SON Kyung Hun;YANG He Eun;LEE Seung Chul;CHUNG Ji Hun;JO Byoung Kee;KIM Hyun Pyo;HEO Moon Young
Biomolecules & Therapeutics
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제13권3호
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pp.150-155
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2005
The ethanolic extract of chestnut (Castanea crenata S. et Z., Fagaceae) inner shell (CISE) and one of its components, ellagic acid (EA), were evaluated for their protective effects against 1, 1-diphenyl-2-picryl hydrazine (DPPH) free radical generation and hydrogen peroxide-induced oxidative DNA damage in a mammalian cell line. CISE and EA were shown to possess the free radical scavenging effect against DPPH radical generation, significantly. They were also found to strongly inhibit hydrogen peroxide-induced DNA damage from Chinese hamster lung (CHL) cell, assessed by single cell gel electrophoresis assay and 8-hydroxy -2'-deoxy guanosine (8-OH-2'dG) assay. Furthermore, topical application of CISE [$12.5\%$(w/w) cream] and ellagic acid [$1.0\%$(w/w) cream] for 14 days potently inhibited malondialdehyde (MDA) formation of mouse dorsal skin (a marker of lipid peroxidation) induced by ultraviolet B exposure. Therefore, CISE and its component, ellagic acid, may be the useful natural antioxidants by scavenging free radicals, inhibition of lipid peroxidation and protecting oxidative DNA damage when topically applied.
Alkaline single cell gel electrophoresis (SCGE) assay는 일명 혜성분석이라고 부르며 in vivo 와 in vitro 에서 많은 화학적, 생물학적인 인자에 의한 DNA 손상을 감지하는데 유용한 기법으로 각각의 세포에서 DNA 단일 가닥 절단과 알칼리에 약한 장소를 평가하는 새로운 방법으로 인정되고 있다. 단세포 겔 전기영동법 (SCGE)을 사용하여 복숭아씨 추출물이 방사선에 의하여 사람 림프구 DNA에 나타나는 손상을 보호하는 지 여부를 평가하였다. 복숭아씨 추출물로 10 분간 전처리한 림프구를 0, 0.1, 0.3, 0.5, 1.0, 2.0 Gy 의 방사선으로 조사하였고 방사선만을 조사한 림프구 실험군과 비교평가하였다. 혜성분석에서 DNA 가닥 절단에 대한 표식인 tail moment의 증가는 감마선에 대해서 뚜렷한 선량-반응 관계를 나타내었으며 각각의 농도별로 복숭아씨 추출물이 처리된 림프구의 DNA 손상은 현저히 감소하였다. 단세포 겔 전기영동법을 통한 평가결과 복숭아씨 추출물은 방사선에 의한 림프구 DNA 손상에 대한 탁월한 방어효과를 나타내었다.
Three synthetic chemicals, benzoyl chloride, 2-propyn-l-ol, and 2-phenoxy ethanol were selected for genotoxicity testing, based on production quantity and available genotoxic data. In our previous report, benzoyl chloride induced chromosomal aberrations in Chinese hamster lung (CHL) fibroblast in vitro with and without metabolic activation, while 2-propyn-l-ol and 2-phenoxy ethanol induced only with metabolic activation. To compare the genotoxicity of chromosome aberration assay, the single cell gel electrophoresis (comet) assay subjected using CHL cells. As a result, statistically significant differences of tail moment values of benzoyl chloride, 2-propyn-1-ol, and 2-phenoxy ethanol were observed compared with control values on almost all concentrations with S9 or without S9 metabolic activation system. This results suggest that genotoxic results of the comet assay and the chromosome aberration assay show correlationship of genotoxicity in the CHL fibroblast. In summary, the positive result of chromosome aberration of benzoyl chloride, 2-propyn-l-ol, and 2-phenoxy ethanol was also induced DNA damages in comet assay with same cell line. Consequently, comet assay will be useful and more accurate tool to detect and to confirm the genotoxicity especially DNA damages in CHL fibroblast.
The ethanol extract of the peony root (Paeonia Lactiflora Pall, Paeoniaceae) as well as its major active components including gallic acid and methyl gallate were evaluated for their protective effects against free radical generation and lipid peroxidation. In addition, the protective effects against hydrogen peroxide-induced oxidative DNA damage in a mammalian cell line were examined. The ethanol extracts of the peony root (PREs) and its active constituents, gallic acid and methyl gallate, exhibited a significant free radical scavenging effect against 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazine (DPPH) radical generation and had an inhibitory effect on lipid peroxidation, as measured by the level of malondialdehyde (MDA) formation. The PREs did not have any pro-oxidant effect. They strongly inhibited the hydrogen peroxide-induced DNA damage from NIH/3T3 fibroblasts, as assessed by single cell gel electrophoresis. Furthermore, the oral administration of 50% PRE (50% ethanol extract of peony root), gallic acid and methyl gallate potently inhibited the formation of micronucleated reticulocytes (MNRET) in the mouse peripheral blood induced by a $KBrO_3$ treatment in vivo. Therefore, PREs containing gallic acid and methyl gallate may be a useful antigenotoxic antioxidant by scavenging free radicals, inhibiting lipid peroxidation and protecting against oxidative DNA damage without exhibiting any pro-oxidant effect.
Tyrosinase transcript In the blood Is known as the marker of malignant melanoma and it has been often determined by using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCA) . However, after the PCR process, the quantification of amplified CDMA by the gel electrophoresis is not reliable and time-consuming. for this reason, we tried to quantify the PCR product using a cuvette-type biosensor, where the oligonucleotide probe was immobilized on the cuvette surface and the single strand CDMA, the denatured PCH product, was then hybridized onto the immobilized probe to give a response signal. The response was Immediate and takes 15 min to obtain a stable signal. The biosensor was much more sensitive comparing to the gel electrophoresis method. The quantification of PCR product using a cuvette-type biosensor was feasible and rapid.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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