The gold standard method for diagnosis of tuberculosis is the isolation of Mycobacterium tuberculosis through culture, but there is a probability of cross-contamination in simultaneous cultures of samples causing false-positives. This can result in delayed treatment of the underlying disease and drug side effects. In this paper, we reviewed studies on false-positive cultures of M. tuberculosis. Rate of occurrence, effective factors, and extent of false-positives were analyzed. Ways to identify and reduce the false-positives and management of them are critical for all laboratories. In most cases, false-positive is occurring in cases with only one positive culture but negative direct smear. The three most crucial factors in this regard are inappropriate technician function, contamination of reagents, and aerosol production. Thus, to reduce false-positives, good laboratory practice, as well as use of whole-genome sequencing or genotyping of all positive culture samples with a robust, extra pure method and rapid response, are essential for minimizing the rate of false-positives. Indeed, molecular approaches and epidemiological surveillance can provide a valuable tool besides culture to identify possible false positives.
Minor trauma to the uterine cervix is supposed to induce local immunity to prevent cervical lesions caused by human papillomavirus (HPV) infection. This study aimed to investigate the local cervical immunity in women with low grade squamous intraepithelial lesion (LSIL) and effects of abrasion after cryosurgery or Pap smear. One hundred women with LSIL and known results of HPV detection were recruited. HPV positive women were randomly divided according to abrasion into cryotherapy and Pap smear observation groups. Cervical tissues and cervico-vaginal lavage (CVL) were collected at 6 and 12 months after allocation. The levels of cytokines at first recruitment were compared with cytokine levels at 6 months after abrasions. The mRNA of IFN-${\gamma}$, TNF-${\alpha}$ and IL-10 in cervical tissues and these cytokines secreted in CVL were determined using real time PCR and ELISA, respectively. Anti-HPV16 IgG and IgA antibodies in CVL were assessed by western blotting. At first recruitment of women with LSIL (100 cases), IL-10 mRNA and cytokine in HPV positive group (60 cases) was significantly higher than negative group (40 cases). IFN-${\gamma}$ and TNF-${\alpha}$ mRNA level in both groups were comparable but their secretions in CVL were significantly increased in HPV negative group. After abrasion for 6 months in HPV-positive women, all mRNA and secreted cytokines were changed, but no significant difference was observed between cryotherapy and observation groups. When individuals were compared between first recruitment and after abrasion for 6 months, IFN-${\gamma}$ mRNA and anti-HPV16 L1 IgA antibodies were significantly increased in the cryotherapy group. The results suggest that modulation of local cervical immunities by abrasion might promote different effects in clearance of HPV-related cytological abnormalities.
Background: To evaluate HPV testing by Hybrid Capture II (HCII) in conjunction with cytology in detecting the residual/recurrence disease after treatment of high-grade cervical intraepithelial neoplasia (CIN II-III) with loop electrosurgical excision procedure (LEEP). Materials and Methods: A retrospective review of 158 patients with histologically confirmed CIN II-III who underwent LEEP between January 2011 and October 2012 was conducted. Post-treatment control was scheduled at the 3rd, 6th, 12th and 18th month. All patients were followed up by Pap smear and HR-HPV genotype and viral load testing. Results: Pre-treatment, HR-HPV DNA, was detected in all specimens of the patients. At follow-up, 25 patients were diagnosed as the residual/recurrent disease during the FU visit, among whom, 16 patients with positive margin: 13 patients (52%) with HR-HPV DNA+/cytology+, 2 patients (8%) with HR-HPV DNA+/cytology-, 1 patient (4%) with cytology+/HR-HPV DNA-; 9 patients with clean margin - 5 patients (55.6%) with HR-HPV DNA+/cytology+; 2 patients (22.2%) with HRHPV DNA+/cytology-, 2 patients (22.2%) with cytology+/HR-HPV DNA-. None of them persisting HR-HPV DNA-/cytology-with positive or negative margin was identified as the residual/recurrent disease. The majority of residual/recurrent disease was detected at the 12th and 18th month FU, and there was almost no difference in the sensitivity and negative predictive value (NPV) between at the 3rd month and the 6th month FU visits. 14 residual/recurrence disease (14/46:30.4%) had pre-treatment high viral load (>5 000 RUL/PC) and 11 (11/112, 9.8%) with pre-treatment low viral load, P<0.05. Conclusions: (1) The persistence HR-HPV DNA is the root cause of the residual/recurrent disease for the women treated for high-grade CIN; the pre-treatment viral load and margin can be seen as the predictor. (2) The FU visit beginning at the 6th month post-treatment and lasting at least 24 months with the combination of cytology and HPV testing. (3) Patients with high pre-treatment HPV load, which is considered as one risk of developing the residual/recurrent disease, should be paid more attention (especially above 500RUL/PC) to by clinicians.
Urine cytology is an important screening tool for urinary tract neoplasms. Liquid-based preparation methods, such as $ThinPrep^{(R)}$, have been introduced for non-gynecological samples. We aimed to assess the diagnostic accuracy of liquid-based preparations in urine cytology by comparing the results of the conventional Cytospin preparation method for the same samples. A total of 236 cases subject to urine cytology were enrolled in this study from January 2005 to December 2005. All cases were subjected to cystoscopy and if a malignancy was suspected, a biopsy was performed. Urine cytology slides were made using the $ThinPrep^{(R)}$ preparation method and the conventional Cytospin and/or direct smear method from the individual samples. The results of urine cytology were compared with the final cystoscopic or histological diagnoses. We analyzed the sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value and accuracy of both cytology preparation methods. A total of 236 slides made using the liquid based method were satisfactory for slide quality, whereas 5 slides (2.1%) prepared by conventional methods were unsatisfactory because of air-drying, a thick smear, or a bloody or inflammatory background. The $ThinPrep^{(R)}$ method showed 53.1% sensitivity, 92.6% specificity, a 92,6% positive predictive value, a 94.1% negative predictive value and 85,6% accuracy, while the conventional method showed 51% sensitivity, 98.4% specificity, a 92.6% positive predictive value, a 98.4% negative predictive value and 88,6% accuracy. Although the diagnostic values were equivalent between the use of the two methods, the quality of the cytology slides and the time consumed during the microscopic examination for a diagnosis were superior for the $ThinPrep^{(R)}$ method than for the conventional method. In conclusion, our limited studies have shown that the use of the liquid based preparation method is beneficial to improve the quality of slides and reduce the duration for a microscopic examination, but did not show better sensitivity, accuracy and predictive values.
The endemic status of clonorchiasis and metagonimiasis along the Geum gang (River) in Okcheon-gun (County) in Korea was examined. From February to December 7000, stools of total 1,081 inhabitants living in 5 villages were examined. Each stool specimen was examined by both the cellophane thick smear method and the formalin-ether sedimentation technique. Egg-positive cases were further analyzed by Stoll's egg-counting technique. and praziquantel was administered to positive cases. The egg-positive rates for Clonorchis sinensis and Metafonimus species were 9.3% and 5.5%, respectively, and the double infection rate was 3.5%. The numbers of eggs per gram (EPG) of feces of C. sinensis and Metafoninus sp. were $918{\pm}1,463$ and $711{\pm}947$, respectively. The egg-positive rates for C. sinensis and Metagoninus sp. in the riverside area were 14.2% and 8.4%, respectively, which were significantly higher than those of the inland area (3.2% and 1.7%. respectively). The egg-positive rates of C. sinensis and Metagoninus sp. in males (16.7% and 10.0%) were significantly higher than those of females (3.5% and 1.8%) However, there were no significant differences of EPG values between localities and sexes. The prevalence of clonorchiasis and metagonimiasis in this survey was significantly lower than that in the previous reports. However. there is still a high prevalence of infection with C. sinensis and Metagoninus sp. in this region. especially in the riverside area.
This study was conducted to assess the predictive value of p-glycoprotein (p-gp) and p53 immunoexpression in human papillomavirus (HPV) infected cases of cervical dysplasia. Expression of both p-gp and p53 proteins was detected in cervical smears from 177 squamous intraepithelial lesions (SIL) cases along with 183 "atypical squamous cells of unknown significance" (ASCUS) and 150 normal cases. HPV 16 and 18 infection was detected by polymerase chain reaction using type-specific primers for HPV sub-types. There were no significant detectable p53 and p-gp expression in the normal cervix smears (p>0.05). In the ASCUS group 10 cases were positive for both p53 and p-gp immunoreactivity. In cervical dysplasia cases, p53 was positive in 86 (48.58%) while p-gp was positive in 93 (52.54%) and the two markers showed a highly significant correlation (r=0.92, p<0.001). Expression of p53 and p-gp was associated with grade of SIL (p<0.001). A positive correlation between the presence of HPV and expression of proteins p53 and p-gp in smears of patients with cervical lesions was also noted (p<0.001). Thus, p53 and p-gp immunostaining in cervical smears may act as an auxiliary biomarker for detection of HPV-associated cervical lesions. Additionally, a significant positive correlation between ascending grades of SIL and labeling indices of markers suggests that p53 and p-gp can be used as an adjunct to cytomorphological interpretation of conventional cervical Pap smears.
The prevalence of liver and intestinal fluke infections was determined by surveying inhabitants of Hengxuan, Fusui, and Shanglin villages which were known to be endemic for liver flukes in Guangxi, China in May 2010. A total of 718 people were examined for helminth eggs by the Kato-Katz thick smear technique, ultrasonography, immunoaffinity chromatography, and DNA sequencing. The overall egg positive rate was found to be 59.6% (28.0-70.6%) that included mixed infections with liver and intestinal flukes. Cases showing higher than 20,000 eggs per gram of feces (EPG) were detected between 1.3% and 16.2%. Ultrasonographic findings exhibited overall 28.2% (72 of 255 cases) dilatation rate of the intrahepatic bile duct. Clonorchis sinensis infection was detected serologically in 88.3% (38 of 43 cases) among C. sinensis egg positive subjects by the immunoaffinity chromatography using a specific antigen for C. sinensis. For differential diagnosis of the liver and intestinal flukes, more precise PCR and nucleotide sequencing for copro-DNA were performed for 46 egg positive cases. Mixed infections with C. sinensis and Metagonimus yokogawai were detected in 8 of 46 egg positive cases, whereas 29 specimens were positive for Haplorchis taichui. Ultrasonographic findings and immunoaffinity chromatography results showed usefulness, even in a limited way, in figuring out of the liver fluke endemicity.
The objective of this study was to ascertain whether or not the high-risk human papillomavirus (HPV) test, when coupled with Papanicolaou (Pap) smears, would prove useful in the screening and management of patients in whom abnormal Pap smear results had been obtained. Concomitant high-risk HPV detection using the hybrid capture II test and colposcopy with a Pap smear were performed with 176 patients, all of whom had been screened for both cervical carcinoma and precancerous lesions. We concomitantly performed colposcopies on these patients. Upon the follow-ups, the histologic diagnoses of these patients were confirmed via either biopsy or hysterectomy. The rate of high-risk HPV detection was correlated with cytologic diagnoses and colposcopic findings. The group composed of the high-risk HPV-positive ASCUS patients exhibited a 55.7% rate of cervical intraepithelial neoplasia (CIN), a significantly higher rate than the 7.5% result obtained in the high-risk HPV-negative ASCUS group. HPV test showed high sensitivity (87%) and low specificity (62.6%) in detection of CIN and colposcopy also showed high sensitivity (88%) and low specificity (22%). Any combination of these tests improve sensitivity, but not specificity. High-risk HPV tests, when coupled with Pap smears, constituted a useful triage approach with regard to colposcopy-directed biopsies in patients in whom a cytologic diagnosis of ASCUS had been rendered.
1997년 7월과 8월에 경기도 김포군 통진중학교 축구부 부원인 15세 남자 환자 두 명이 각각 발열을 주소로 강남 성모병원에 입원하여 말초혈액 박층 도말검사강 삼일열 말라리아로 진단받고 chloroquine과 primaquine으로 치료받았다. 이들은 외국여행이나 마약사용 경험이 없었으며. 학교 내 축구부 숙소에서 합숙생활을 하고 있었다. 환자들은 합숙하는 친구 중에 발열환자가 더 있 다고 주장하였으므로 말라리아가 집단으로 발생하였을 가능성이 있다고 생각하고. 축구부원에 대한 역학 조사를 실시하였다. 합숙소에서 생활하는 학생들은 총 57명이었다. 문진 결과상 1주일 이상 지속되는 발열 과거력을 가진 사람은 없었다. 진찰 결과 이번에 환자이었던 1명에서만 비장 종대가 관찰되었고. 환자로 입원했던 2명에서 IFAT 항체가는 각각 1: 256 및 1: 2,048이었다 (양성 기준 항체가 1: 32). 말라리아 병력이 없었던 사람 중에는 IFAT 항체가가 1: 64이었던 1명을 제외하고 모두 음성을 나타냈다. 말초혈액 박층도말 검사도 모두 음성이었다. 경기도 김포군에 위치한 통진중학교 축구부 학생 두 명에서 거의 동시에 발생한 삼일열 말라리아는 이 지역에서 전파되어 감염된 것은 아니라고 생각된다.
Background: Anal intraepithelial lesions (AIL) are likely to represent a precursor for anal cancer. Women infected with human immunodeficiency virus (HIV) may be at higher risk of anal cancer but a screening program for AIL still is not routinely recommended. We here studied the relationship of dysplastic cells from cervical and anal cytology in HIV-infected women. Materials and Methods: This prospective study was conducted in Prapokklao Hospital, Thailand during 2013-2014. Five hundred and ninety nine HIV-infected women were recruited. Participants who had cytological reports of equally or over "abnormal squamous/glandular cells of undetermined significance" (ASC-US) were classified as abnormal cervical or anal cytology. Descriptive statistics and logistic regression analysis were used to evaluate correlations between groups. Results: HIV-infected women with abnormal cervical cytology had 3.8 times more risk (adjusted odd ratio 3.846, 95% confidence interval 1.247-11.862, p-value. 019) for abnormal anal cytology. The major problem of the anal Pap test in this study was the inadequacy of the collected specimens for evaluation (34.4%, 206/599). Sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value and accuracy of cervical and anal Pap tests were 93.9/12.0, 87.3/96.9, 39.7/21.4, 99.4/94.1 and 88.1/91.4 percent, respectively. Conclusions: Abnormal cervical cytology in HIV-infected women indicates elevated risk for abnormal anal cytology. The sensitivity of the anal Pap test for detection of AIL 2/3 in HIV-infected women was quite low while specificity was excellent. Inadequacy of specimen collection for evaluation was a major limitation. Improvement of sample collection is recommended for future investigations.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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