Kim, Bichsaem;Kim, Nahui;Kang, Jumsoon;Choi, Youngwhan;Sim, Sung-Chur;Min, Sung Ran;Park, Younghoon
Horticultural Science & Technology
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v.33
no.4
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pp.566-574
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2015
Yellow or transparent fruit peel color is caused by the accumulation or lack of naringenin chalcone (NG, C) in fruit peel and determines the red or pink appearance of tomato fruit, respectively. NGC biosynthesis is regulated by the SlMYB12 gene of the Y locus on chromosome 1, and DNA markers derived from SlMYB12 would be useful for marker-assisted selection (MAS) of tomato fruit color. To develop a gene-based marker, 4.9 kb of the SlMYB12 gene including a potential promoter region was sequenced from the red-fruited (YY) line 'FCR' and pink-fruited (yy) line 'FCP'. Sequence alignment of these SlMYB12 alleles revealed no sequence variations between 'FCR' and 'FCP'. To identify SlMYB12-linked single nucleotide polymorphisms (SNPs), 'FCR' and 'FCP' were genotyped using a SolCAP Tomato SNP array and CAPS markers (CAPS-456, 531, 13762, and 38123) were developed from the four SNPs (solcap_snp_sl_456, 531, 13762, and 38123) most closely flanking the SlMYB12. These CAPS markers were mapped using $F_2$ plants derived from 'FCR' ${\times}$ 'FCP'. The map positions of the fruit peel color locus (Y) were CAPS-13762 (0 cM) - 456 (11.09 cM) - Y (15.71 cM) - 38123 (17.82 cM) - 531 (30.86 cM), and the DNA sequence of SlMYB12 was physically anchored in the middle of CAPS-456 and CAPS-38123, indicating that fruit peel color in domesticated tomato is controlled by SlMYB12. A total of 64 SolCAP tomato germplasms were evaluated for their fruit peel color and SNPs located between solcap_snp_sl_456 and 38123. Seven SNPs that were detected in this interval were highly conserved for pink-fruited accessions and specific to transparent fruit peel traits, as depicted by a phenetic tree of 64 accessions based on the seven SNPs.
Jo, Beom-Ho;Lee, Chang Soo;Song, Hae-Ryong;Lee, Hyung-Gwan;Oh, Hee-Mock
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.24
no.9
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pp.1189-1195
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2014
A strain-specific identification method is required to secure Chlorella strains with useful genetic traits, such as a fast growth rate or high lipid productivity, for application in biofuels, functional foods, and pharmaceuticals. Microsatellite markers based on simple sequence repeats can be a useful tool for this purpose. Therefore, this study developed five novel microsatellite markers (mChl-001, mChl-002, mChl-005, mChl-011, and mChl-012) using specific loci along the chloroplast genome of Chlorella vulgaris. The microsatellite markers were characterized based on their allelic diversities among nine strains of C. vulgaris with the same 18S rRNA sequence similarity. Each microsatellite marker exhibited 2~5 polymorphic allele types, and their combinations allowed discrimination between seven of the C. vulgaris strains. The two remaining strains were distinguished using one specific interspace region between the mChl-001 and mChl-005 loci, which was composed of about 27 single nucleotide polymorphisms, 13~15 specific sequence sites, and (T)n repeat sites. Thus, the polymorphic combination of the five microsatellite markers and one specific locus facilitated a clear distinction of C. vulgaris at the strain level, suggesting that the proposed microsatellite marker system can be useful for the accurate identification and classification of C. vulgaris.
This study focused on the green peach aphid, Myzus persicae, as an indicator pest in Chinese cabbage cultivation to develop a genetic marker. We hypothesized that M. persicae gene flow is related to climate change. Genetic variation was analyzed using five local populations collected at different altitudes (157 m, 296 m, 560 m, 756 m and 932 m above sea level) in Hoengseong, Pyeongchang, and Gangneung areas, plus a laboratory strain used as an outgroup. There were no differences in ecological characteristics among strains. Esterase isozyme pattern and inter-simple sequence repeat (ISSR) PCR results showed significantly different bands between laboratory and wild, local populations. However, there was no difference among local populations. Partial fragments of ribosomal RNA (rRNA) and mitochondrial cytochrome oxidase I (mtCO I) were amplified and their nucleotide sequence was analyzed. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) were detected in internal transcribed spacer-2 (ITS-2) and mtCO I regions among the five local populations. These SNPs can be use to discriminate different populations of M. persicae to monitor gene flow.
Attributable to their major function in pathogen recognition, the use of bovine leukocyte antigens (BoLA) as disease markers in immunological traits in cattle is well established. However, limited report exists on polymorphism of the BoLA gene in zebu cattle breeds by high resolution typing methods. Thus, we used a polymerase chain reaction sequence-based typing (PCR-SBT) method to sequence exon 2 of the BoLA class II DRB3 gene from 100 animals (Boran, n = 13; Sheko, n = 20; Fogera, n = 16; Horro, n = 19), Hanwoo cattle (n = 18) and Bangladesh Red Chittagong zebu (n = 14). Out of the 59 detected alleles, 43 were already deposited under the Immuno Polymorphism Database for major histocompatibility complex (IPD-MHC) while 16 were unique to this study. Assessment of the level of genetic variability at the population and sequence levels with genetic distance in the breeds considered in this study showed that Zebu breeds had a gene diversity score greater than 0.752, nucleotide diversity score greater than 0.152, and mean number of pairwise differences higher than 14, being very comparable to those investigated for other cattle breeds. Regarding neutrality tests analyzed, we investigated that all the breeds except Hanwoo had an excess number of alleles and could be expected from a recent population expansion or genetic hitchhiking. Howbeit, the observed heterozygosity was not significantly (p < 0.05) higher than the expected heterozygosity. The Hardy Weinberg equilibrium (HWE) analysis revealed non-significant excess of heterozygote animals, indicative of plausible over-dominant selection. The pairwise FST values suggested a low genetic variation among all the breeds (FST = 0.056; p < 0.05), besides the rooting from the evolutionary or domestication history of the cattle. No detached clade was observed in the evolutionary divergence study of the BoLA-DRB3 gene, inferred from the phylogenetic tree based on the maximum likelihood model. The investigation herein indicated the clear differences in BoLA-DRB3 gene variability between African and Asian cattle breeds.
The monocyte chemotactic protein-3 (MCP3), on chromosome 17q11.2-q12, is a secreted chemokine, which attracts macrophages during inflammation and metastasis. In an effort to discover additional polymorphism(s) in genes whose variant(s) have been implicated in asthma, we scrutinized the genetic polymorphisms in MCP3 to evaluate it as a potential candidate gene for asthma host genetic study. By direct DNA sequencing in twenty-four individuals, we identified four sequence variants within the 3 kb full genome including 1,000bp promoter region of MCP3; one in promoter region (-420T>C), three in intron (+136C>G, +563C>T, +984G>A) respectively. The frequencies of those four SNPs were 0.020 (-420T>C), 0.038 (+136C>G), 0.080 (+563C>T), 0.035 (+984G>A), respectively, in Korean population (n = 598). Haplotypes, their frequencies and linkage disequilibrium coefficients (|D'|) between SNP pairs were estimated. The associations with the risk of asthma, skin-test reactivity and total serum IgE levels were analyzed. Using statistical analyses for association of MCP3 polymorphisms with asthma development and asthma-related phenotypes, no significant signals were detected. In conclusion, we identified four genetic polymorphisms in the important MCP3 gene, but no significant associations of MCP3 variants with asthma phenotypes were detected. MCP3 variation/haplotype information identified in this study will provide valuable information for future association studies of other allergic diseases.
Roots of Glycine max and Miscanthus sinensis and soil samples were collected from various field sites at Goesan, Chungbuk in Korea. Microscopic observations of the roots indicated high colonization rates of both arbuscular mycorrhizal fungi(AMF) and other fungi. The partial small subunit of ribosomal DNA genes were amplified with the genomic DNA extracted from their roots by nested polymerase chain reaction(PCR) with universal primer NS1 and fungal specific primers AML Restriction fragment length polymorphism(RFLP) was analyzed using the combinations of three restriction enzymes, HinfI, AluI and AsuC21. Nucleotides sequence analysis revealed that ten sequences from Miscanthus sinensis and one sequence from Glycine max were close to those of arbuscular mycorrhizal fungi. Also, 33% of total clones amplified with NS31-AM1 primers from M. sinensis and 97% from G. max were close to Fusarium oxysporum or other pathogenic fungi, and they were successfully distinguished from AME Results suggested that these techniques could help to distinguish arbuscular mycorrhizal fungi from root pathogenic fungi in the plant roots. Especially, DNA amplified by these primers showed distinct polymorphisms between AMF and plant pathogenic species of Fusarium when digested with AsuC21.
Tawfeek, Gihan M.;Elwakil, Hala S.;Awad, Nabil S.;EI-Hoseiny, Laila;Thabet, Hala S.;Sarhan, Rania M.;Darweesh, Samar K.;Anwar, Wagida A.
Parasites, Hosts and Diseases
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v.47
no.3
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pp.259-264
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2009
Genetic polymorphisms of encoding antigen B2 gene (AgB2) in Echinococcus granulosus were studied using PCR-RFLP and DNA sequencing among 20 Egyptian isolates. Five isolates from different host origins (humans, camels, pigs, and sheep) were collected and used. All examined isolates of each host group gave very similar patterns of PCR-RFLP after restriction enzyme digestion with Alul, with the gene size of approximately 140 bp and 240 bp for sheep and human isolates, and approximately 150 bp and 250 bp for pig and camel isolates. No digestion pattern was obtained after incubation of all studied isolates with EcoRI. These results reveal high intra-group homogeneity. DNA sequence analysis highlighted that human infecting strain showed 100% identity with respect to sheep infecting isolate, 96% and 99% with pig and camel infecting isolates, respectively.
Kim, Woo-Jin;Jung, Hyungtaek;Shin, Eun-Ha;Baek, Ilseon
The Korean Journal of Malacology
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v.30
no.3
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pp.197-210
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2014
Single nucleotide polymorphisms (SNPs) are widely acknowledged as the marker of choice for many genetic and genomic applications because they show co-dominant inheritance, are highly abundant across genomes and are suitable for high-throughput genotyping. Here we evaluated the applicability of SNP markers developed from Crassostrea gigas and C. virginica expressed sequence tags (ESTs) in closely related Crassostrea and Ostrea species. A total of 213 putative interspecific level SNPs were identified from re-sequencing data in six amplicons, yielding on average of one interspecific level SNP per seven bp. High polymorphism levels were observed and the high success rate of transferability show that genic EST-derived SNP markers provide an efficient method for rapid marker development and SNP discovery in closely related oyster species. The six EST-SNP markers identified here will provide useful molecular tools for addressing questions in molecular ecology and evolution studies including for stock analysis (pedigree monitoring) in related oyster taxa.
Intraspecific genetic relationship of 19 variation types of the Yam (Dioscorea alata) classified by their external morphological characteristics such as leaf and tuber shape were assessed by DNA using random and specific primer. Twenty two out of 113 primers (100 random[10-mer] primers, two 15 mer [M13 core sequence, and (GGAT)$_4$ sequence]) had been used in PCR-amplification. Only 12 primers, however, were success in DNA amplification in all of the analyzed plants, resulting in 93 randomly and specifically amplified DNA fragments. The analyzed taxa showed very high polymorphisms(69 bands, 71.0 %), allowing individual taxon to be identified based on DNA fingerprinting. Monomorphic bands among total amplified DNA bands of each primer was low under the 50%. Similarity indices between accessions were computed from PCR(polymerase chain reaction) data, and genetic relationships among intraspecific variations were closely related at the levels ranging from 0.66 to 0.90. These DNA data were not matched well with those of morphological characters since they were divided into two major groups at the similarity coefficient value of 0.70. Therefore, Grouping of species into variation types by mainly morphological charactistics was suggested unreasonable.
Fusarium head blight (FHB), also known as scab, caused mainly by Fusarium graminearum is a devastating disease of wheat in regions that are warm and humid during flowering. In addition to significant yield and quality losses, the mycotoxin deoxynivalenol produced by the pathogen in infected wheat kernels is a serious problem for food and feed safety. Twenty- three Korean cultivars and "Sumai 3", which is a FHB-resistant Chinese cultivar were tested for Type I, Type II resistances of FHB. Three cultivars were identified as resistant in Type I assessment, and two cultivars were resistant in Type II assessment. Genetic variation and relationship among the cultivars were evaluated on the basis of 11 Simple Sequence Repeat (SSR) and 29 Sequence Tagged Site (STS) markers that were linked to FHB resistance Quantitative Trait Loci (QTL) on chromosome 3BS. One SSR and 7 STS markers detected polymorphisms. Especially, using a STS marker (XSTS3B-57), 32.4% of the variation for Type II FHB resistance could be explained. Genetic relationship among Korean wheat cultivars was generally consistent with their released year. These markers on chromosome 3BS have the potential for accelerating the development of Korean wheat cultivars with improved Fusarium head blight resistance through the use of marker-assisted selection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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