• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제14권2호
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• pp.123-129
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• 2010

배아 줄기세포는 미분화상태에서 자가 재생을 유지할 수 있다. 자가 재생은 OCT4, SOX2와 NANOG와 같은 많은 인자들이 작용한다. 생쥐 배아 줄기세포에서 OCT4와 SOX2가 Nanog 프로모터에 결합하여 Nanog 유전자의 발현을 촉진한다는 사실은 생쥐 promoter에 관한 정밀분석으로 알려져 있다. 본 연구에서는 인간 Nanog promoter를 정밀 분석하기 위해 연속적인 결손 돌연변이를 가진 promoter-reporter construct를 제조하였다. Promoter의 최대 활성은 0.6 kb(-253/+365) promoter-reporter construct에서 발견되었으며, 이 construct에는 OCT4 및 SOX2의 결합부위가 포함된다. OCT4와 SOX2의 기여도를 확인하기 위하여 OCT4 및 SOX2의 결합부위에 자리 특이적 돌연변이를 유도하고 promoter 활성에 미치는 영향을 조사한 결과, OCT4나 SOX2 어느 한 군데라도 돌연변이가 존재하면 promoter 활성이 현저히 저해되었다. 본 연구 결과를 통해 인간 Nanog 유전자 발현에 있어 OCT4 및 SOX2가 필수적임을 직접적으로 확인할 수 있었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제11권6호
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• pp.1115-1119
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• 2001

Eight Escherichia coli cells with aerobic growth deflects were isolated by the insertion of ${\lambda}placMu53$, a hybrid bacteriophage of ${\lambda}$ and Mu, which created transcriptional fusion to lacZY. Two of these mutants, CLIO and CLl2, were irradiated with UV to obtain specialized transducing phages. The phages that took out the neighboring chromosomal DNA of the related gene responsible for deflective aerobic growth were identified. The in vivo cloned chromosomal sequence revealed that the mutated gene of CLIO was located at min 34.5 on the Escherichia coli linkage map and 1,599,515 on the physical map. The physical map indicated that there were 7 cistrons in the operon. We named this operon oxg10. The promoter sequence of oxg10 exhibited a possible binding site far SoxS, a transcriptional regulator that activates the transcription of various SoxRS regulon genes. Transferring the oxg10:: ${\lambda}placMu53$ mutation into the wild-type strain, RZ4500, resulted in the inhibition of normal aerobic growth, while the salute mutation in strain MO inhibited aerobic cell growth completely. The full operon sequences of oxg10 were cloned from the Excherichia coli genomic library. The mutated gene of CLl2 was identified to be a sucA gene encoding the ${\alpha}$-ketoglutarate dehydrogenase El component in the TCA cycle.