Kim, Juhwan;Jang, Sungwoong;Jeon, Yubyeol;An, Du Hae;Kim, Doo Nam;Hyun, Sang-Hwan;Moon, Changjong
Journal of Embryo Transfer
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v.28
no.1
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pp.73-78
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2013
The present study examined the histological characteristics of adult testis in the long-beaked common dolphin (Delphinus capensis) from Korean waters and the localization of DEAD-box polypeptide 4 (DDX4; a germ cell marker) and vimentin (a Sertoli cell marker) expression in the dolphin testis compared with that in terrestrial mammals, including dogs and rats. The seminiferous tubules of dolphin testis have very small or completely closed lumens, and spermatogenic cells and Sertoli cells within the tubules cannot be differentiated. Immunohistochemical analysis showed that, in the dolphin testis, DDX4- and vimentin-positive cells were scattered extensively within the tubule, whereas in the dog and rat testis, DDX4 immunoreactivity was localized in spermatogenic cells of the adluminal compartment, and vimentin immunoreactivity was localized in Sertoli cells of the basal compartment in the seminiferous epithelium. These results suggest that the histological characteristics of the seminiferous tubules in the dolphin testis differ from those of terrestrial species.
Closely correlated expression patterns between ubiquitin specific peptidase 9X-linked (USP9X) and adherens junction formation factor (Afadin) in mouse testis development suggests that Usp9x regulates the deubiquitination of Af-6 (also known as Afadin, AFDN), and subsequently, the cell adhesion dynamics during gametogenesis. However, this relationship has not yet been tested in other domestic animals. The study was examined the temporal and spatial expression patterns of porcine USP9X and AFDN from the pre-pubertal to adult stages using real time-PCR and immunohistochemistry. Furthermore, we detected the transcripts of USP9X and AFDN in the testis of 1-, 6- and 12-months old boar, respectively. USP9X and AFDN were found to have similar expressions patterns, with basal expression after 1 month followed by a significant up-regulation from 6 months (puberty) onwards. In addition, neither the AFDN or USP9X proteins were detected in spermatogenic cells but they were expressed in the leydig cells and sertoli cells. USP9X was detected around the basal lamina during pre-puberty, and predominantly expressed in the leydig cells at puberty. Finally, in adult testis, USP9X was increased at the sertoli cell-cell interface and the sertoli cell-spermatid interface. In summary, closely correlated expression patterns between USP9X and AFDN in boar testis supports the previous findings in mice. Furthermore, the junction connections between the sertoli cells may be regulated by the ubiquitination process mediated via USP9X.
Objective: Recapitulation of the spermatogenesis process in vitro is a tool for studying the biology of germ cells, and may lead to promising therapeutic strategies in the future. In this study, we attempted to transdifferentiate Wharton's jelly-derived mesenchymal stem cells (WJ-MSCs) into male germ cells using all-trans retinoic acid and Sertoli cell-conditioned medium. Methods: Human WJ-MSCs were propagated by the explant culture method, and cells at the second passage were induced with differentiation medium containing all-trans retinoic acid for 2 weeks. Putative germ cells were cultured with Sertoli cell-conditioned medium at $36^{\circ}C$ for 3 more weeks. Results: The gene expression profile was consistent with the stage-specific development of germ cells. The expression of Oct4 and Plzf (early germ cell markers) was diminished, while Stra8 (a premeiotic marker), Scp3 (a meiotic marker), and Acr and Prm1 (postmeiotic markers) were upregulated during the induction period. In morphological studies, approximately 5% of the cells were secondary spermatocytes that had completed two stages of acrosome formation (the Golgi phase and the cap phase). A few spermatid-like cells that had undergone the initial stage of tail formation were also noted. Conclusion: Human WJ-MSCs can be transdifferentiated into more advanced stages of germ cells by a simple two-step induction protocol using retinoic acid and Sertoli cell-conditioned medium.
Kim, Chul;Park, J.H.;Kim, S.J.;Seo, Y.J.;Do, B.R.;Roh, S.I.;Yoon, H.S.;Kim, E.S.
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2001.02a
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pp.50-51
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2001
In ultrastructure study of testis, Sertoli cells start to differentiate at 16 days of gestation. Transcripts of FSH receptor, IGF-I receptor, ER $\alphareceptor, $$TGF-\beta$ receptor and androgen receptor were highly and initially expressed at 16 day of gestation. As results of in situ PCR at 16 day of gestation, transcripts of FSH, IGF-I receptor were detected in Sertoli cells and spermatogonia, whereas the receptors of $ER\alpha, $$TGF-\beta$ and androgen were detected in Sertoli cells. Therefore, expression of FSH and estrogen $\alpha, $ androgen, IGF-I and $TGF-\alpha$ could play an important role during fetal and prepubertal testicular development by stage specific manner in mouse.
Tae H. J.;Jang B. G.;Choi C. H.;Park Y. J.;Yang H. H.;Kim I. S.
Korean Journal of Poultry Science
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v.32
no.2
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pp.125-133
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2005
Morphometric changes in testicular Sertoli and Leydig cells from hatching to adulthood were studied using Korean native chickens of 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 21, 24, 28, 32, 44, 52 and 64 weeks (n=13 chickens per group) of age. The objective of this study was to understand the developmental phase of the Sertoli and Leydig cells with age. Testis of chickens was fixed by whole body perfusion using a fixative containing $2.5\%$ glutaraldehyde in cacodylate buffer, processed and embedded in Epon-araldite. Using 1 Um sections stained with methylene blue-azure II, qualitative and quantitative (stereological) morphological studies were performed. The average volume of a testis of 1 week old Korean native chickens was determined as $0.148\;cm^3$ and the parameter increased linearly from 1 week to 21 weeks days $(28.86\;cm^3)$, and did not change from 21 weeks to 64 weeks. The volume density of the seminiferous tubules increased with age from $32.6\%$ at week 1 to $92.89\%$ at week 64. The volume density of the interstitium represents $67.4\%$ of the testicular parenchyma at week 1. This proportion progressively diminished during development to reach a value of $7.11\%$ at week 64. The volume density of the Leydig cells decreased almost linearly from 1 week $(4.9\%)$ to 14 weeks $(1.7\%)$ and remained unchanged thereafter. In contrast, the Sertoli cells occupied a volume density of $3.4\%$ at week 1, increased progressively up to 18 weeks of age $(10.79\%)$ and remained unchanged thereafter. The absolute volume of the Leydig and Sertoli cells per testis increased significantly from week 1 to week 21 but did not change significantly from week 24 to week 64. The number of Leydig cells per testis increased almost linearly from 1 week to 21 weeks, remained high and unchanged with advancing age. The number of Sertoli cells per testis increased gradually with age from 1 week to 14 weeks and remained unchanged thereafter.
The characteristics of the testis and the annual cycle of the seminiferous epithelium of the Miniopterus schreibersi fuliginosus were examined by optical microscopy. The testis weight and diameter of the seminiferous tubules were increased gradually from May to July, and the highest activity was observed in August. The size then decreased rapidly from October. Spermatogenesis began in May, peaked in August, and was suspended from October to April in the following year. Spermatocytogenesis were produced from May to July. Spermiogenesis occurred from August to September. In particular, immature spematogenic cells in the seminiferous tubules were engulfed by the phagocytosis of Sertoli cells in October. From November to April, the seminiferous tubuly contained only Sertoli cells and Ad spermatogonia. Therefore, the periodic changes in the seminiferous epithelium of M. S. fuliginosus suggest that a long hibernation is an adaptive strategy for the preservation of energy and the regulation of the breeding cycle.
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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1998.07a
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pp.43-44
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1998
Effect of somatic cell coculture on hatching of mouse blastocyst was examined. Mid-blastocysts were cocultured with granulosa cell primary culture or Sertoli cell line ($TM_{4}$) derived from mouse testis for 48 hr. Blastocysts cultured in medium (10% FBS) started to hatch more faster than cocultured embryos during 12 hr of coculture. After then blastocysts cocultured with somatic cell hatched faster than control. Degeneration of embryos was also greately reduced by coculture. This result suggested the potentiation of hatching as well as embryonic viability by coculture with somatic cell and Sertoli cell line can be used for embryo coculture.
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2001.08a
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pp.38-38
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2001
TM4 Sertoli cell의 체외 관강형성 유도에 미치는 세포외기질 (ECM) 및 hepatocyte growth factor (HGF)의 역할과 세포분화 과정에서 MMP의 발현의 변화를 조사하였다. Matrigel bed(60%, v/v) 상에서 배양한 TM4 cell은 무혈청 조건하에서 chain 분화단계를 거쳐 cord의 구조로 분화하였다. 그러나 이후의 분화는 일어나지 않았다. TM4 cell에서 c-MET (HGF receptor)의 발현을 확인하였으며 HGF를 첨가한 배양액에서 분화가 촉진되었으며, cord에서 tubule로의 분화가 유도되었다. 또한 TM4 cell의 분화는 MMP-2 및 MMP-9의 발현이 증가를 수반하였으며 HGF는 MMPs의 발현을 증가시켰다. GFR-Matrigel과 성장인자인 HGF는 무혈청 배지에서 TM4 cell의 체외에서 관강형성에 필요한 환경을 제공하며, MMP-2 및 -9은 TM4 cell의 체외분화 과정에서 조절역할을 수행하는 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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