지구상에서 생합성된 천연물은 완급의 차이는 있겠으나 궁극적으로는 CO$_{2}$ H$_{2}$O, NH$_{3}$ 등으로 다시 산화분해된다. 이 분해과정은 미생물의 효소반응으로 이루어지며 생물권의 항상성도 일차적으로는 미생물의 이 산화분해작용으로 유지된다고 볼 수 있다. 미생물이 영위하는 이러한 효소반응을 생리활성물질의 공업적합성에 이용한 초기의 예로는 부현피질호르몬의 합성과정에서 Rhizopus nigricans를 사용한 수산화반응과 ascorbic acid 합성과정에서 Acetobacter xylinum을 사용한 탈수반응이 유명하며 이러한 반응은 아직도 이용되고있다. 특히 지난 십수년간의 응용미생물학의 발전은 대단한 것이며 여러가지 항생물질, 당질, amino산, 핵산관련물질들이 생리활성물질과 함께 발효법으로 생산되고 있다. 그러나 이글에서 다루는 미생반응은 발효과정에서 생산되는 미생물자체의 일차적 대사산물 (primary metabolite)이나 이차적대사산물 (secondary metabolite)를 대상으로 한것이 아니며 어디까지나 외부에서 공급되는 화학물질에 대한 균체의 효소반응산물을 목적물로 하고있다. 또한 근래 활발히 이용되는 균체고정및 효소고정법을 이용한 효소공학적수법도 제외하고 배양과정의 균체 또는 배양후의 군체를 이용한 미생물반응에 한정코저 한다.
Insights into gene expression have the potential for improvement of antibiotic yield and the development of robust production hosts for use in recombinant biomolecule production. $Cubicin^{TM}$ (daptomycin for injection) is a recently approved antibiotic active against many Gram(+) pathogens, including those resistant to methicillin, vancomycin, and fluoroquinolones. Daptomycin is produced as a secondary metabolite by Streptomyces roseosporus. A 128 kb region of DNA including the daptomycin biosynthetic gene cluster (dpt) has been cloned. and sequenced. Using a selected array of nucleic acid probes representing this region, we compared the expression levels of the dpt genes between S. roseosporus wild-type (WT) and derived S. roseosporus high-producer of daptomycin (HP). We observed that the majority of the biosynthetic genes were upregulated in HP compared with WT; a total of 12 genes, including those encoding daptomycin synthetase, showed consistently and significantly higher expression levels, at least 5-fold, in HP compared with WT. In contrast, some genes, flanking the dpt cluster, were expressed at higher levels in the WT strain. The expression of housekeeping genes such as S. roseosporus rpsL, rpsG, and 16S (positive controls) and presumptive intergenic regions in the dpt cluster (negative control) were identical in the two strains. In addition, we compared transcription during the early, mid-log, and early-stationary phases of growth in the HP strain. The same set of genes was upregulated and downregulated under all conditions examined; housekeeping genes showed no relative change in expression level over the periods of growth tested. Analyses of this type would be of value in studies of strain improvement and also for the identification of gene regulation processes that are important for secondary metabolite production.
Kim, Da-Ran;Kim, Su-Hyeon;Lee, Su In;Kwak, Youn-Sig
The Plant Pathology Journal
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v.38
no.4
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pp.372-382
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2022
Soybean is an important source of protein and for a wide range of agricultural, food, and industrial applications. Soybean is being affected by Xanthomonas citri pv. glycines, a causal pathogen of bacterial pustule disease, result in a reduction in yield and quality. Diverse microbial communities of plants are involved in various plant stresses is known. Therefore, we designed to investigate the microbial community differentiation depending on the infection of X. citri pv. glycines. The microbial community's abundance, diversity, and similarity showed a difference between infected and non-infected soybean. Microbiota community analysis, excluding X. citri pv. glycines, revealed that Pseudomonas spp. would increase the population of the infected soybean. Results of DESeq analyses suggested that energy metabolism, secondary metabolite, and TCA cycle metabolism were actively diverse in the non-infected soybeans. Additionally, Streptomyces bacillaris S8, an endophyte microbiota member, was nominated as a key microbe in the healthy soybeans. Genome analysis of S. bacillaris S8 presented that salinomycin may be the critical antibacterial metabolite. Our findings on the composition of soybean microbiota communities and the key strain information will contribute to developing biological control strategies against X. citri pv. glycines.
Sungmin Hwang;Jun Hyeok Yang;Ho Seok Sim;Sung Ho Choi;Byounghee Lee;Woo Young Bang;Ki Hwan Moon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.32
no.11
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pp.1416-1426
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2022
The need to discover new types of antimicrobial agents has grown since the emergence of antibiotic-resistant pathogens that threaten human health. The world's oceans, comprising complex niches of biodiversity, are a promising environment from which to extract new antibiotics-like compounds. In this study, we newly isolated Pseudomonas sp. NIBR-H-19 from the gut of the sea roach Ligia exotica and present both phenotypes and genomic information consisting of 6,184,379 bp in a single chromosome possessing a total of 5,644 protein-coding genes. Genomic analysis of the isolated species revealed that numerous genes involved in antimicrobial secondary metabolites are predicted throughout the whole genome. Moreover, our analysis showed that among twenty-five pathogenic bacteria, the growth of three pathogens, including Staphylococcus aureus, Streptococcus hominis and Rhodococcus equi, was significantly inhibited by the culture of Pseudomonas sp. NIBR-H-19. The characterization of marine microorganisms with biochemical assays and genomics tools will help uncover the biosynthesis and action mechanism of antimicrobial metabolites for development as antagonistic probiotics against fish pathogens in an aquatic culture system.
Bacterial blight, an important and potentially destructive bacterial disease in rice caused by Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo), has recently developed resistance to the available antibiotics. In this study, mass spectrometry (MS)-based metabolite profiling and multivariate analysis were employed to investigate the correlation between timedependent metabolite changes and antimicrobial activities against Xoo over the course of Phomopsis longicolla S1B4 fermentation. Metabolites were clearly differentiated based on fermentation time into phase 1 (days 4-8) and phase 2 (days 10-20) in the principal component analysis (PCA) plot. The multivariate statistical analysis showed that the metabolites contributing significantly for phases 1 and 2 were deacetylphomoxanthone B, monodeacetylphomoxanthone B, fusaristatin A, and dicerandrols A, B, and C as identified by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS), and dimethylglycine, isobutyric acid, pyruvic acid, ribofuranose, galactofuranose, fructose, arabinose, hexitol, myristic acid, and propylstearic acid were identified by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS)-based metabolite profiling. The most significantly different secondary metabolites, especially deacetylphomoxanthone B, monodeacetylphomoxanthone B, and dicerandrol A, B and C, were positively correlated with antibacterial activity against Xoo during fermentation.
We investigated the effects of dissolved oxygen (D.O.) and fructose (C-source) on cell growth and biosynthesis of cyclosporin A (CyA) produced as a secondary metabolite by a wild-type filamentous fungus, Tolypocladium inflatum. This was performed by controlling the level of D.O. and the residual C-source, as required, through adjustment of medium flow rate, medium concentration and agitation rate in fed-batch cultures. CyA production was furned out to be maximal, when D.O. level was controlled around 10% saturated D.O. and concentration of the C-source was maintained sufficiently low (below 2 g/L) not to cause carbon catabolite repression. Under this culture condition, we obtained the highest values of CyA concentration (507.14 mg/L), Qp (2.11 mg CyA/L/hr), $Y_x/s$ (0.49 g DCW/g fructose), $Y_p/s$<(22.56 mg CyA/g fructose), and YTEX>$_p/x$ (48.31 mg CyA/g DCW), but relatively lower values of cell concentration (11.98 g DCW/L) and cell productivity (0.043 g DCW/L/hr), in comparison with other parallel fed-batch fermentation conditions. These results implied that, in the carbon-limited culture with 10% saturated D.O. level, the producer microorganism utilized the C-source more efficiently for secondary metabolism.
Journal of the Korean Society of Industry Convergence
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v.2
no.1
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pp.77-83
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1999
Grown in the secondary broth of production media, the strain Streptomyces albulus has increased more the production of its metabolite ${\varepsilon}$-poly-L-lysine, one of poly(amino acid)s used as disinfecting food additives, than the strain in the primary culture of growth nutrients. Having the strain removed, the large concentrate obtained by ultrafiltrating the secondary culture broth. The concentrated production broth exchanged into followed by detecting in UV flowcell at 220nm the peptide bond of the components eluting the adsorbed proteins and polylysine with NaCl salt of gradient concentration, and has separated into five components. Among them the component in the fourth peak fraction has proved to be the pure ${\varepsilon}$-poly-L-lysine after the portion being hydrolyzed the fraction with HCl into amino acid followed by being the composing amino acid analysis.
Myxobacteria produce diverse secondary metabolites for predation, self-defense, intercellular signaling, and other unknown functions. Many secondary metabolites isolated from myxobacteria show pharmaceutically useful bioactivity such as anticancer, antibacterial, and antifungal activities with a unique mechanism of action. Therefore, a large number of myxobacterial strains have been isolated globally and many bioactive compounds have been purified from them. However, 16S rRNA database analysis indicates that there are far more types of myxobacterial species in the wild than have ever been isolated, and genome sequence analysis suggests that each myxobacterium is capable of producing much more metabolites than already known. In this article, the current status of studies on the secondary metabolites from myxobacteria, their biosynthetic genes, biological functions, and transcriptional regulatory factors governing gene expression were reviewed.
Kim, Jisu;Kwon, Young Sang;Bae, Dong-Won;Kwak, Youn-Sig
The Plant Pathology Journal
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v.36
no.2
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pp.185-191
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2020
Streptomyces griseus S4-7, a well-characterized keystone taxon among strawberry microbial communities, shows exceptional disease-preventing ability. The whole-genome sequence, functional genes, and bioactive secondary metabolites of the strain have been described in previous studies. However, proteomics studies of not only the S4-7 strain, but also the Streptomyces genus as a whole, remain limited to date. Therefore, in the present study, we created a proteomics reference map for S. griseus S4-7. Additionally, analysis of differentially expressed proteins was performed against a wblE2 mutant, which was deficient in spore chain development and did not express an antifungal activity-regulatory transcription factor. We believe that our data provide a foundation for further in-depth studies of functional keystone taxa of the phytobiome and elucidation of the mechanisms underlying plant-microbe interactions, especially those involving the Streptomyces genus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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