• 제목/요약/키워드: Separation Control

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저산소성 허혈성 뇌손상이 유발된 신생백서에서 단일세포의 분리 (Single Cell Dissociation Methods for Flow Cytometric Cell Death Analysis of Hypoxia-Ischemia Injured Newborn Rat Pup Brain)

  • 황종희;성동경;최창원;강샘;장윤실;박원순;이문향
    • Clinical and Experimental Pediatrics
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    • 제48권5호
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    • pp.545-550
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    • 2005
  • 목 적: 저산소성 허혈성 손상을 받은 신생아의 뇌조직에서 유세포 방법을 통해 세포의 사멸을 분석하기 위해서는 단일세포의 분리가 이루어져야 한다. 본 연구는 세포 분리에 있어서 세포막의 소실을 최소화하고 항원성을 유지하기 위하여 물리적인 방법과 효소 처리를 통한 세포 분리방법의 효율성에 대해 알아보고자 하였다. 방 법 : 생후 7일된 10마리의 SD 신생백서에 우측 경동맥 결찰 후, 8% 산소에 노출시켜 저산소성 허혈증의 손상을 유발하였으며 48시간이 지난 후 뇌조직을 얻어 같은 수의 정상 대조군과 비교하였다. 세포 분리는 물리적인 방법(pipette)과 효소 처리(trypsin 및 collagenase) 방법을 통하여 이루어 졌으며, 세포막의 손상 정도와 범위에 대해서는 annexin V 및 propidium iodide의 형광 염색을 통한 유세포 분석방법을 이용하였다. 결 과 : 정상 대조군에서, 물리적인 방법을 통한 세포 분리가 양반구 모두에서 효소 처리를 한 경우에 비해서 세포의 사멸과 괴사가 통계적으로 유의하게 증가하였다. 저산소성 허혈증을 유발한 군 중, collagenase를 이용하여 세포 분리를 시행한 경우에서 우측 반구의 세포 사멸과 괴사의 비율이 좌측 반구 및 정상 대조군 보다 유의하게 증가하였다. 효소 처리를 통한 세포 분리에서는 서로 유사한 경향을 보였으나, trypsin을 이용한 경우가 collagenase를 이용한 경우에 비해 세포 변화의 정도가 유의하게 감소하였다. 결 론 : 신생아의 뇌조직에서 collagenase를 이용한 단일 세포 분리방법이 세포막의 손상을 최소화하면서 세포막의 성상을 보존할 수 있는 가장 유용한 방법이었다.

Determination of Betaine in Fructus Lycii Using Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography with Evaporative Light Scattering Detection

  • Shin, Hyun-Du;Suh, Joon-Hyuk;Kim, Jung-Hyun;Lee, Hye-Yeon;Eom, Han-Young;Kim, Un-Yong;Yang, Dong-Hyug;Han, Sang-Beom;Youm, Jeong-Rok
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제33권2호
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    • pp.553-558
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    • 2012
  • A simple new method was developed for the determination of betaine in Fructus Lycii using hydrophilic interaction liquid chromatography with evaporative light scattering detection (HILIC-ELSD). Good chromatographic separation and reasonable betaine retention was achieved on a Kinetex HILIC column ($2.1{\times}100mm$, $2.6{\mu}m$) packed with fused-core particle. The mobile phase consisted of (A) acetonitrile and (B) 10 mM ammonium formate (pH 3.0)/acetonitrile (90/10, v/v). It was used with gradient elution at a flow rate of 0.7 mL/min. The column temperature was set at $27.5^{\circ}C$ and the injection volume was $10{\mu}L$. The ELSD drift tube temperature was $50^{\circ}C$ and the nebulizing gas (nitrogen) pressure was 3.0 bar. Stachydrine, a zwitterionic compound, was used as an internal standard. Calibration curve over $10-250{\mu}g/mL$ showed good linearity ($R^2$ > 0.9992) and betaine in the 70% methanol extract of Fructus Lycii was well separated from other peaks. Intraand inter-day precision ranged from 1.1 to 3.0% and from 2.4 to 5.3%, respectively, while intra- and inter-day accuracy ranged from 100.0 to 107.0% and from 94.3 to 103.9%, respectively. The limit of quantification (LOQ) was $10{\mu}g/mL$ and the recoveries were in the range of 98.2-102.7%. The developed HILIC-ELSD method was successfully applied to quantitatively determine the amount of betaine in fourteen Fructus Lycii samples from different locations, demonstrating that this method is simple, rapid, and suitable for the quality control of Fructus Lycii.

명월초 추출물의 항염 효과에 대한 연구 (Anti-inflammation Effect of Gynura Procumbens extract)

  • 전형주;권혜진
    • 디지털융복합연구
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    • 제14권10호
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    • pp.515-520
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    • 2016
  • 본 연구는 명월초 추출물의 Nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells (NF-kB)의 농도 및 Nitric Oxide(NO) 측정을 통하여 현대인들의 피부염증 및 감염질환 예방에 도움이 되는 천연원료 개발을 위하여 수행하였다. 명월초 추출물의 cytosol과 nucleus의 분리과정을 거쳐 Human Dermal Fibroblasts(HDF cell)을 이용하여 다양한 염증조절 인자 중 대표적인 NF-kB 농도를 측정하였고 RAW264.7 세포에 대하여 신경전달 매개체로 피부면역 반응에 중요한 역할을 하는 NO의 양을 분석하였다. 명월초 추출물을 투여한 결과, NF-kB의 단백질과 mRNA 밴드가 감소하여 명월초의 항염 효과가 피부염증 및 질환예방에 효과가 있을 것으로 기대할 수 있었다. 또한 명월초 추출물의 농도가 증가함에 따라 NO는 유의적으로 감소하여 농도 의존적 결과를 보였다. 따라서, 향후 임상적 측면에서의 더 세밀한 항염 효과에 대한 연구가 지속된다면 명월초는 식품으로 뿐 아니라 화장품 등 현대인들이 넓게 적용할 수 있는 융합소재로 이용될 수 있으리라 사료된다.

HPLC Method for Simultaneous Quantitative Detection of Quercetin and Curcuminoids in Traditional Chinese Medicines

  • Ang, Lee Fung;Yam, Mun Fei;Fung, Yvonne Tan Tze;Kiang, Peh Kok;Darwin, Yusrida
    • 대한약침학회지
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    • 제17권4호
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    • pp.36-49
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    • 2014
  • Objectives: Quercetin and curcuminoids are important bioactive compounds found in many herbs. Previously reported high performance liquid chromatography ultraviolet (HPLC-UV) methods for the detection of quercetin and curcuminoids have several disadvantages, including unsatisfactory separation times and lack of validation according the standard guidelines of the International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use. Methods: A rapid, specific, reversed phase, HPLC-UV method with an isocratic elution of acetonitrile and 2% v/v acetic acid (40% : 60% v/v) (pH 2.6) at a flow rate of 1.3 mL/minutes, a column temperature of $35^{\circ}C$, and ultraviolet (UV) detection at 370 nm was developed. The method was validated and applied to the quantification of different types of market available Chinese medicine extracts, pills and tablets. Results: The method allowed simultaneous determination of quercetin, bisdemethoxycurcumin, demethoxycurcumin and curcumin in the concentration ranges of $0.00488-200{\mu}g/mL$, $0.625-320{\mu}g/mL$, $0.07813-320{\mu}g/mL$ and $0.03906-320{\mu}g/mL$, respectively. The limits of detection and quantification, respectively, were 0.00488 and $0.03906{\mu}g/mL$ for quercetin, 0.62500 and $2.50000{\mu}g/mL$ for bisdemethoxycurcumin, 0.07813 and $0.31250{\mu}g/mL$ for demethoxycurcumin, and 0.03906 and $0.07813{\mu}g/mL$ for curcumin. The percent relative intra day standard deviation (% RSD) values were $0.432-0.806{\mu}g/mL$, $0.576-0.723{\mu}g/mL$, $0.635-0.752{\mu}g/mL$ and $0.655-0.732{\mu}g/mL$ for quercetin, bisdemethoxycurcumin, demethoxycurcumin and curcumin, respectively, and those for intra day precision were $0.323-0.968{\mu}g/mL$, $0.805-0.854{\mu}g/mL$, $0.078-0.844{\mu}g/mL$ and $0.275-0.829{\mu}g/mL$, respectively. The intra day accuracies were 99.589%-100.821%, 98.588%-101.084%, 9.289%-100.88%, and 98.292%-101.022% for quercetin, bisdemethoxycurcumin, demethoxycurcumin and curcumin, respectively, and the inter day accuracy were 99.665%-103.06%, 97.669%-103.513%, 99.569%-103.617%, and 97.929%-103.606%, respectively. Conclusion: The method was found to be simple, accurate and precise and is recommended for routine quality control analysis of commercial Chinese medicine products containing the flour flavonoids as their principle components in the extracts.

들깨 오메가 지방산의 기능과 함량변이 및 이용 (Industrial Utilization and Function of Omega Fatty Acid and Their Content Variation in Perilla)

  • 류수노;이승택;이정일;이재학
    • 한국작물학회지
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    • 제41권spc1호
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    • pp.110-122
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    • 1996
  • The n-3 family fatty acids containing ${\alpha}$-linolenic acid(18:3, ALA) have been known as physiological activation materials such as inhibitory effects on the incidence of hyper-tension, coronary heart disease and cancers as well as the control of senilc dementia. Although a lot of ALA(about $63\%$) are contained in perilla oil, it has not been commercialized yet because the purification technique of the ALA has not been well established. The procedure of purification of ALA from perilla oil was saponified with 1 N-KOH /ethanol and then saturated and low level unsaturated fatty acids were removed by low-temperature crystallization method. The concentrated unsaturated fatty acids (containing about $75\%$ ALA) went down through the silver nitrate-impregnated silica column chromatography for separation of high purity of ALA. The results obtained we Fraction B, C and D contained ALA more than $85.5\%$(recovery, >$88.9\%,\;95.4\%$(recovery, >$54.4\%$) and $99.9\%$(recovery, >$31.5\%$) in purity, respectively. Seed oil content of the tested varieties were ranged from 34.8 to $54.1\%$ with $45.3\%$ of varietal means. The major omega fatty acids contained in the oil were oleic acid(n-9) $15.2\%$, linoleic acid(n-6) $13.9\%$ and linolenic acid(n-3) $63.1\%$ in the mean value. Varietal variation of n-9, 6 and 3 fatty acids ranged of $9.5\~21.4\%,\;9.1\~20.4\%$ and $50.6\~70.5\%$ respectively. Unsaturated fatty acid were averaged $92.2\%$ of seed oil in fatty acid composition. The ratios of n-6 to n-3 ranged of $0.13\~0.34\%$($0.22\%$ in mean value). The highest n-3 fatty acid variety was Yecheonjong being $70.5\%$. The lowest variety in ratios of n-6 to n-3 was Goseongjong being $0.13\%$. Oil content showed positive correlation with stearic acid and linolenic acid, while the negative correlation with oil content and linoleic acid. On the other hand, A significant negative correlation were showed between linolnic acid and the ratios n-6/n-3 fatty acid, saturated fatty acid. Saturated fatty acid was highly correlated with unsaturated fatty acid negatively being $r= -0.723^{**}$.

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직교변환에 의한 Walsh 및 Golay 코드의 상호상관 제어방식과 수정된 코드를 사용한 비동기 CDMA 시스템의 비트오율 성능에 관한 연구 (A Study on Cross-correlation Control Schemes on Walsh and Golay Codes Based on the Orthogonal Transformation and BER Performance Evaluation of Asynchronous CDMA System Using the Modified Codes)

  • 이원창;김명진
    • 융합신호처리학회논문지
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    • 제9권4호
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    • pp.304-312
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    • 2008
  • Walsh 코드나 Golay 코드와 같은 직교 코드는 동기가 맞지 않은 경우 상호상관 값이 커질 수 있으므로 CDMA 시스템의 역방향 링크와 같이 사용자간 동기가 맞지 않는 경우 직교성이 손상되어 사용자간 간섭이 발생하기 때문에 사용자 구별용으로 거의 사용되지 않는다. Wysocki는 기존의 Walsh-Hadamard 행렬에 직교변환 행렬을 곱함으로써 생성된 코드들이 직교성을 유지하면서 코드간 상호상관 값이 커지지 않도록 할 수 있음을 보였다. Soberly와 Wysocki는 Golay 코드에 대해서 유사한 상호상관 함수의 제어방식을 제안하였다. 이것은 적절한 직교변환을 사용하면 Walsh 코드나 Golay 코드의 상호상관 값을 감소시킬 수 있고, 따라서 CDMA 역방향 링크에서 사용자 구별용으로 사용될 수 있음을 의미한다. 본 논문에서는 비동기 CDMA 링크의 성능에 영향을 주는 코드간의 상호상관 관련 파라미터들을 알아보고, 직교변환에 의해 이들 파라미터들이 어떻게 변화되는지 분석하였다. Walsh 코드와 Golay 코드에 대한 직교변환 행렬을 설계함에 있어 수정된 Walsh 또는 Golay 코드의 직교성을 유지하면서 결과 코드의 비주기 상호상관 피크치의 최대값($ACC_{max}$) 또는 비주기 상호상관의 제곱평균($R_{cc}$)을 최소화하도록 하였다. 직교변환에 의해 생성된 코드집합을 사용한 CDMA 시스템에 대하여 사용자간 동기가 맞지 않은 경우에 대해 비트오율 성능을 시뮬레이션을 통해 분석하여 성능을 개선시킬 수 있음을 확인하였다.

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이온크로마토그래피를 이용한 토양 중 퍼클로레이트 정량에 관한 국제표준(안) 연구 (A Study on Developing the Draft of International Standard for the Determination of Perchlorate in Soil Using Ion Chromatography)

  • 최천일;이군택;박민기;정문주;김지양;강지영;류지영
    • 한국지하수토양환경학회지:지하수토양환경
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    • 제20권6호
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    • pp.55-61
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    • 2015
  • Based on the literature study for the determination of perchlorate in soil we chose the ion chromatography as a measurement method and decided to use 70 mM KOH as an eluent to avoid the interference derived from the co-elution of pyrophosphate (P2O74−), tripolyphosphate (P3O105−). Also we proposed to use air dried soil through 0.15 mm sieve and distilled water as an extractant. Under the these basic concepts, we carried out the experiments to set up the detail procedure like solid to liquid ratio (S/L ratio), extraction time, device for extraction and indicating factors for quality control (e.g. precision, accuracy, MDL, LOQ). In case of time and device for extraction, 5 hours of mechanical shaking or 1 hour of centrifugation showed better precision and accuracy than that of sonication for 1 hour According to these results, we proposed the extraction method combining 5 hours of mechanical shaking with 1 hour of centrifugation. From the aspect of S/L ratio, the ratio of 1/2 or 1/3 showed resonable precision and accuracy. In case of the ratio of 1/2, there would be some problems in the separation process when the proportion of fine particle is high. Therefore, we proposed the extraction ratio of solid to liquid as 1/3 instead of 1/2. With the consideration of cost effectiveness and soil salinity, we proposed the use of cartridge for removing the interfering anions like chloride, sulfate and carbonate in specific sample such as saline soil.

다층박막적층법을 이용한 담수화용 그래핀 나노복합체 분리막 개발 (Development of Graphene Nanocomposite Membrane Using Layer-by-layer Technique for Desalination)

  • 유혜원;송준호;김창민;양은태;김인수
    • 멤브레인
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    • 제28권1호
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    • pp.75-82
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    • 2018
  • 정삼투법을 이용한 해수담수화는 역삼투 공정에 비해 에너지 절감이 가능하여 해수담수화 차세대 기술로 주목받고 있다. 막을 기반으로 하는 수처리 분야에서 분리 성능을 향상시키고 새로운 기능을 부여하기 위해, 고분자 매트릭스에 필러인 나노물질을 삽입하는 박막 나노복합체 분리막(thin film nanocomposite, TFN) 개발에 대한 연구가 요구되고 있다. 본 연구에서는 딥 코팅(dip coating) 방법을 기반으로 한 다층박막적층법(Layer-by-layer, LBL)을 이용하여 산화그래핀(graphene oxide, GO)의 나노 적층구조를 제어하여, 정삼투 공정에서의 높은 안정성 및 높은 수투과도 및 염 제거, 낮은 염 역확산을 갖는 그래핀 나노복합체 분리막을 개발하고자 하였다. 정삼투 공정의 성능 향상을 위한 산화그래핀의 환원 반응시간과 LBL 딥코팅 적층 수의 최적화를 통해, 수투과도 2.51 LMH/bar, 물분자 선택성 8.3 L/g, 염 제거율 99.5%를 갖는 나노복합체 분리막을 개발하였다. 이는 상용화된 CTA FO 분리막보다 수투과도는 10배, 물분자 선택성은 4배 높게 향상되었으며, 염 제거율은 비슷한 수준으로 나타났다.

백서에서 혈소판 풍부 혈장의 제작과 유효성에 대한 실험적 연구 (FABRICATION OF PLATELET-RICH PLASMA IN A RAT MODEL AND THE EFFICACY TEST IN VITRO)

  • 이상훈;조영욱;지현숙;안강민;이부규
    • Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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    • 제29권2호
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    • pp.113-122
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    • 2007
  • Purpose: Platelet-rich plasma (PRP) is known to accelerate and/or enhance hard and soft tissue healing and regeneration. As such, PRP has been used in various clinical fields of surgery. Recently there have been several attempts to use PRP in the field of tissue engineering. However, some controversies still exist on exact mechanism and benefits of PRP. Therefore various animal experiments are necessary to reveal the effect of the PRP. However, even if animal experiment is performed, the efficacy of the experiment could not be validated due to absence of an animal PRP model. The purpose of this study is to establish rat PRP model by comparing several PRP fabricating methods, and to assay growth factor concentration in the PRP. Materials and methods: Rat blood samples were collected from nine SD rat (body weight: 600-800g). PRP was prepared using three different PRP fabricating methods according to previously reported literatures. (Method 1: 800 rpm, 15 minute, single centrifuge; Method 2: 1000 rpm, 10 minute, double centrifuge; Method 3: 3000 rpm, 4min and 2500 rpm, 8 min, double centrifuge). Platelet counts were evaluated in an automated machine before and after PRP fabrications. In terms of growth factor assay, prepared PRP were activated with 100 unit thrombin and 10% calcium chloride. Growth factor (PDGF-BB, VEGF) concentrations on incubation time were determined by sandwich-ELISA technique. Results: An average of 3ml (via infraorbital venous plexus) to 15ml (via celiac axis) the rat blood could be collected. By using Method 3 (3000 rpm, 4 min and 2500 rpm, 8 min, double centrifugation), around 1.5ml of PRP could be prepared. This method allowed us to concentrate platelet 3.77-fold on average. PDGF-BB concentration (mean, 1942.10 pg/ml after 1 hour incubation) and VEGF concentration (mean, 952.71 pg/ml after 1 hour incubation) in activated PRP were higher than those in untreated blood. Also PDGF-BB showed constant concentration during 4-hour incubation, while VEGF concentration was decreased after 1 hour. Conclusion: Total 11,000 g minute separation and condensation double centrifuge method can produce efficient platelet-rich plasma. Platelet-rich plasma activated with thrombin has showed higher concentrations of growth factors such as PDGF-BB and VEGF, compared to the control group. Platelet-rich plasma model in a rat model was confirmed in this study.

효율적인 자원 할당을 위한 사전 예약과 즉석 예약 간 공유 자원 관리 (Shared Resource Management Scheme in Advance and Immediate Reservations for Effective Resource Allocation)

  • 이동훈;김종원
    • 한국통신학회논문지
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    • 제29권7B호
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    • pp.685-696
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    • 2004
  • 많은 양의 대역폭을 사용하는 실시간 멀티미디어 응용들은 일정 수준의 서비스 품질을 보장받기 위해 필요한 자원을 사전에 예약하고 이를 사용할 수 있어야 한다. 자원의 사전 예약을 위해서는 해당 자원에 대한 사용 기간의 명시와 이를 이용해 자원을 사전에 예약하고 할당하는 자원 관리자가 필요하다. 따라서 자원의 사용 기간에 관계없이 예약 요청 발생시점에서 가용 자원의 양만을 고려하는 전통적인 자원 할당 방식과는 달리 사전 예약을 제공하는 자원 관리자는 사전에 예약된 자원과 사용 기간을 명시하지 않는 즉석 예약을 위해 할당된 자원이 서로충돌하지 않도록 예약 요청들을 처리해야 한다. 일반적으로 자원 예약의 충돌은 예약 형태에 따라 할당 자원을 분리함으로써 해결할 수 있지만 이는 자원의 낭비를 초래하게 된다. 본 논문은 즉석 예약과 사전 예약 요청을 위해 준비된 자원 공간을 변동하는 자원 경계를 이용해 효율적으로 공유하는 자원 관리 방식을 제안한다. 제안하는 자원 관리 방식은 네트워크 비용 함수를 이용해 자원 간 경계를 설정하고, 예약 자원의 충돌에 따라 비용 함수의 가중치 변수를 조정해 경계를 변화시킴으로써 공유 자원을 효과적으로 할당하고 관리한다. 또한, 사용자 효용 함수의 정의를 통해 예약된 자원을 사용하는 서비스의 품질로부터 사용자가 얻는 효용을 정량적으로 측정하며, 자원의 사전 예약이 사용자 효용 및 전체 자원 활용에 미치는 영향을 고찰한다. 네트워크 시뮬레이터(NS-2)를 이용한 실험은 제안한 자원 관리 방식이 자원 공간의 고정 분할과 같은 방식과 비교해 높은 자원 활용율과 더불어 안정적인 서비스 품질을 제공할 수 있음을 보여준다.