We recently developed a high efficiency expression vectors pCK, which drives a high level of gene expression in the skeletal muscles of mice. In this study, we investigated the pharmacokinetics and biodistribution of pCK-VEGF expressing human VEGF165 after intravenous or intramuscular administration. The quantity of pCK-VEGF in the tissues of mice was measured by the PCR method which has a detection limit of approximately 1 pg of the exogenously added plasmid. In the case of intravenous administration, the half life of the pCK-VEGF plasmid in the bloodstream was 1.68 min. After intra-muscular administration, the half life of pCK-VEGF plasmid in the bloodstream was 6.78 min. At 90 min post-administration, 30% of the injected pCK-VEGF was found at the site of injection, where it persisted for up to 8 hours. Less than 1.6% of the injected pCK-VEGF plasmid DNA was detected in highly vascularized tissues such as the lung, kidney; and liver at 90 min post-administration, but the plasmid was undetectable at later time points. These results suggested that intramuscularly administrated pCK-VEGF persisted for longer periods of time in muscles than in other tissues and that direct intra-muscular injection of pCK-VEGF might be useful for local therapeutic angiogenesis.
The purpose of this study was to analyze oxidized methionines in the myosin isoforms of porcine longissimus thoracis, psoas major, and semimembranosus muscles by liquid chromatography (LC) and mass spectrometry (MS). A total of 836 queries matched to four myosin isoforms (myosin-1, -2, -4, and -7) were analyzed and each myosin isoform was identified by its unique peptides (7.3-13.3). Forty-four peptides were observed from all three muscles. Seventeen peptides were unique to the myosin isoform and the others were common peptides expressed in two or more myosin isoforms. Five were identified as oxidized peptides with one or two methionine sulfoxides with 16 amu of mass modification. Methionines on residues 215 (215), 438 (438), 853 (851), 856 (854), 1071 (1069), and 1106 (1104) of myosin-1 (myosin-4) were oxidized by the addition of oxygen. Myosin-2 had two oxidized methionines on residues 215 and 438. No queries matched to myosin-7 were observed as oxidized peptides. LC-MS/MS allows analysis of the oxidation of specific amino acids on specific residue sites, as well as in specific proteins in the food system.
Background: Progressive muscle weakness is aggravated not only in the skeletal muscles but also in the respiratory muscles in many patients with neuromuscular diseases (NMD). Inspiratory muscle training (IMT) has been reported as therapy for pulmonary rehabilitation to improve respiratory strength, endurance, exercise capacity, and quality of life, and to reduce dyspnea. Objects: The purpose of this study was to determine the effect of playing harmonica for 5 months on pulmonary function by assessing the force vital capacity (FVC), peak cough flow (PCF), maximal inspiratory pressure (MIP), maximal expiratory pressure (MEP), and maximal voluntary ventilation (MVV) in patients with NMD. Methods: Six subjects with NMD participated in this study. The subjects played harmonica once a week for 2 hours at a harmonica academy and twice a week for 1 hour at home. Thus, training was performed thrice a week for 23 weeks. The examiner assessed pulmonary function by measuring FVC in the sitting and supine positions and PCF, MIP, MEP, and MVV in the sitting position at the beginning of training and once a month for 5 months. Results: Both sitting and supine FVC significantly increased after playing harmonica (p=.042), as did MIP (p=.043) and MEP (p=.042). Conclusion: Playing harmonica can be used as an effective method to improve pulmonary function in patients with NMD.
Recents reports have demonstrated that force and direction is important during mandibular distraction osteogenesis. The purpose of this study was to evaluate the resistant force of internal pterygoid muscles and inquire into relationship between internal pte'Ygoid muscles and cephalometric parameters. Eighty four patients with class III malocclusion underwent bilateral sgittal splitting of ramus with intraoral vertico-sagittal ramal osteotomy. A spring scale were used for measuring for resistence of internal pterygoid mescles after splitting of ramus. Skeletal-dental cephalometric analysis was made following statistic package was used for correlation between resistence and cephalometric parameters. The resistant force of right internal pterygoid muscle was greater than left muscle in Korean with class III malocclusion and the force had a linear regression relationship with facial depth (distance between nasion and gonion). The results suggested that facial depth has significant correlation of the resistance of internal pterygoid muscle (p<0.05).
The molecular components that generate and maintain circadian rhythms of physiology and behavior in mammals are present both in the brain (suprachiasmatic nucleus; SCN) and in peripheral tissues. Examination of mice with targeted disruptions of either mPer1 or mPer2 has shown that these two genes have key roles in the SCN circadian clock. Here we show that loss of the clock gene mPer2 affects forced locomotor performance in mice without altering muscle contractility. A proteomic analysis revealed that the anterior tibialis muscles of the mPer2 knockout mice had higher levels of glycolytic enzymes such as triose phosphate isomerase and enolase than those of either the wild type or mPer1 knockout mice. In addition, the level of expression of HSP90 in the mPer2 mutant mice was also significantly higher than in wildtype mice. These results suggest that the reduced locomotor endurance of the mPer2 knockout mice reflects a greater dependence on anaerobic metabolism under stress conditions, and that the two canonical clock genes, mPer1 and mPer2, play distinct roles in the physiology of skeletal muscle.
Muscle contusion usually results from a direct blunt impact and is frequently associated with contact sports. Muscle contusion results from microscopic muscle fiber and capillary disruption causing a microhemorrhage dissecting torn fibers and remaining viable muscle fibers. Recent studies concluded that some physical methods, including pulsed ultrasound (PU) and pulsed electromagnetic field (PEMF) treatment, accelerate and facilitate wound healing, improve scar quality and have beneficial effects on muscle and tendon healing. However, there are few studies on the effects of the early use of physical methods, such as PU and PEMF, on the expression of neurotrophic factors. The objective of this study was to investigate the effects of the early application of PU and PEMF, measured through the expression of BDNF in the muscles (gastrocnemius) and spinal cords of rats after skeletal muscle contusion. In the spinal cords and muscles, there was a significant increase of BDNF expression in the PEMF and PU groups, a greater increase was found in the PEMF group than in the PU group. In conclusion, PEMF is a useful therapeutic method that improves muscle healing after muscle contusion.
Rhabdomyolysis is a syndrome caused by injury to skeletal muscles and involves leakage of large quantities of potentially toxic intracellular contents into the plasma. It is known that rhabdomyolysis results in peripheral nerve injury, however, reports of bilateral sciatic neuropathy following rhabdomyolysis are rare. We report a case involving a 42-year-old female patient with no past medical history, who presented with sudden bilateral calf pain, redness, and burning sensation with weakness of both lower extremities after sleeping on an electric heating pad following alcohol drinking. Lower extremity magnetic resonance angiography (MRA) revealed multifocal edema with enhancement of bilateral lower extremity muscles. Clinical and electrodiagnostic tests were consistent with the diagnosis of bilateral sciatic neuropathy following rhabdomyolysis. This is a rare case of bilateral sciatic neuropathy following rhabdomyolysis.
본 연구는 7주령의 S D계 흰쥐를 이용하여 12주 동안의 사다리 오르기 저항성 운동 수행 후 가자미근과 비복근 내 GLUT-4 발현량 및 LDH 동위효소들의 변화를 측정하여 당 대사 및 젖산 기전에 대한 연구로 다음과 같은 결론을 얻었다. 12주간의 사다리 오르기 저항성 운동은 체중감소에 효과적인 것으로 나타났으며, 가자미근 및 비복근 조직 GLUT-4 단백질 발현을 유의하게 증가시키는 것으로 나타났다. 또한 가자미근 및 비복근 조직 LDHA B-type 동위효소의 발현을 유의하게 증가시키는 것으로 나타났다. 본 연구의 결과를 종합해 볼 때 12주간의 저항성훈련은 체중의 감소와 골격근 내 GLUT-4의 증가 그리고 LDH A4 동위효소를 제외한 LDH B-type 동위 효소의 증가와 같은 신체조성의 균형과 당대사능력 및 미토콘드리아의 기능 개선에 영향을 미치는 것으로 사료된다. 추후 연구에서는 휴식시간이나 운동 강도의 차이와 근형태별에 따른 유 무산소적 저항훈련 프로그램의 효과에 따른 다양한 연구가 실시되어야 할 것으로 생각된다.
본 연구의 목적은 일회성 유산소 운동이 TLR4, IL-6, TNF-${\alpha}$, SOCS-3 유전자 발현에 미치는 영향을 쥐의 골격근에서 살펴보는데 있었다. 또한 이러한 일회성 운동의 영향이 근섬유 형태 특이적으로 나타나는 지에 대한 연구도 수행되었다. 실험은 Balb/c 수컷 쥐(male: 7주령, 몸무게 $22.78{\pm}0.27g$) 13마리 대상으로 하였으며, 대조군과 운동군으로 무선배정되었다. 운동은 일회성으로 지칠 때까지 트레드밀 운동(경사도 $10^{\circ}$, speed 17 cm/sec 10 min, 33 cm/sec 10 min, 50 cm/sec)을 실시하였으며, 운동 후 24시간이 지난 시점에서 가자미근과 족저근을 적출하였다. 가자미근과 족저근의 TLR4, IL-6, TNF-${\alpha}$, SOCS-3 mRNA 수준 변화는 real-time PCR을 이용하여 측정하였다. 일회성 유산소 트레드밀 운동은 가자미근에서 TLR4 mRNA 발현을 유의하게 증가시켰지만, 족저근의 TLR4 mRNA 발현에는 유의한 영향을 미치지 않았다. 또한 IL-6, TNF-${\alpha}$, SOCS-3 mRNA 발현은 가자미근에서 일회성트레드밀 운동에 의해 유의하게 증가되었다. 하지만 족저근에서 이들 유전자의 mRNA 발현은 일회성 운동에 의해 영향을 받지 않았다. 결론적으로 TLR4, IL-6, TNF-${\alpha}$, SOCS-3와 같은 면역관련 유전자의 발현 수준은 일회성트레드밀 운동에 의해 근섬유 형태 특이적으로 조절됨을 알 수 있었다.
This study was conducted to evaluate the possible application of 2 D-SDS-PAGE (2 DE)-based proteome analysis techniques to the assessment of extreme proteolysis in postmortem skeletal muscle. Eight Hanwoo longissimus muscles were incubated immediately after slaughter for 24 h at 5$^{\circ}C$, 15$^{\circ}C$ or 36$^{\circ}C$. Warner Bratzler (WB)-shear force and ultrastructural configuration were determined at 24 h, and rate of proteolysis to 24 h was determined by 1 D-SDS-PAGE (1 DE) and 2 DE. In addition, tentative protein identification was performed from peptide mass fingerprints of MALDI-ToF analysis of major protein groups on 2 DE profiles. The result showed that although ultrastructural configuration was similar between the 5$^{\circ}C$ and 36$^{\circ}C$ treatments, meat at 5$^{\circ}C$ had higher WBshear force (approximately 5 kg greater). A higher rate of protein degradation at 36$^{\circ}C$ was observed based on Troponin-T degradation, 1 DE, and 2 DE analysis. This indicates that proteolysis during the early postmortem period was a significant determinant of shear force at 24 h. Little difference in proteolysis between 5$^{\circ}C$ and 15$^{\circ}C$ treatments was found based on classic 1 DE profile assessment. Meanwhile, considerable differences in the 2 DE profiles between the two treatments were revealed, with substantially higher rate of proteolysis at 15$^{\circ}C$ compared to 5$^{\circ}C$. Nuclease treatment improved 2 DE profile resolution. 400 ${\mu}$g and 600 ${\mu}$g of sample loading appeared to be appropriate for 24 cm pH 3-10 and pH 5-7 IPG strips, respectively. Protein detection and quantification of the 5$^{\circ}C$, 15$^{\circ}C$ and 36$^{\circ}C$ 2 DE profiles revealed 78, 163 and 232 protein spots respectively that were differentially modified in terms of their electrophoretic properties between approximately pI 5.3-7.7 with the molecular weight range of approximately 71-12 kDa. The current results demonstrated that 2 DE was a superior tool to 1 DE for characterising proteolysis in postmortem skeletal muscle.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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