Mycoplasma gallisepticum (MG) is major cause of chronic respiratory disease in chickens. M. synoviae (MS) most frequently occurs a subclinical upper respiratory infection but may result in airsacculitis and synovitis in chickens and turkeys. Both mycoplasmas induce economic losses by triggering chronic respiratory signs, airsacculitis and decreased egg production. For prevention of the infections, live attenuated andinactivated vaccines are commercially used for prevention of MG but not MS in Korea. Serum plate agglutination (SPA) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) have been commonly used for serological diagnosis for MG and MS. Recently, it is believed that MS spread in chickens is very seriously in Korea and respiratory infection with MS causes substantial loss in poultry farms. In this study, we investigated the serological prevalence of MG and MS in unvaccinated chickens between 2008 and 2009. The overall seroprevalence of MG was 24% of 2,094 for individual chickens and 24% of 189 farms. The overall seroprevalence of MS was 36% in 2,095 chickens and 39% in 198 farms. The results show that seropositive ratio of MS is higher than MG. The geographical prevalence of MG has been estimated in following sequence; Gangwon, Jeolla, Gyeonggi, Gyeongsang, and Chungcheong. The geographical prevalence of MS has been estimated as follows; Gangwon, Gyeonggi, Gyeongsang, Chungcheong, and Jeolla. Seasonal seroprevalencewas also examined, and it found that seroprevalence in spring, fall and winter was higher than that in summer in MG, but not in MS. No significant difference was shown in seroprevalence according to breed. Future study about pathogenicity of MS isolates would be needed and economical losses by MS outbreaks should be analyzed. Moreover, we compared sero-positivity obtained with SPA and ELISA. The kappa value of MG between SPA and ELISA was 0.8061 and the kappa value of MS between SPA and ELISA was 0.7649.
The raccoon dog (Nyctereutes procyonoides) may be infected by Dirofilaria immitis. However, there has been no report on dirofilarial infection in the raccoon dog in Korea. In this study, we report on D. immitis infection in two wild raccoon dogs captured in the Daejeon area. The two raccoon dogs were referred to the Veterinary Teaching Hospital, Chungnam National University for diagnosis of D. immitis infection. The modified Knott's test for the detection of blood D. immitis microfilariae was positive, and serological test (FASTest$^{(R)}$ HW Antigen ELISA kit, Diagnostik Mega Cor, Austria) for D. immitis was positive as well. Additionally, D. immitis microfilariae were differentiated from other microfilariae by using acid phrnphatase histochemical staining (Leucognost-SP$^{(R)}$kit, Diagncstica MERCK, Germany). The two raccoon dogs were necropsed and D. immitis infection was confirmed.
연구배경: 객담 도말 및 배양 검사나 방사선학적 검사 등의 기존의 결핵 진단 방법은 낮은 민감도와 진단까지 소요되는 기간이 길다는 단점이 있어서 결핵의 조기 진단 및 치료에 제한점이 있었다. 최근에 혈청학적 진단 방법의 하나로 개발된 immunochromatographic assay 기구들이 소개되고, 외국에서 비교적 높은 진단율를 보여, 결핵 유병율이 높은 국내에서 그 유용성을 평가하고, 질병 양상에 따른 차이점을 조사하여, 기존의 결핵 진단 방법들의 문제점을 해결할 수 있는지 알아보고자하였다. 연구방법: 환자군을 폐결핵 환자군(36명), 폐외결핵 환자군(3명) 및 두 가지 모두 이환된 군(22명)으로 나누었으며, 대조군은 과거 결핵 병력이 있는 비활동성 결핵환자(17명), 결핵이외의 폐질환자(16명) 및 폐질환이 없는 심장 환자(14명)를 대상으로 38kDa 항체를 포함한 ICT tuberculosis 또는 BioSign$^{TM}$TB를 이용하여 혈청화적 검사를 시행하였다. 결 과: ICT tuberculosis를 사용한 경우, 환자군 56명 및 대조군 47명에 대하여 64.3%의 민감도 및 91.5%의 특이도를 나타내었으며, 폐결핵만 있는 환자군에서 76.5%의 민감도를 보여, 폐외 결핵만 있는 환자군(33.3%)나 두 가지 모두 이환된 군(47.4%)에 비하여 더 높은 민감도를 나타내었다(p=0.039). BioSign$^{TM}$TB를 이용한 경우, 환자군 43명 및 대조군 43 명에 대하여 74.4%의 민감도 및 95.3%의 특이도를 보였으며, 폐질환이 없는 환자군에서는 100%의 특이도를 나타내었다. 환자군중에서 초발환자 및 과거 폐결핵 병력이 있는 환자군 사이에는 민감도에 차이가 없었으며, 공동성 폐결핵 환자와 비공동성 폐결핵 환자사이에 검사상 민감도 차이는 통계적으로 유의하지 않았다(73.3% vs. 69.6%, p>0.05). 결 론: 혈청학적 방법의 하나인 immunochromatographic assay 기구는 높은 특이도와 양성 예측도를 보여 임상적 유용성이 기대되나, 상대적으로 낮은 민감도와 음성 예측도를 고려할 때, 단독 사용보다는 기존 방법과의 상보적 사용이 결핵진단에 더 도움이 될 것으로 생각된다.
One hundred and thirteen healed pulmonary tuberculosis patients and 11 patients with other underlying diseases were studied for evidence of pulmonary fungal infection because of persisting hemoptysis or chronic cough. Rediological, mycological and serological investigations revealed that 54 out of 124 patients were evidently infected with one or more species of fungi. A. fumigatus was isolated from 4 out of 70 patients whose sera did not react with antigens from this fungus, while it was isolated from 43 out of 47 serological reactors to this fungus. Chest radiography showed a distinct fungus ball in a cyst of one patient and in a preformed cavity in the lung of 17 healed tuberculosis patients and two other patients. The latter two patients were infected with A.flavus. Two patients, who were under the long period of immunosuppressive therapy, apparently succumbed to invasive aspergillosia due to A.fumigatus. A single or dual infection with A. flavus, A. nidulans, A.nidulans var. latus, C. albicans, and P. boydii were noticed in some patients without mycetomal shadow on chest radiographs. Young mycelial extract (ME) of A.fumigatus detected antibody in 95.8 percent of the sera from patients infected with this fungus, while it was isolated from 43 out of 47 serological reactors to this fungus. Chest radiography showed a distinct fungus ball in a cyst of one patient and in a performed cavity in the lung of 17 healed tuberculosis patients and two other patients. The latter two patients were infected with A. flavus. Two patients, who were under the long period of immunosuppressive therapy, apparently succumbed to invasive aspergillosis due to A.fumigatus. A single or dual infection with A. flavus, A. nidulans, A. niduans var. latus, C. albicans, and P. boydii were noticed in some patients without mycetomal shadow on chest radiographs. Young mycelial extract (ME) of A.fumigatus detected antibody in 95.8 percent of the sera from patients infected with this fungus, while the commercial culture filtrate antigen (GL) yielded 78.7 per cent positive result. Culture filtrate antigen, however, was comparable with ME. There was no single antigen with which all the serum specimens reacted. Fractionation of ME resulted in a loss of some activity although it excluded substances that reacted with C-reactive protein in a loss of some activity although it excluded substances that reacted with C-reactive protein. Most reactive and specific precipitinogens distributed in the fraction (FB) which was precipitable at 75 percent saturation with ammonium sulfate and eluted in a second peak in order from gel-filtration and which contained mostly proteinic components. Glycoproteins or polysaccharides rich fractions (FA and ASI) were relatively less effective in detecting antibody. Demonstration of antibody in the serum from patients using a battery of fungal antigens and of etiologically related fungi from clinical specimens are very useful laboratory procedures for the diagnosis of pulmonary fungal infection which is a common complication of tuberculosis.
Purpose: Serological tests of tissue transglutaminase (TTG) and deamidated gliadin (DGP) antibodies for celiac disease diagnosis show conflicting correlation with histology in young children and in type 1 diabetes mellitus (T1DM). Tests' ability to predict histology and cutoff values based on age and T1DM was evaluated. Methods: A retrospective study of children who had celiac serological tests between 6/1/2002 and 12/31/2014 at a pediatric hospital. Results: TTG IgA displayed similar results in predicting histology between <4.0 and ≥4.0 years age groups with sensitivity 98% and 93%, and specificity 88% and 86%, respectively. In children <4.0 years old, sensitivity for DGP antibodies was 100% and specificity 94%; in ≥4.0 years age groups, sensitivity was 60%, 88% for DGP IgA and IgG and specificity 95%, 96%, respectively. TTG IgA had low specificity in patients with T1DM compared with non-T1DM, 42% vs. 91%. Positive TTG IgA with normal histology was associated with higher T1DM prevalence at 36% compared with negative tests at 4%. Finally, the TTG IgA cutoff value was higher in T1DM at 36 vs. 16.3 units in non-T1DM. DGP IgG cutoff showed similar values between age groups; TTG IgA and DGP IgA cutoffs were lower in <4.0 years at 8.3 and 11.9 units than ≥4.0 years at 23.4 and 19.9, respectively. Conclusion: TTG IgA is sufficient for the <4.0 years age group and DGP antibodies had no advantage over TTG IgA in older children. The cutoff value to determine a positive TTG IgA should be higher for children with T1DM.
구제역은 발생 시 전염이 쉽게 일어나며 심각한 경제적 피해를 일으키는 질병이다. 구제역의 방역정책은 발견 직후 빠른 살처분이 최선책이나, 전파 속도나 상황 등에 따라 타지역 백신 접종 등의 방법을 시행할 수도 있다. 이러한 방법을 적용하기 위해서는 구제역을 빠르고 정확하게 진단할 필요성이 있다. 개발된 진단법들은 구제역의 확진, 혈청형의 동정, 백신 접종 후 항체의 생성 확인 등에 사용된다. 많은 진단법들이 개발되었지만 아직은 빠른 시간 내에 검출이 가능하며 동시에 정확성도 가진 방법이 드물다. 그렇기에 기존의 방법들을 개선시킨 새로운 진단법이 필요하다. 현재는 대부분 혈청학적 진단법인 ELISA에 의존하거나 분자 유전학적 기술인 PCR을 사용한다. 가장 최근 기술은 그 둘을 합치는 방법으로, 어떻게 하면 더 신속하고 저비용이면서, 민감하고 정확한 방법이 될 수 있을지 연구가 진행되고 있다.
Background: There is an urgent need to find reliable and rapid bovine tuberculosis (bTB) diagnostics in response to the rising prevalence of bTB worldwide. Toll-like receptor 2 (TLR2) recognizes components of bTB and initiates antigen-presenting cells to mediate humoral immunity. Evaluating the affinity of antigens with TLR2 can form the basis of a new method for the diagnosis of bTB based on humoral immunity. Objectives: To develop a reliable and rapid strategy to improve diagnostic tools for bTB. Methods: In this study, we expressed and purified the sixteen bTB-specific recombinant proteins in Escherichia coli. The two antigenic proteins, MPT70 and MPT83, which were most valuable for serological diagnosis of bTB were screened. Molecular docking technology was used to analyze the affinity of MPT70, MPT83, dominant epitope peptide of MPT70 (M1), and dominant epitope peptide MPT83 (M2) with TLR2, combined with the detection results of enzyme-linked immunosorbent assay to evaluate the molecular docking effect. Results: The results showed that interaction surface Cα-atom root mean square deviation of proteins (M1, M2, MPT70, MPT83)-TLR2 protein are less than 2.5 A, showing a high affinity. It is verified by clinical serum samples that MPT70, MPT83, MPT70-MPT83 showed good diagnostic potential for the detection of anti-bTB IgG and M1, M2 can replace the whole protein as the detection antigen. Conclusions: Molecular docking to evaluate the affinity of bTB protein and TLR2 combined with ELISA provides new insights for the diagnosis of bTB.
Riboldi, Emeline;Carvalho, Flavio;Romao, Pedro Roosevelt Torres;Barcellos, Regina Bones;Bello, Graziele Lima;Ramos, Raquel Rocha;de Oliveira, Rosemari Terezinha;Araujo, Joao Pessoa Junior;Rossetti, Maria Lucia;Dallegrave, Eliane
Parasites, Hosts and Diseases
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제56권1호
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pp.11-19
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2018
In Brazil, visceral leishmaniasis (VL) is expanding and becoming urbanized, especially in non-endemic areas such as the State of Rio Grande do Sul. Considering that infected dogs are the main reservoir for zoonotic VL, this study evaluated the prevalence of canine visceral leishmaniasis (CVL) in the metropolitan area of Porto Alegre, a new area of expansion of VL in Brazil. Serum and plasma from 405 asymptomatic dogs from the municipalities of Canoas (n=107), $S\tilde{a}o$ Leopoldo (n=216), and Novo Hamburgo (n=82) were tested for CVL using immunochromatographic ($DPP^{(R)}$) and ELISA $EIE^{(R)}$ assays (2 assays officially adopted by the Brazilian government for the diagnosis of CVL) and real-time PCR to confirm the results. There was no agreement among serological and real-time PCR results, indicating that the Leishmania infection in asymptomatic animals with low parasite load, confirmed by negative parasitological tests (smears and parasite culture), need to be evaluated by molecular methods. The prevalence of LVC in the metropolitan region of Porto Alegre, confirmed by real-time PCR was 4% (5.6% in Canoas and 4.6% in $S\tilde{a}o$ Leopoldo). The use of molecular method is essential for accurate diagnosis of CVL, especially in asymptomatic dogs in non-endemic areas.
비뇨기계 병원성 대장균의 중요한 병원성 인자 중의 하나로 인정되고 있는p-fimbriae의 subtype의 분포를 확인하기 위하여 요로감염증으로 확진된 환자의 혈청을 이용하여 immunoblotting 을 실시하였고, 이와 동시에 효소면역 측정법을 실시하여 p-fimbriae특이 항체 보유를 확인하였다. Immunoblotting 결과 우리나라 요로감염증환자에서 높은 빈도로 확인되는 p-fimbriae subtype의 분포는 $F7_1$34(56.7%), $F7_2$28(46.7%), F13 30(50%)등이 높게 나타났으며, 이와 같은 결과는 효소면역측정법에서도 동일하게 나타났다. 그러나 P-pili를 순수분리하지 않고 whole cell을 이용한 효소면역 측정법은 교차반응 때문에 비뇨기 감염증의 혈청학적인 진단에 적합하지 않는 것으로 나타났다. 또 우리 나라의 요로감염 환자에서 항체 양성율이 높은 $F7_1$, $F7_2$, F13만을 혼합하여 항원으로 이용한 효소면역측정법의 특이도와 민감도가 각각 92.6%, 90%로 나타나, 이와 같은 방법을 임상진단에 응용할 수 있을 것으로 판단되었다.
The diagnosis of brucellosis is currently based on serological and microbiological tests. However, the microbiological isolation and identification have several disadvantages such as time-consuming and laborious, and the serological methods have been reported to cross-react with antigens other than those from Brucella spp. To develop a sensitive and rapid diagnostic method for detection of Brucella species, the genus-specific primers were designed and synthesized from the sequence of gene encoding a 31kDa cell surface protein(BCSP) and a 36kDa outer membrane protein(OMPB) of B abortus. The amplified 711bp and 982bp DNA fragments were only visible in each species of Brucella by PCR method using the BCSP and OMPB primers, respectively. However, PCR product was not obtained with DNA from other Gram-negative bacteria. As little as 1pg of the B abortus genomic DNA could be detected by this PCR method. Using the PCR technique, semen samples from 185 bulls of Brucella-seronegative herds in Cheju island were examined for comparison of this PCR method with conventional methods in 1995. The semen samples from 5 bulls were positive by culture method and PCR, and one was positive and 5 were suspect by semen plasma agglutination test. However, the semen samples obtained from 177 bulls were negative by semen plasma agglutination, culture and PCR methods in 1996. The results of comparison tests suggested that PCR was a better test than agglutination test against semen of bulls. This study indicated that the PCR technique was a valuable for the diagnosis of bovine brucellosis, particulary in bull semens.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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