본 동물실험은 STZ로 유도한 C57BL/6에게 5% sodium butyrate를 급여했을 때 항당뇨 및 항염증 효과를 연구하고자 하였다. 본 연구에서 STZ로 당뇨를 유발한 마우스에게 5% sodium butyrate를 급여했을 때 체중과 식이섭취량에서는 크게 유의적 차이가 없음을 확인하였다(p<0.05). STZ에 의한 당뇨 쥐는 인슐린의 분비가 감소되면서 당대사의 불균형을 초래하며 간 등이 비대해진다고 알려져 있으나, 본 연구에서는 간의 장기 무게에서는 크게 실험군 간에 유의적인 차이가 없었다(p<0.05). 또한 비장과 흉선의 무게는 0.5% sodium butyrate 첨가 식이군에서 유의적으로 낮아짐을 알 수 있었다(p<0.05). 당뇨병은 염증 상태로서 고혈당으로 인하여 monocyte에서는 여러 염증성 사이토카인이 분비가 활성화된다. TNF-${\alpha}$, IL-6 등은 염증성 사이토카인으로서 혈관염증의 중요한 마커로 인식되고 있고, 당뇨병 환자들은 이러한 염증성 사이토카인이 높은 수준으로 활성화 된다. STZ 처리 시 마우스 혈청에서의 염증성 사이토카인의 분비 및 발현이 증가되었으나, 5% sodium butyrate를 급여했을 때 염증성 사이토카인의 분비 및 발현이 저해됨을 확인할 수 있었다. 본 연구는 sodium butyrate 보충은 당뇨병이 유발된 동물모델에서 혈청지질 농도 및 혈당 조절, 염증 상태를 개선에 다소간의 효과가 있는 것으로 나타났다. 이에 따라 당뇨병과 같은 만성적인 대사질환 개선에 sodium butyrate가 효과적인 식이인자가 될 것으로 생각된다. 그러나 앞으로 더 명확한 효능을 탐색하기 위해서 시료 첨가수준의 다각화 및 여러 가지 보완연구가 필요할 것으로 생각 된다.
쪽(Polygonum tinctortium) 세포에서 외래 단백질 발현을 검토하기 위하여 green fluorescent protein(GFP)가 내재하는 pCAMBIA1302를 형질 전환시켰으며 Western blot 분석에 의해 GFP의 발현을 확인하였다. Sodium butyrate가 GFP생성에 미치는 효과를 검토한 결과, 10 mM에서 세포성장이 지연되었으며, 15 mM 이상에서는 정지되었다. 세포 내 GFP 생성량은 세포 접종 후 3일째 5 mM sodium butyrate를 첨가하였을 때가 0일째 처리에 비해 120% 증가하였다. 또한 접종후 3일 후 5 mM의 sodium butyrate를 처리한 경우가 10 mM의 경우보다 GFP의 수율이 50% 증가하였다. 본 실험을 통하여 세포 접종 후 3일째, 5 mM의 농도로 처리한 sodium butyrate가 외래 단백질의 발현을 효과적으로 증가시키는 결과를 확인하였다.
본 연구에서는 재조합 단백질 IDS의 생산성을 향상시키기 위한 방법으로 혈청이 첨가되거나 첨가되지 않은 배지에서 세포를 배양하는 동안 sodium butyrate를 첨가하였다. 두 배양 배지에서 모두 비록 세포 농도나 생존률이 감소되긴 했지만 생산성에서 상당히 높은 효과를 보였다.
Butyrate는 탄소사슬이 짧은 지방산 중 하나로 소화되지 않은 식이성 섬유의 혐기적 발효결과 포유동물의 위장관내에 millimolar 농도로 유지되며 대장의 상피세포에서 흡수되어 energy원으로 사용된다. 70%정도 confluent하게 자란 사람의 대장암세포주인 HT29 cell에 5mM sodium butyrate를 시간별로 처리하고 세포의 생존율, 암세포의 분화정도의 biomarker로 알려진 alkaline phosphatase 및 PLC-rl의 발현정도를 측정하였으며 sphingolipid의 생합성 및 ceramidase 활성도 측정하였다. Sodium butyrate 처리는 성장중인 HT29 cell의 부착을 저해하여 처리 1일째부터 세포수가 감소하였고 형질막 효소인 alkaline phosphatase의 발현을 증가시켰으며 PLC-${\gamma}$의 발현을 감소시켰다. 또한, 복합 sphingolipid들의 생합성을 측정한 결과, 세포성장의 저해와 함께 sphingomyelin은 2일째부터 감소하였으며, galactosyl ceramide는 1일째부터 급속히 감소하였다. 그러나 ceramide의 경우, 1일째는 처리하기 전보다 680dpm/mg protein정도 증가하였으며 2일째에는 다시 급속히 감소하였다. 또한 butyrate처리에 의하여 HT29 cell의 acid ceramidase와 neutral ceramidase활성이 저해됨을 관찰하였는데 그 결과 ceramide함량이 초기에 증가된 것으로 생각된다. 본 실험결과들로부터 HT29 cell의 sodium butyrate처리는 세포분화 또는 세포성장저해를 가져오는데 이와 함께 초기의 ceramide함량 및 alkaline phosphatase활성의 증가와 galactosylceramide함량 및 LC-rl 발현의 감소현상이 동반됨을 알 수 있다.
대표적인 histone deacetylase inhibitor 저해제의 일종일 sodium butyrate에 의한 인체백혈병 U937세포의 증식 억제에 관한 기전 연구를 세포주기 조절 측면에서 조사하였다. MTT assay 및 flow cytometry 분석을 통하여 sodium butyrate의 처리 농도 증가에 따른 U937 세포의 증식억제는 세포주기 G1 arrest 및 apoptosis 유발에 의한 것임을 확인하였다. RT-PCR및 Western blotting 결과에서 sodium butrate에 의한 G1 arrest는 세포주기 G1기에서 S기로의 진입에 중요한 역할을 하는 cyclin D1, E, A, cyclin-dependent kinase (Cdk) 4 및 Cdk6발현의 저해와 p21 및 p27과 같은 Cdk inhibitor의 발현 증가와 연관성이 있었다. Sodium butyrate는 또한 retinoblastoma protein (pRB)및 p130 단백질의 인산화를 저해시켰으나, S기 진행에 중요한 전사조절인자인 E2F-1 및 E2F-4의 의 발현에는 큰 영향이 없었다. 그러나 sodium butyrate에 의한 pRB 및 p130단백질의 인산화 저해는 pRB와 E2F-1및 p130과 E2F-4와의 결합력을 증사시켰다. 본 연구의 결과는 U937세포의 증식억제에 pRB/p130 인산화 억제 및 Cdk inhibitors의 발현 증가가 중요한 역할을 하고있음을 보여주는 것으로, sodium butyrate의 항암기전 이해에 중요한 자료가 될 것이다.
Human cytotoxic T-lymphocyte antigen 4-immunoglobulin (hCTLA4Ig), an immunosuppressive agent, was expressed in transgenic rice cells using RAmy3D promoter and RAmy1A signal peptide for the inducible production and secretion into culture media by sugar depletion. In this study, sodium butyrate was used as a small molecular enhancer (SME) to enhance the production of hCTLA4Ig in transgenic rice cell suspension cultures. When 1 mM sodium butyrate was added in sugar-free media, relative viability was not reduced, while the productivity was improved 1.3-fold. In addition, by supplementing 87 mM sodium pyruvate as an alternative energy source during the production phase, death rate of the cells was decreased. When sodium pyruvate was not added, most cells became dead at day 6. However, by adding sodium pyruvate, 18% of viability can be maintained until day 10 and the production of hCTLA4Ig was enhanced 1.4-fold. When the combination of sodium pyruvate and sodium butyrate at optimum concentrations was added, the highest viability and hCTLA4Ig production could be obtained. The highest level of hCTLA4Ig reached up to 35 mg/L at day 10.
The study aimed to investigate the effects of supplemented sodium butyrate on the in vitro rumen fermentation and growth performance of Hanwoo calves. In total, four treatments were employed according to the sodium butyrate levels: no addition (control), an addition of 0.1% (treatment 1), an addition of 0.3% (treatment 2), and an addition of 0.5% (treatment 3). After 48 hours of fermentation, the ruminal pH was found to be higher in T1 than in C. Total volatile fatty acids were significantly higher in T2 and T3 than in C. The ratio of acetate and propionate was significantly lower in T1 and T3 than in C. In this study, the optimal concentration to promote rumen fermentation was found to be 0.3%, i.e., T2, and an experiment on Hanwoo calves at a farm was conducted. However, there were no significant differences between the treatment groups in terms of the daily weight gain, feed conversion ratio, and final body weight in the feeding experiment. Also, there were no significant differences in the body length, withers height, and height at hip cross between the control and the treatment groups. The addition of 0.3% sodium butyrate was most effective at promoting in vitro rumen fermentation, but it did not significantly affect the growth performance when fed to Hanwoo calves. This indicates that the addition of sodium butyrate improved rumen fermentation but did not have a growth-promoting effect. Future studies need to compare growth and carcass performance outcomes to confirm long-term effects.
The essential operating parameters in virus vaccine production are multiplicity of infection (MOI), harvest time, and infection time. Stimulating agents also can be applied in order to improve vaccine productivity further. We investigated the optimum operating conditions in porcine transmissible gastroenteritis virus (TGEV) vaccine production and the applicability of sodium butyrate (NaBu) as a stimulating agents for the improvement of vaccine productivity. The optimum MOI, infection time, and harvest time for high production of TGEV by swine testicle (ST) cells were found to be 0.0001 pfu/cell, 3 day after cell inoculation, and 24 hpi, respectively. NaBu is known as a histone deacetylase inhibitor that has been widely used for the high expression of recombinant protein using mammalian cells and for the enhancement of virus propagation. So we tried to examine the potential of NaBu as a stimulating agent and to determine the optimum concentration by comparing TGEV titers with different range of NaBu concentration. TGEV titer with 5 mM NaBu was 1.5 times higher than control. Therefore, we concluded that NaBu can be a promising agent for stimulating various vaccine production including TGEV and the optimum NaBu concentration for TGEV production was determined to be 5 mM.
Sodium butyrate (NaBt)는 장에서 탄수화물대사로부터 생겨나는 짧은 천연지방산 사슬로 다양한 인간 암세포들 에게서 강력한 항암효능을 나타냄이 보고된 바 있지만 자세한 기전은 아직 알려져 있지 않다. 이 논문에서 우리는 NaBt가 주요 세포부착분자이면서 종양억제인자의 일종인 E-cadherin의 발현을 세포-특이적으로 촉진하는 기전을 연구하였다. 또한 NaBt는 E-eadherin의 발현을 촉진하는 것으로 알려진 p21의 발현도 증가시켰지만, NaBt에 의하여 증가한 p21은 E-cadherin의 활성화와 관련이 없음이 밝혀졌다. 그 대신에 NaBt는 CCAAT-box를 통한 E-cadherin 유전자의 프로모터 활성을 증가시킴으로써 E-cadherin의 발현을 전사수준에서 촉진하는 것 같다. 이렇게 NaBt에 의하여 증가된 E-cadherin은 주로 세포간 접촉면에 위치하면서 Hep3B 세포를 더 분화된 형태로 유도하여 NaBt의 항암활성이 나타나는 것 같다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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