structure of protamine in the chromatin is necessary for the sperm head to orient with its flat plane perpendicular, and maintaining the disulfide bond in the chromatin is necessary for the long axis of sperm to orient perpendicularly.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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