The glycome consists of all glycans (or carbohydrates) within a biological system, and modulates a wide range of important biological activities, from protein folding to cellular communications. The mining of the glycome for disease markers represents a new paradigm for biomarker discovery; however, this effort is severely complicated by the vast complexity and structural diversity of glycans. This review summarizes recent developments in analytical technology and methodology as applied to the fields of glycomics and glycoproteomics. Mass spectrometric strategies for glycan compositional profiling are described, as are potential refinements which allow structure-specific profiling. Analytical methods that can discern protein glycosylation at a specific site of modification are also discussed in detail. Biomarker discovery applications are shown at each level of analysis, highlighting the key role that glycoscience can play in helping scientists understand disease biology.
A liquid chromatography mass spectrometry (LC-MS) system was used to identify and distinguish oligostilbene diastereoisomers. A polyphenolic extract from Neobalanocarpus heimii known to be rich in oligostilbenes of various degrees of condensation was used as test material. Fourteen oligostilbenes were isolated from this extract on a fully automated semi-preparative HPLC system. Out of these, two pairs of dimers, one pair of trimers, two pairs of tetramers and a group of four tetramers with similar skeleton were identified as diastereoisomers. Their structures and configurations were established by spectroscopic methods. All isolated compounds were subjected to an LC-MS/MS to study their fragmentation patterns. The experiments were performed on a liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) with electrospray-ionization (ESI) interface in positive mode. MS/MS spectra of each pure compound were recorded by direct infusion in identical conditions and their product ion spectra were analysed. Some subtle yet significant differences were observed between the spectra of oligostilbenes from the various diastereoisomeric series.
A simple and direct method is developed for the determination of light Elements in atmospheric particulates by X-ray fluorescence spectrometry. Calibration standards for the light elements such as Al, Mg, K, Ca, etc are prepared by filtering real atmospheric particulates over variable time and subsequently standardizing them by Inductively Coupled Plasma-Mass Spectrometry(ICP-MS) or Atomic Absorption Spectrophotometry(AAS) analysis. The validity of this calibration method is tested by analyzing more than 100 aerosol samples, collected at urban(Seoul) and rural(Padori) sites over a two year period with this method and then comparing them with those by other accuracy proven methods such as AAS or ICP-MS: for all metals tested the results showed reasonably good agreements (R $\geq$ 0.95).
To establish the biosynthetic pathway of decursin in Angelica gigas Nakai, feeding experiment with stable isotope-labeled precursors were conducted. Umbelliferone and decursin were labeled with deuterium at C-3. The umbelliferone, the decursin, and other commercially available putative precursors, L-phenylalanine-ring-$d_5$ and trans-cinnamic acid-$d_7$, were fed to the hairy root culture of A. gigas. Each deuterated compound was incorporated into decursinol, decursinol angelate, and decursin as determined by mass spectrometric analysis. These findings confirmed the coumarin biosynthesis pathway sequence is composed of phenylalanine, cinnamic acid, umbelliferone, decursinol, and decursin.
Determinations of the isotopic contents of U$^{235}$ and U$^{238}$ in ten uranium samples containing 0.72-89.70 at % U$^{235}$ were carried out in two ways utilizing high resolution Ge (Li) gamma-ray spectrometer. One method is based upon the fact that the intensity of 185.5 kev gamma-ray vary linearly with U$^{235}$ content for a given geometry. Another method applied for the direct determination of the U$^{235}$ / U$^{238}$ isotopic ratios is the precision gamma-ray spectrometric analysis of reactor irradiated uranium samples after allowing a fixed cooling time for one hour. The results obtained by both methods well agree with the values calculated from the isotopic contents of highly enriched original uranium samples measured by mass spectrometer. The precision obtained was well below 5% for most of the isotopic ratios investigated.
The bark of Juglans mandshurica Maxim. was collected, extracted with acetone-$H_2O$ (7:3, v/v), fractioned with n-hexane, $CH_2Cl_2$ and EtOAc, then each fraction was freeze-dried to give some powders. A portion of the EtOAc (28.4 g) fraction was chromatographed on a Sephadex LH-20 column eluting with a series of MeOH-$H_2O$ and EtOH-hexane mixture. Four gallotannins, gallic acid (1), ellagic acid (2), 1,2,4,6-tetra-O-galloyl-${\beta}$-D-glucose (3) and 1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-${\beta}$-D-glucose (4), have been isolated from the EtOAc fraction Their structures were elucidated on the basis of chemical evidence and spectrometric analysis such as NMR and MS. The antioxidant activities on each fraction and the isolated gallotannins were evaluated by DPPH radical scavenging test.
자연 다이아몬드의 생성에 관한 여러가지 이론적인 검토를 해보았다. 특히 강조한 것은 다이아몬드의 생성이 기체에서 생긴다는 이론이다. 영구용 질양분석기의 검체안에서 분쇠 검출된 자연 다이아몬드내에 모인 기체에서 보아 다이아몬드의 생성에 대한 그 외계의 기체조성을 검토 제의한다. $200^{\circ}C$, 109 torr의 진공내에서 분쇠된 다이아몬드로부터 생성된 물질들은, 검출된 양의 순으로 나타낸다면, 물, 수소, 질소, 이산화탄소, 메탄, 일산화탄소, 아르곤 및 에틸알코올등이다. 열의학적으로 C-H-O-N 기체상의 조성의 검토는 가능한 다이아몬드의 생성조건에 관한 정보를 제공한다. 이미주어진 실험적 결과의 비교는 다이아몬드 생성에 관한 가능한 온도-압력조건이 주어진다.
Quantitation of N7-methyldeoxyguanosine (N7-MedG) produced in the in vitro N-methly-N-nitrosuourea (NMU) action on thymus DNA has been achieved by enzymatic degradation, liquid chromatoraphic separaphic separation and desorption chemical ionization tandem mass spectrometry. In conjunction with the resolving power HPLC in the separation of isomers, desorprion chemical ionization tandem mass spectrometry has utilized in determining modified nucleosides at low levels using a stable-isotope labled compound as an internal reforence. The quantitative estimation of N7-methyldeoxyguanosine was previously established by an independent HPLC analysis of methylated calf thymus DNA. A sensitive and specific methodogy for the quantitation of N7-MedG at the picomole level using HPLC combined with tandem mass spectrometry without radioisotope labeling process is presented. The potential of the liquid chromatoraphic tandem mass exposure to methlation agents in vitro.
As a synthetic analog of the naturally occurring hormone somatostatin, octreotide has been commercially formulated in poly(lactide-co-glycolide) (PLGA) microspheres for the treatment of acromegaly. The purpose of this study was to evaluate stability of octreotide acetate in aqueous solutions at various pH values and PLGA films. Stability-indicating reversed-phase high-performance liquid chromatographic method was developed with good precision and accuracy, and it was applied to the stability studies. In aqueous solutions at pH 2.5-9.0, the degradation of octreotide followed approximately first order kinetics and the most favorable stability was found at pH 4. In PLGA films, the formation of acylated octreotides reached approximately 55% of the released octreotides. Various acylated octreotides was structurally identified by liquid chromatography-mass spectrometric analysis.
Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) was used to observe folic acid and its derivatives such as tetrahydrofolate and 5-methyltetrahydrofolate in a vitamin tablet and in foods. Folic acid in a vitamin tablet was determined using angiotensin I as an internal reference. Tetrahydrofolic acid, 5-methyltetrahydrofolic acid, and an oxygenated folate were observed from a human blood sample using graphite plate. The results show that these mass spectrometric methods are useful for quickly obtaining a profile of folates.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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