In a previous study, we mapped 12 QTLs for 1,000 grain weight (TGW) in the 172 $BC_2F_2$ lines derived from a cross between Oryza sativa ssp. Japonica cv. Hwaseongbyeo and O. rufipogon. These QTLs explained 5.4 - 11.4% of the phenotypic variance for TGW. Marker-aided selection combined with backcrosses was employed to develop QTL-NILs for each QTL. $BC_2F_2$ lines with each target QTL were backcrossed to Hwaseongbyeo twice and then allowed to self to produce $BC_4F_5$ populations. SSR markers linked to TGW were employed to select QTL-NILs with the respective target QTL. Six QTL-NILs with the recurrent parent, Hwaseongbyeo were evaluated for nine traits for three years from 2007 and 2009. Differences were observed between each of the 6 QTL-NILs and Hwaseongbyeo in TGW. In addition to TGW, these QTL-NILs displayed differences in other agronomic traits possibly indicating a tight linkage of genes controlling these traits. The direction of the QTL for TGW in 6 QTL-NILs was consistent as in the $BC_2F_2$ lines from the same cross. Difference in TGW between each of the QTL-NILs and Hwaseongbyeo was associated with the difference in one or two grain shape traits; grain length, grain width, and grain thickness. SSR markers linked to the QTL for TGW will facilitate selection of the grain shape character in a breeding program to diversify grain shape and provide the foundation for map-based gene isolation. Also, the QTL-NILs developed in this report and the progenies from crosses between the QTL-NILs will be useful in clarifying epistatic interactions among QTLs for TGW.
Beta-carotene producing transformants were produced in the background of 'Nagdongbyeo', a Japonica rice cultivar. Introgression of the carotenoid locus in the transformant, PAC4-2 into the elite cultivar 'Ilpumbyeo' was started. To initiate a backcrossing program, we surveyed 220 SSR markers and found that 38% of them were polymorphic between 'Ilpumbyeo' as a recurrent parent and the PAC4-2 as a recipient parent. The selection strategy comprising foreground and background selection was employed. First, foreground selection was practiced in $BC_1$, $BC_2$, and $BC_3$ generations using the transgene specific PCR-based marker in addition to visual scoring of the seed color. Marker-based background selection combined with phenotypic selection was employed from $BC_3F_2$ to $BC_3F_4$ generations. Blast search indicated that the transgene PAC4-2 was located between SSR markers, RM6 and RM482. 240 $BC_3F_3$ and 63 $BC_3F_4$ lines were evaluated for four agronomic traits including days to heading. Most of the lines were similar to Ilpumbyeo in agronomic traits evaluated. The percentage of PAC4-2 genome ranged from 4% to 21% with a mean of 12.5%, which was higher than the expected for an unselected $BC_3$ backcross population. This could be explained by the fact that two genes for beta-carotene and the stripe virus resistance were targeted in this study. We selected 10 representative $BC_3F_5$ lines from 63 $BC_3F_4$ lines based on agronomic traits and carotenoids content. The selection strategy would be appropriate for the introgression of beta-carotene gene in a breeding program.
Kim, Kyeong-Min;Shin, Dongjin;Kim, Kyeong-Hoon;Kwon, Yu-Ri;Park, Hyo-Jin;Hyun, Jong-Nae;Kim, Young-Jin;Oh, Myung-Kyu;Park, Young-Hoon
Journal of Plant Biotechnology
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v.45
no.4
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pp.375-381
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2018
The consumption of oats (Avena sativa L.) with high nutritional utility is accelerating due to the increased consumers' demand for functional foods. In Korea, naked oats are used as food, while covered oats are used for animal feed. However, it is difficult to distinguish naked oats from covered oats when the husk is removed from the grains by a special process. The present study was carried out to investigate experimental methods that would be beneficial in the segregation of different types of oats after husk removal. Grain quality-related biochemical compounds were analyzed in a bid to differentiate the oat dehulling characteristics. In addition, 61 SSR markers were examined for genetic relationship and variety identification of oats using five naked and seven covered oat varieties. Results showed that, the contents of protein, lipid, and ${\beta}-glucan$ were not significantly different among the oat varieties and this could not be used as an index for distinguishing oats husk character. However, in the fatty acid composition ratio,, naked oats had a higher ratio of stearic acid (C18:0) and oleic acid (C18:1) than covered oats, and covered oats had a higher ratio of linoleic acid (C18:2) and linoleic acid (C18:3) than naked oats. The assessment of SSR marker genotype revealed that 33 polymorphic bands among 12 oat varieties and 1 variety could be distinguished through the combination of polymorphic markers thus indicating the usability of these markers for variety identification in oats.
Journal of the Korean Society of International Agriculture
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v.23
no.5
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pp.546-551
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2011
Chrysanthemums, often called mums or chrysanths, belong to the genus Chrysanthemum, which includes about 30 species of perennial flowering plants in the family Asteraceae. We extracted DNA from Dendranthema grandiflorum ('Smileball') to construct a simple sequence repeat (SSR)-enriched library, using a modified biotin-streptavidin capture method. GS FLX (Genome Sequencer FLX System which provides the flexibility to perform the broad range of applications) sequencing (at the 1/8 run specification) resulted in 18.83 mega base pairs (Mbp) with an average read length of 280.06 bp. Sequence analyses of all SSR-containing clones revealed a predominance of di-nucleotide motifs (16,375, 61.5%) followed by tri-nucleotide motifs (6,616, 24.8%), tetra-nucleotide motifs (1,674, 6.3%), penta-nucleotide motifs (1,283, 4.8%), and hexa-nucleotide motifs (693, 2.6%). Among the di-nucleotide motifs, the AC/CA class was the most frequently identified (93.5% of all di-nucleotide types), followed by the GA/AG class (6.1%), the AT/TA class (0.4%), and the CG/GC class (0.03%). When we analyzed the distribution of different repeat motifs and their respective numbers of repeats, regardless of the motif class, of 100 SSR markers, we found a higher number of di-nucleotide motifs with 70 to 80 repeats; we also found two di-nucleotide motifs with 83 and 89 repeats, respectively, but their product lengths were within optimum size (297 and 300 bp). In future work, we will screen for polymorphisms of possible primer pairs. The results will provide a useful tool for assessing molecular diversity and investigating the population structure among and within Chrysanthemum species.
Using commercial radish varieties for processing, about 30% of radish was discarded due to the root shape and low purity. To raise the processing ability, we tried to develop a new variety producing H-shaped root. As another characteristic required in variety for processing is high purity, we tried to raise purity using simple sequence repeats (SSR) markers for testing seed purity in every segregating generation. To develop Male-sterile (MS) seeding parent, we crossed commercial variety of 'Gwan dong spring' and 'Gyeo ryong spring'. One elite inbred was selected as recurrent parent for the MS plant. The major horticultural traits of selected inbred line were disease resistance, late bolting, heat resistance and bright green root top color. To develop pollen parent, we crossed commercial variety of 'Tae sang king' and 'Seoul spring'. We used individual selection method to develop H-shaped hard root and disease resistant inbred. In each segregating generation, we selected one plant based on phenotype and the uniformity of selected plant was tested by SSR markers using self-pollinated seeds. In the first segregating generation, 64.6% of sib plants shared the same band in PCR amplification using ACMP-490 primer and 66.7% using cnu-316 primer. The uniformity of segregating generations using ACMP-490 and cnu-316 raised in second generation to 68.8%, 70.8%, respectively; in third generation to 93.8%, 100%; in fourth generation to 93.8%, 100%; in fifth generation to 95.8%, 100%; in sixth generation to 100%, 100%. A novel cross was made using selected MS parent and pollen parent. When we checker the horticultural traits using autumn cultivation, the novel cross variety produced H-shaped root comparing other commercial varieties and produced highly uniform radish. Thus we registered this novel cross variety as 'YR ORE' at 2013 (Registration No. 4550).
Love Christopher G;Batley Jacqueline;Edwards David
Journal of Plant Biotechnology
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v.5
no.4
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pp.193-195
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2003
A major goal of agricultural biotechnology is the discovery of genes or genetic loci which are associated with characteristics beneficial to crop production. This knowledge of genetic loci may then be applied to improve crop breeding. Agriculturally important genes may also benefit crop production through transgenic technologies. Recent years have seen an application of high throughput technologies to agricultural biotechnology leading to the production of large amounts of genomic data. The challenge today is the effective structuring of this data to permit researchers to search, filter and importantly, make robust associations within a wide variety of datasets. At the Plant Biotechnology Centre, Primary Industries Research Victoria in Melbourne, Australia, we have developed a series of tools and computational pipelines to assist in the processing and structuring of genomic data to aid its application to agricultural biotechnology resear-ch. These tools include a sequence database, ASTRA, for the processing and annotation of expressed sequence tag data. Tools have also been developed for the discovery of simple sequence repeat (SSR) and single nucleotide polymorphism (SNP) molecular markers from large sequence datasets. Application of these tools to Brassica research has assisted in the production of genetic and comparative physical maps as well as candidate gene discovery for a range of agronomically important traits.
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2017.06a
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pp.99-99
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2017
Chili pepper (Capsicum annum) is origin of subtropical region, and has been spread all over the world. It is increasing the production and consumption in recent year. Chili peppers are readily incorporated into local South Asian cuisines perhaps because people are already familiar with pungent and spicy flavors. Chili peppers, despite their fiery "hotness", are one of very popular spices known for their medicinal and health benefiting properties. Especially in South East Asia, they grow up so many cultivars of them recently, so it is so important crop world wide. In South East Asia, there are some articles about chili pepper in Thailand and Indonesia, but in Vietnam there is not so much information about chili pepper. In this paper, we analyzed genetic diversity in Vietnamese Chili pepper through the survey of local chili pepper. As a result, we got 38 kinds of chili fruits, 26 kinds of leaves and some information from farmers all in Vietnam. And I made the phylogenetic tree by SSR with 10 DNA markers. Finally we found the genetic similarities by regions.
Winter bud explants from 15 individual angelica tree (Aralia elata) were cultured in vitro to find out optimal conditions for somatic embryo induction as well as plant regeneration. Calli are induced and grown on MS medium supplemented with 1.0 mg/L 2,4-D for 4 weeks and subcultured on a half-strength MS medium without phytohormones to induce somatic embryos. Inter-simple sequence repeat (I-SSR) markers were analyzed with total DNAs extracted from the trees. Genotype effects on somatic embryo induction were examined by cluster analysis. Callus induction rate varied from 58.5 to 100% among the genotypes. Somatic embryo induction rate also greatly varied from 0 to 100% among the genotypes. There was a significant difference in somatic embryo induction rate even among the individual trees that showed close genetic relationships each other. This suggested that somatic embryo induction rate in Aralia elata be influenced by a few major specific genes rather than whole genomic similarity among individual trees. Four individuals of Ulneong-7, Cheju-1, Shingu and China, which are recalcitrant to somatic embryo induction, turned out to have a close genetic relationship, suggesting that both physiological and genetic factors affect somatic embryo induction. The results suggest that genotype selection be the most important factor to achieve an efficient propagation, although cultural optimization through medium and explant manipulation may also play crucial roles in somatic embryogensis as well as plant regeneration of these species.
Amaranths (Amaranthus sp.), an endemic American crop, are now grown widely across the world. This study used 14 simple sequence repeat (SSR) markers to analyze the genetic diversity of 74 amaranth accessions from the United States, with eight accessions from Australia as controls. One hundred twenty-two alleles, averaging eight alleles per locus, were observed. The average major allele frequency, expected heterozygosity, and polymorphism information content (PIC) were 0.44, 0.69, and 0.65, respectively. The structure analysis based on genetic distance classified 77 accessions (94%) into three clusters, while five accessions (6%) were admixtures. Among the three clusters, Cluster 3 had the highest allele number and PIC values, while Cluster 2 had the lowest. The lowest FST was between Clusters 1 and 3, indicating that these two clusters have higher gene flow between them compared to the others. This finding was reasonable because Cluster 2 included most of the Australian accessions. These results indicated satisfactory genetic diversity among U.S. amaranths. These findings can be used to design effective breeding programs involving different plant characteristics.
Hypernodulation soybean mutant, SS2-2, is characterized with greater nodulation and nitrogen fixing ability in the root nodule than its wild type, Shinpaldalkong 2. The present study was performed to identify a genetic locus conferring hypernodulation in soybean mutant SS2-2 and to determine whether the gene controlling the hypernodulation of SS2-2 is allelic to that controlling the supernodulation of nts382 mutant. Hybridization studies between SS2-2 and Taekwangkong revealed that the recessive gene was responsible for the hypernodulation character in soybean mutant SS2-2. Allelism was also tested by crossing supernodulating mutant nts382 and hypernodulating mutant SS2-2 that both hypernodulation and supernodulation genes were likely controlled by an identical locus. Molecular marker mapping of hypernodulation gene in SS2-2 using SSR markers confirmed that the gene conferring hypernodulation was located at the same loci with the gene conferring supernodulation. It is interesting to note that the same gene controlled the super- and hyper-nodulation characters, although SS2-2 and nts 382 exhibited differences in the amount of nodulation in the root system. Further genetic studies should be needed to clarify the genetic regulation of super- and hyper-nodulation in soybean.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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