소와 견에 있어서 Unopette가 정자의 형태학적 검사 및 정자농도의 검사를 위하여 사용될 수 있는가를 알아 보기 위하여본 연구를 수행하였다. 소정액 및 견정액을 Unopette에 희석한 후 3-5$^{\circ}C$에 보존하면서 시간경과에 따라서 위상차현미경하에서 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Unopette를 사용하여 관찰한 정자는 48시간까지는 hematoxylin-eosin을 사용하여 정자보다는 높은 정상정자율을 나타내넜다. 2. Unopette를 사용한 정자는 정자농도에 있어서 대조군 정자에 비하여 24시간까지는 큰 차이를 나타내지 않았다. 3. 따라서 Unopette는 정자의 형태학적 검사 및 정자농도의 검사를 위하여 유용하게 사용될 수 있다는 사실을 알 수 있었다.
Morphological estimation of human spermatozoa is complicated by the fact that there is great natural variation in shape. This natural variation in shapes makes it difficult to say which forms are associated with infertility and which are normal variations. Possibly post coital test or in vitro cervical mucus penetration tests will help to clarify this question by showing which sperm are capable of penetration. The purpose of this investigation was performed to assess distribution of various morphological abnormalities according to the ability of sperm to penetrate cervical mucus. The sperm-mucus penetration using hen's egg white as substituting mucus for human cervical mucus was done in 45 fertile men with normal semen analysis and 122 infertile men with abnormal seminal parameters more than one. The female partners of 122 infertile couples showed normal results in the female fundamental test for fertility. Conventional semen analysis was evaluated according to the WHO standard normal(l980). The detailed classification of the abnormal sperm was made according to David et al(l975). The vitality of the sperm samples determined by eosin yellow-nigrosin stainig according to the method of Eliasson(l977). Results were as follw; 1. The patients had significantly lower total sperm count, motility (%), normal morphology (%), viability and total functional sperm fractions(TFSF) than fertile donors. 2. The mean value of sperm penetration distance of the patients(28.69${\pm}$11.02mm) showed significantly lower than fertile donors(37.33${\pm}$5.49mm). And 43/45 fertile donors(95.5%) as well as 57/122 patients(46.7%) had over 30mm in sperm penetration distance respectively. While 2/45 fertile donors(4.5 %) and 65/122 patient(53.3%) had under 30mm in sperm penetration distance respectively. 3. The morphological abnormalities in fertile donors were significantly lower 23.04${\pm}$5.83% (head = 12.89${\pm}$4.98, neck=6.11${\pm}$3.83%, and tail=3.43${\pm}$2.65%), compared to 36.03${\pm}$14. 40% in patients(head = 15.98 8.60%, neck 11.20${\pm}$6.56% and tail=8.70${\pm}$6.55%). Also, 3 types of sperm abnormalities including head, neck and tail were significantly lower in patient than fertile donors, respectively. Both the patients and fertile donors showed higher distribution of sperm with abnormal head than abnormal neck and tail. 4. The mean morphological abnormalities(SP>30mm) of the patients(30.68 11.64%; head = 15.95${\pm}$9.35%, neck=8.14${\pm}$4.21 %, tail=6.56${\pm}$5.64%) were significantly lower compared to patients(40.72${\pm}$15.01 %; head=16.02${\pm}$7.69%, neck 13.89${\pm}$7.82%, tail=1O.58${\pm}$6.75%) under 30mm in sperm penetration distance. Also, both groups over 30mm and under 30mm in sperm penetration showed distance higher distribution of sperm with abnormal head than abnormal neck and tail. The morphological abnormalities of head did not show significant difference but abnormal neck and tail were significant difference between the over 30mm and under 30mm group in sperm penetration distance.
Purpose : These studies were undertaken to evaluate the effects of Allii tuberosi Semen (ATS) on the spermatogenic abilities such as concentration, motility and morphological normality of sperm from the testis and the activities of sperm hyaluronidase, testicular peroxidase and testicular catalase. Materials and Methods : We used the 8-week-old mice and administered the 0.2 ml extract solution of ATS in the different concentration (0.1 mg/ml, 1 mg/ml, 10 mg/ml and 100 mg/ml) once a day for 60 days. The control group was administered the distilled water in the same way. After the administration of each extract solution, we examined the number of total, motile and normal sperm, the activities of sperm hyaluronidase, testicular peroxidase and testicular catalase. Also we observed the histological changes of isolated testis. And we compared to the testicular tissue especially seminiferous tubules between control and treated group by histochemical methods. Results : The concentration of total sperm, the motility and normality of spermatozoa were significantly increased in ATS groups, especially in 1 and 10 mg/ml groups, compared to control group. In the histological analysis of the testicular tissues, the enlargement of testicular lobe diameter and apparent vasculogenesis between testicular lobes were observed in the ATS groups compared to the control group, respectively. Also, the activity of hyaluronidase was significantly increased in the ATS groups compared to the control group. In the antioxidant activity analysis, the activity of testicular peroxidase was significantly increased in the ATS groups compared to the control group, especially in 1 mg/ ml group. The activity of testicular catalase was increased in ATS groups. Conclusion : This study shows that ATS has the beneficial effect on the concentration, morphology and motility of sperm, the activities of sperm hyaluronidase and testicular peroxidase. We can suggest that ATS extract solution be useful for the treatment of male sexual dysfunctions and infertility.
본 연구는 0.5ml straw를 이용한 정자 동결융해 시 응해 온도가 동결정자의 성상에 미치는 영향을 파악하고 미니 돼지의 동결정액에 최적화된 적정 응해 조건을 찾기 위하여 실시하였다. 정액동결 straw를 37, 50 및 $70^{\circ}C$에서 각각 5초, 10초 및 45초간 융해하여 생존율(SYBR-14/PI staining), 정자원형질막기능검사 (Hypoosmotic Swelling Test) 및 첨체반응율(CTC : chlorotetracycline staining)을 검사 한 결과, $70^{\circ}C$에서 5초간 융해한 정자의 생존율과 CTC 결과가 $37^{\circ}C$와 $50^{\circ}C$에서 10초 및 45초간 융해한 처리구보다 유의적(p<0.05)으로 높은 생존율과 낮은 비율의 첨체 반응율을 얻었다. 따라서 미니돼지의 동결 정액은 고온에서 단시간 융해를 하는 것이 정자의 성상에 유리한 것으로 사료된다.
Choi Eun Mi;Cho Jung Hoon;Jang Jun Bock;Lee Kyung Sub
대한한의학회지
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제26권4호
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pp.31-38
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2005
Objectives: This study was conducted to investigate the effects of Morindae officinalis Radix (巴戟) on the spermatogenesis and antioxidant activities in the Sprague Dawley (SD) rat. Materials and Methods: We choose the 2-month-old SD rats, and administered the extract powder of Morindae officinalis Radix once in a day for 28 days. The control rats were administered normal water in the same way and duration. We observed changes of body weight, surgically isolated testis, epididymis, vascular gland and prostate gland before and after administration of Morindae officinalis Radix extracts in SD Rats. Also we compared the testicular tissue, especially seminiferous tubules between the control and treated groups by histochemical methods. In addition, we examined the total, normal, morphologic and motile sperm in the cauda epididymis, and the activity of catalase and peroxidase in the isolated testis tissue. Results: There was no significant difference between control and treatment groups in the body weight, testis, vascular and prostate gland, but the weight of epididymis showed significant difference in the control group. The concentration of total sperm, the motility and normality of spermatozoa was significantly different when compared with the control group, respectively. In the histological examination of testicular tissues, the tendency of increasement of angiogenesis between seminiferous tubules was observed. And the concentration of spermatogonia, primary and secondary spermatocyte and sperm were higher than that of control testicular tissues. Finally, the activity of catalase and peroxidase related inhibitory molecules of oxidation were slightly increased in the treatment group than those of control group. Conclusions: This study shows that Morindae officinalis Radix has the beneficial effect on the concentration, morphology and motility of sperm, the important factor in male fertility. We can suggest that Morindae officinalis Radix has an effect on the spermatogenesis in the SD rat.
Kim, Kang-Hyeon;Shin, In-Sik;Lim, Jeong-Hyeon;Kim, Sung-Hwan;Park, Na-Hyeong;Moon, Changjong;Kim, Sung-Ho;Shin, Dong-Ho;Kim, Jong-Choon
대한수의학회지
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제49권4호
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pp.279-284
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2009
This research aimed to investigate the time-course effect of epichlorohydrin (ECH) on epididymal histopathology in Sprague-Dawley rats. Twenty-four male rats were randomly assigned to four groups with 6 rats in each group and were administered a single oral dose of ECH (70 mg/kg) or its vehicle. Six animals each were sacrificed on days 0 (control), 1, 2, and 7 after treatment. During the study period, clinical signs, body weights, reproductive organ weights, testicular spermatid count, epididymal sperm count, motility and morphology, and histopathology were examined. No treatmentrelated effects on body weights and reproductive organ weights were noted at any time point. On the contrary, sperm motility decreased slightly on days 1 and 2 after treatment and then decreased significantly on day 7 after treatment. The first signs of histological changes were the appearance of cell debris in the ducts and vacuolization of the epithelial cells observed in the proximal caput epididymis on day 1 after treatment. The incidences and grades of the histological changes including cell debris in the ducts, epithelial vacuolization, oligospermia, and epithelial disruption increased on day 2 and then decreased slightly on day 7 after treatment. These results show that a single oral dose of 70 mg/kg ECH to male rats results in cell debris in the ducts and vacuolization of the epithelial cells in the proximal caput epididymis, followed by reversible oligospermia, epithelial disruption, and decreased sperm motility.
Kim, N. H.;Jun, S. H;Park, S. H.;J. Y. Yoon;D. I, Jin;S, H. Lee;Park, C. S.
한국가축번식학회지
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제26권4호
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pp.353-360
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2002
Although successful pronuclear formation and apposition were seen in porcine oocytes following mouse sperm injection, little is known on the morphology of male and female pronuclei following sperm injection. The objective of this study is to describe the ultrastructure of porcine zygote following murine sperm injection in relation to the chronology of pronuclear S phase. At 40h ~ 44h following in vitro maturation, Cumulus cells were removed in TCM-HEPES with 0.1% hyaluronidase. Then, spermatozoa was injected into the cytoplasm of oocytes. After. injection, all oocytes were transferred to NCSU23 medium and cultured at 39$^{\circ}C$ under 5% $CO_2$ in air. Oocytes were fixed in 2% glutaraldehyde in Dulbeccos phosphate-buffered saline and observed by Transmission Electron Microscopy. Nuclear precursor bodies were observed in each pronucleus. A cluster of large and small granules was attached in the nucleolus precursor body. After the apposition of male and female chromatin, chromatin condensation was observed throughout the nucleoplasm and nucleolus precursor bodies and condensed chromatin in contact with clusters of small and large granules and the nuclear envelope were found in apposed pronuclear regions. These results suggest that non-species specific nuclear cytoplasmic interactions take place during pronuclear formation and apposition following sperm injection.
To investigate the effects of seeding during freezing procedure on post-thaw viability, motility, and acrosome integrity of boar spermatozoa, semen from 5 Yorkshire boars were collected for this experiment. Raw semen were diluted with Merck I, subsequently added with cooling diluent containing lactose and egg yolk and with freezing diluent containing glycerol. The diluted semen were frozen on the rack in the styrofoam box filled with liquid nitrogen at the distance of 5 cm or I cm above LN2 level. Seeding was performed to only a group of straws frozen at 5 cm away on the surface of LN2. The frozen semen were thawed in $50^{\circ}C$C water and the viability and local motility were analyzed by sperm analysis imaging system. A part of thawed semen was taken for the examination of morphology of apical ridge of the acrosome to compare with the effect of seeding between the seeding-treated and non treated groups. I. Post-thaw viability was considerably higher in seeding-treated sperm than non-seeding group (p<0.01), however, no difference of local motility was obtained among the groups. 2. At three hours after thawing, viability was also higher in seeding-treated group than non-treated group (p<0.05), along with no difference of motility among the groups. 3. Higher normal acrosome integrity was obtained in the seeding-treated sperm than non-treated groups (p<0.01). 4. Between non-seeded groups, higher normal acrosome integrity was obtained in the sperm group frozen at 5cm upper on the surface of LN2 than that frozen at 1cm away (p<0.01). These results indicated that seeding treatment during freezing boar spermatozoa was beneficial to post-thaw viability and normal acrosome integrity.
Purpose : This study was undertaken to evaluate the effects of the different administration duration of Epimedium Herb extract solution on the spermatogenic abilities such as concentration, motility and morphological normality of sperm from the testis and the activities of sperm hyaluronidase. Methods : We used the 2-month-old mice and administered the extract solution of Epimedium Herb 0.3 ml/g/day for 30, 60, 90 and 120 days. The control group was administered the normal saline as the same way. We examined the number of total, motile and normal sperm from the cauda epididymis, the activities of sperm hyaluronidase. Also we observed changes of isolated testis before and after administration of Epimedium Herb extract solutions in the mice. And we compared the testicular tissue especially seminiferous tubules with the control and treated group by histochemical methods. Results : The significant differences were observed in the concentration of total sperm and normality of spermatozoa of the Epimedium Herb extract solution administered groups compared to the control group in 60, 90 and 120 days groups. The significant differences were observed the motility of the Epimedium Herb extract solution administered groups compared to the control group in 60 days group. In the histological analysis of the testicular tissues, the enlargement of testicular lobe diameter and apparent vasculogenesis between testicular lobes were observed in the Epimedium Herb extract solution administered groups compared to the control group, respectively. And the activity of hyaluronidase was significantly increased in the Epimedium Herb extract solution administered groups compared to the control group. Conclusion : This study shows that Epimedium Herb has the beneficial effect on the concentration, morphology and motility of sperm, the testicular tissues and the activities of sperm hyaluronidse in 60 days administration group. We can suggest that Epimedium Herb extract solution be useful for the treatment of male sexual dysfunction and infertility.
Purpose: This study was undertaken to evaluate the effects of the different administration duration of Cynomorii Herba extract solution on the spermatogenic abilities such as concentration, motility and morphological normality of sperm from the testis and the activities of sperm hyaluronidase. Methods : We used the 8-week-old ICR mice and administered 0.3mg/g extract solution of Cynomorii Herba once a day for 30, 60, 90 and 120 days. The control group was administered the normal saline in the same way and duration. We examined the number of total, motile and normal sperm from the cauda epididymis. And we compared the testicular tissue especially seminiferous tubules between control and treated groups by histochemical methods. At the end we observed the difference of sperm hyaluronidase activities between control and treated groups. Results : The significant differences were observed in the concentration of total sperm, the motility and normality of spermatozoa of the Cynomorii Herba extract solution administered groups compared to the control group in 60 and 90 days groups. In the histological analysis of the testicular tissues, the enlargement of testicular lobe diameter and apparent vasculogenesis between testicular lobes were observed in the Cynomorii Herba extract solution administered groups compared to the control group, respectively. Also, the activity of hyaluronidase was significantly increased in the Cynomorii Herba extract solution administered groups compared to the control group. Conclusion : This study shows that Cynomorii Herba has the beneficial effect on the concentration, morphology and motility of sperm especially in 60 and 90 days administration group. We can suggest that Cynomorii Herba extract solution be useful for the treatment of male sexual dysfunctions and infertility.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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