To develop effective skin whitening agents, we tested natural herbal extracts for their melanogenic inhibitory activities. Sedum samentosum was selected for its inhibitory effect on melanogenesis in B16 melanoma cells. Ethanolic extract of S. samentosum (SSE) was evaluated for antioxidative effect and tyrosinase inhibitory activity of melanogenesis. We investigated the changes in protein level and mRNA level of tyrosinase, tyrosinase related protein (TRP)-1 and TRP-2 by using western blotting and RT-PCR, respectively. SSE showed scavenging activities of free radicals and reactive oxygen species (ROS) with the $IC_{50}$ of 342.7 $\mug/ml$ against 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical and 64.69 $\mug/ml$ against superoxide radicals in the xanthine/xanthine oxidase system, respectively. SSE treatment suppressed the biosynthesis of melanin up to 46% and reduced tyrosinase activity up to 51% at 100 $\mug/ml$ in B16 melanoma cells. The tyrosinase activity and tyrosinase expression in B16 melanoma cells were reduced in a dose-dependent manner by SSE. Also, SSE was able to significantly inhibit tyrosinase and TRP-1 expression in mRNA level. These results suggest that SSE inhibited melanin production which may be dependent on tyrosinase activity and expression in B16 melanoma cells, and an effective whitening agent for the skin.
Marine resources have various biological activities and their constituents are more novel than those of land organisms. Several biologically active constituents have been found in marine organisms. Recently, many studies have reported that marine animals (MAs) can be used as functional ingredients in functional foods or nutraceutical due to their health benefits. However, no studies have extensively investigated the cosmeceutical activities of MAs extracts. Here, 70% ethanol extracts of 38 MAs were investigated for their activities of whitening and anti-aging properties for use as materials in novel cosmeceuticals. Anti-aging activities were determined by skin aging-related enzyme activities (anti-collagenase, anti-elastase, anti-hyaluronidase) and whitening activities (anti-tyrosinase, anti-3,4-dihydroxyl-L-phenylalanine [DOPA] oxidation) evaluated by colorimetric method. Among the 38 MAs, we found that Urechis unicinctus and Petrosia corticata extracts showed the strongest inhibitory effects against tyrosinase and DOPA oxidation, respectively. Our results additionally showed that Protankyra bidentata extract might provide a major source of anti-hyaluronidase and anti-elastase; meanwhile, anti-collagenase effects were similar in most MAs. Overall, these results suggest that extracts of marine animals have potential as a tyrosinase, collagenase, elastase, and hyaluronidase inhibitors. Taken together, MA resources could be considered as a novel cosmeceutical agent to be applied in cosmetic industry.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Gastrodia elata Blume (GEB), a traditional herbal medicine, has been used to treat a wide range of neurological disorders (e.g., paralysis and stroke) and skin problems (e.g., atopic dermatitis and eczema) in oriental medicine. This study was designed to investigate whether GEB extract inhibits melanogenesis activity in murine B16F10 melanoma. MATERIALS/METHOD: Murine B16F10 cells were treated with 0-5 mg/mL of GEB extract or $400{\mu}g/mL$ arbutin (a positive control) for 72 h after treatment with/without 200 nM alpha-melanocyte stimulating hormone (${\alpha}$-MSH) for 24 h. Melanin concentration, tyrosinase activity, mRNA levels, and protein expression of microphthalmia-associated transcription factor (MITF), tyrosinase, tyrosinase-related protein (Trp)1, and Trp2 were analyzed in ${\alpha}$-MSH-untreated and ${\alpha}$-MSH-treated B16F10 cells. RESULTS: Treatment with 200 nM ${\alpha}$-MSH induced almost 2-fold melanin synthesis and tyrosinase activity along with increased mRNA levels and protein expression of MITF, tyrosinase, Trp1 and Trp2. Irrespective of ${\alpha}$-MSH stimulation, GEB extract at doses of 0.5-5 mg/mL inhibited all these markers for skin whitening in a dose-dependent manner. While lower doses (0.5-1 mg/mL) of GEB extract generally had a tendency to decrease melanogenesis, tyrosinase activity, and mRNA levels and protein expression of MITF, tyrosinase, Trp1, and Trp2, higher doses (2-5 mg/mL) significantly inhibited all these markers in ${\alpha}$-MSH-treated B16F10 cells in a dose-dependent manner. These inhibitory effects of the GEB extract at higher concentrations were similar to those of $400{\mu}g/mL$ arbutin, a well-known depigmenting agent. CONCLUSIONS: These results suggest that GEB displays dose-dependent inhibition of melanin synthesis through the suppression of tyrosinase activity as well as molecular levels of MITF, tyrosinase, Trp1, and Trp2 in murine B16F10 melanoma. Therefore, GEB may be an effective and natural skin-whitening agent for application in the cosmetic industry.
Kang, Dong Woo;Kim, Pan Gil;Kim, Sam Woong;Bang, Kyu Ho;Kim, Chul Ho;Lee, Sang Won;Gal, Sang Wan
Journal of Life Science
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v.31
no.7
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pp.654-661
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2021
In this study, in order to isolate excellent whitening agents from fungal cultural broth, various fungi were collected from wild areas in South Korea and then screened for tyrosinase inhibition activity, as tyrosinase is a precursor for the biosynthesis of melanin in regulating skin color. A fungus strain that inhibits tyrosinase activity has been identified and confirmed as Trichoderma viridescens (later renamed T. viridescens SW-1) via ITS sequencing. In T. viridescens SW-1, tyrosinase inhibitory activity was strongest on day three of culture. A 5% culture broth showed a tyrosinase inhibitory activity greater than 90% and exhibited high thermostability on day three. At 10% culture broth, the accumulations of intra- and extracellular melanin were inhibited above 27.1% and 7.5%, respectively. In summary, the physical and functional properties of the tyrosinase inhibitory substances of T. viridescens SW-1 included high levels of inhibition of melanin synthesis and antioxidative activity as well as thermostability. Therefore, we suggest that the whitening substance identified from the cultural broth of T. viridescens SW-1 has potential for application as a functional cosmetic ingredient.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.20
no.3
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pp.71-81
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2007
Objective : In this study, herbal medicine(GJE, Gardenia jasminoides Ellis; HCT, Houttuynia cordata Thunb.; CIL, Chrysanthemum indicum Linne; PMS,Paeonia moutan Sims, P. subfruticosa Makino; APL, Agrimonia pilosa Ledebour) were screened for their inhibitory activities against Tyrosinase and PMA plus A23187-induced $TNF-{\alpha}$, IL-6, IL-8 productions in HMC-1 cells to reveal their skin -whitening and anti-allergic effect. Method : To investigate Tyrosinase inhibition we treated Mushroom Tyrosinase(Fluka, 93898) $10{\mu}{\ell}$ and 7.5mM Tyrosine (Sigma, T3754) $20{\mu}{\ell}$ with 80% ethanol medicine extracts. Then we observed 96well micro plate extinction at 490nm. In the next experiment, to investigate Anti-allergic effect we blended cultured Human Mast Cells(HMC-1) with medicine extracts. We treated the blended solution with Phorbol 12-myristate 13-acetate(PMA) and A23187, then observed $TNF-{\alpha}$, IL-6, IL-8 by ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) at 450nm. Results : In inhibiting Tyrosinase the results are as follows. 1. We observed 22% inhibition of Mushroom Tyrosinase at $500{\mu}g/m{\ell}$ concentration of GJE extracts. 2. We also could observe that the decreased Mushroom Tyrosinase activities in HCT, CIL extracts. In inhibiing $TNF-{\alpha}$, IL-6, IL-8 productions in HMC-1 cells the results are as follows. 1. Of the extracts examined, HCT, PMS, APL extracts showed over 50% inhibitions of Cytokines at $200{\mu}g/m{\ell}$ concentration. 2. In particular, APL extracts showed the best inhibitory effect on Cytokine productions in a dose-dependent manner. Conclusion : These results suggest that GJE extracts contributes to the anti melanin activities and represent a potential source of whitening agent. Thus these herbal medicines suggest novel drugs on anti-allergic effects.
In this study, peptides were isolated from Crassostrea gigas using an ultrasonification process at $40^{\circ}C$. The yield of the peptides was greater than 34%, and their cytotoxicity was found to be less than 22.8% against several cell lines that were treated with the extracts at a dose of 1.0 mg/mL. In addition, the tyrosinase inhibitory and melanin synthesis of the peptides isolated from Crassostrea gigas were also evaluated to determine if they could be used as a potential cosmetic agent. The peptides were found to significantly inhibit the melanin synthesis of the clone M-3 cell line by up to 62.7%. The inhibitory activities of the tyrosinase were observed 34.51% in ascorbic acid, 42.49% in extract with the ultrasonification at $40^{\circ}C$ and 35.37% in $40^{\circ}C$ extract at 1.0 mg/mL concentration, respectively. Finally, when samples were treated with the peptide extracts at a concentration of 0.6 mg/mL, PGE2 expression was significantly decreased. Taken together, these results indicate that Crassostrea gigas may be a source of cosmetic agents capable of improving physiological hyperpigmenting and immuno-modulating skin disorders.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.17
no.2
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pp.48-58
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2004
Objective: This study was performed to investigate the depigmentation effects of the extracts of Kamikwibi-Tang. Methods Inhibition of tyrosinase activity, melanin production & cell viability in cultured B16 melanoma cells, UV screen and cytoprotective effects on PC12 cells injured by hydrogen peroxide were measured. Results: The extracts of Kamikwibi-Tang did not have any inhibitory effects on tyrosinase activity and did not show any inhibitory effects on melanin production in melanoma cells and also did not have any inhibitory effects on UV screen. But the extracts showed high cytoprotective effects on PC12 cells injured by hydrogen peroxide. Conclusion : These results suggest that Kamikwibi-Tang indrectly inhibits melanin biosynthesis which is involved in hyperpigmentation and could be used as a whitening agent for the skin.
Tyrosinase is an important enzyme involved in the transition steps from tyrosine to melanin. Inhibition of the tyrosinase activity could block melanin formation from tyrosine and thus prevent melanin pigmentation on skin. This may contribute to the development of new whitening agent that would be useful in the prevention of pigmentation. in this study, we isolated tyrosinase inhibitory compound from BuOH fraction of Potentilla bifurca L. var. glabrata Lehm by activity guided fractionation method. Based on spectroscopic data, the active compound was identified as a quercetin 4"-O- glucopyranoside.
Lysosome organelle extract (LOE) was derived from egg whites. The lysosome is an intracellular organelle that contains several hydrolysis enzymes. Previous studies have reported that LOE performs important functions, such as melanin de-colorization and anti-melanin production in B16F10 melanoma cells. However, its principal molecular and cellular mechanisms have not been elucidated till date. In non-cytotoxic conditions, LOE significantly inhibited α-MSH induced melanin synthesis of murine B16F10 cells. The anti-melanogenic activity of LOE was mediated by suppressing the mRNA expression of tyrosinase enzyme, tyrosinase related protein-1/2 (TRP-1/2), and microphthalmia-associated transcription factor (MITF) genes. By performing western blot analysis, we found that LOE significantly attenuated melanogenesis. In this case, LOE helped in increasing extracellular receptor kinase (ERK) phosphorylation in α-MSH induced B16F10 cells. Furthermore, MITF is found to be a key regulatory transcription factor in melanin synthesis; it was down-regulated by LOE through ERK phosphorylation. In this experiment, PD98059 (MEK inhibitor) was used to check whether LOE directly regulated the activity of ERK. Although LOE exerted inhibitory effect on melanin synthesis, we could not observe this effect in PD98059-treated α-MSH induced B16F10. These results strongly indicate that LOE is related to ERK activation and MITF degradation in anti-skin pigmentation. Hence, LOE should be utilized as a whitening agent of skin in the near future.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.27
no.4
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pp.559-567
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2010
In this study, the antioxidative effect, cellular protective effect and inhibitory effect on tyrosinase of Cosmos bipinnatus extracts were investigated. The ethyl acetate fraction of Cosmos bipinnatus flower extract ($11.48\;{\mu}g$/mL) showed more excellent free radical (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical, DPPH) scavenging activity (FSC50) than those of leaf and stem extracts ($17.45\;{\mu}g$/mL). Reactive oxygen species (ROS) scavenging activity (OSC50) of Cosmos bipinnatus extracts on ROS generated in $Fe^{3+}$-EDTA/H2O2 system were investigated using the luminol-dependent chemiluminescence assay. The ethyl acetate fraction of Cosmos bipinnatus flower extract ($0.56\;{\mu}g$/mL) showed 3 times more excellent ROS scavenging activity than L-ascorbic acid ($1.50\;{\mu}g$/mL). The protective effects of the ethyl acetate fractions of extracts from different parts of Cosmos bipinnatus on the rose-bengal sensitized photohemolysis of human erythrocytes were investigated. The ethyl acetate fractions of leaf and stem extract and flower extracts suppressed photohemolysis in a concentration dependent manner ($10\sim50\;{\mu}g$/mL). The inhibitory effect of ethyl acetate fraction of Cosmos bipinnatus flower extract ($62.75\;{\mu}g$/mL) on tyrosinase was investigated to assess the whitening efficacy. The ethyl acetate fraction of Cosmos bipinnatus flower extract showed 3.5 times higher tyrosinase inhibitory effect than arbutin ($226.88\;{\mu}g$/mL) known as an effective whitening agent. These results indicate that fractions of Cosmos bipinnatus extracts can function as antioxidants in biological systems, particularly skin exposed to UV radiation by scavenging $^1O2$ and other ROS, and protect cellular membranes against ROS. Fractions of Cosmos bipinnatus extracts can be applicable to new functional cosmetics for antioxidant and whitening.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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