2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin(TCDD) is known to induce cytochrome p450 1A1 and to activate c-Src kinase and p21 Ras. This study examined the molecular interactions of adaptor proteins including Shc, Grb2, and Sos in rat primary hepatocytes and their relationship to the induction of CYP1A1 by TCDD. TCDD induced CYP1A1 level and EROD activity in a dose-dependent mode. Sos/Grb2 association isincreased by TCDDㅑㅜ a dose dependent mode. Tyrosine phosphorylated Shc, mainly p152, onloads to Grb2/Sos complex upon TCDD stimulation. The electrophoretic mobility shift of Sos is showed by TCDD. These results indicate that TCDD modulated the molecular interaction features of adaptor compoes proteins including Shc, Grb2, and Cnl in early signaling pathway of TCDD-mediated CYP 1A1 induction of rat primary hepatocyte.
우리나라 전통 장류의 위생화와 저장.유통안정성 확보를 위해 20 kGy 감마선 조사된 간장, 된장, 고추장, 청국장의 독성학적 안전성을 SOS Chromotest로 측정하였다. 대사활성계(S-9 mix) 존재 유무의 조건하에서 Escherichia coli PQ37을 SOS Chromotest 균주로 사용하였다. 시료는 물추출물, 용매추출물을 준비한 후 농축하여 S-9 mix를 첨가하거나 첨가하지 않은 조건에서 SOS Chromotes에 사용하였다. 결과적으로 10,00$\mu\textrm{g}$/assay의 투여 농도에서 1.5이하의 IF값을 유지했으며 조사된 모든 시료는 비조사구와 차이가 없었고, 20 kGy로 조사된 전통장류에서 어떠한 돌연변이원성도 발견되지 않았음을 확인할 수 있었다.
목적: Cinnamic acid의 유도체들중에서 항돌연변이 효과가 보고된 바 있어, 본 연구에서는 E. coil PQ37균주를 사용한 SOS chromotest를 이용하여 약 170개 cinnamic acid의 유도체들의 항돌연변이 효과를 확인하고자 하였고, 1차로 확인된 수종의 유도체들에 대한 결과를 보고하고자 한다. 방법: SOS chromotest는 sul A:: lacz fusion strain 인 E. coli PQ37 에서의 chemical로 인한 DNA damage에 대한 SOS response를 $\beta$-galactosidase enzyme activity level로서 측정하는 실험이며, m-RNA 또는 protein synthesis에 대한 test chemicals의 cytotoxic저해효과를 알아보기 위하여 alkaline phosphatase를 병행측정하여 보완하였다. 결과 및 고찰: (-)S-9 경우는 4-nitroquinoline 1-oxide(4-NQO)를 유도물질로 하였으며 대략 Induction factor가 9.7 정도였고, (+)S-9의 경우는 aflatoxinB$_1$을 유도물질로 하였고 이때의 Induction factor는 13.8 정도였다. 이결과 1차로 test된 cinnamic acid유도체 6개중에서 RK001, RK002, RK003, RK004, RK005는 거의 항돌연변이 효과를 나타내지 않았으나, RK006은 항돌연변이 효과를 보여주어 이들의 Structure-Activity Relationship (SAR) 및 Dose-response와 RK006의 항돌연변이 효과의 mechanism에 관해 M13 mp2 viral DNA의 유전자 염기서열을 이용하여 항돌연변이 기전연구를 수행중이다.
In a previous study, a relatively high dose of gamma radiation (1 kGy) did not fully induce typical SOS genes such as sulA, recA, recN, and din in Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) (Lim et al. 2008, Gene expression profiles following high-dose exposure to gamma radiation in Salmonella enterica serovar Typhimuium. J. Radiat. Ind. 3:111-119). In this study, we examined changes in the transcriptional repertoire of S. Typhimurium after a dose of 10 Gy using DNA microarrays. It was found that more than half (~65%) of the 26 up-regulated genes belong to the SOS regulon: ten genes are typical SOS genes, and seven genes are Salmonella prophage genes, which are known to be activated by LexA cleavage. Among 29 down-regulated genes, the function of five genes with the most decreased expression is associated with carbohydrate transport and energy production. This suggests that upon exposure to gamma radiation cells may cease growing by reducing the metabolic activity, and repair DNA damage using a DNA repair system such as the SOS response system. The difference in expression of the SOS genes between a high (1 kGy) and low (10 Gy) dose of radiation shows the possibility that cells may opt for one of multiple regulatory circuits in response to the specific gamma radiation dose.
The antimutagenic activities of the total extract and several fractions of starfish, Asterina pectinifera (Asteriidae), were investigated in vitro by SOS chromotest with Escherichia coli PQ37 and Ames test with Salmonella typhimurium TA100. When various fractions was tested, the chloroform and butanol fractions showed low induction factors, which means both fractions increased antigenotoxicity against the base substitution mutagen MNNG. Even though higher antigenotoxic effect of the chloroform fraction, no effective result of Ames test was found in revertant formation of S. typhimurium TA100. The most effective antigenotoxic and antimutagenic fraction was a butanol one: i.e., When 0.5 mg/tube of butanol fraction was applied, the induction factor was 0.68. As the concentration of the fraction was increased the formation of revertants of S. typhimurium TA100 by about 81%. There was no cytotoxic effect of butanol fraction against S.typhimurium TA100. This result might be useful for further study to search a possible anticancer agent from the starfish, Asterina pectinifera.
목이(Auricularia auricula)와 석이(Gyrophora esculenta)로부터 각각 얻어진 메틸 알콜 추출물에 대하여 E. coli PQ37/pKM101 균주를 이용한 SOS chromotest 방법으로 시료자체의 변이원성 유무 및 4가지 양성변이원 물질에 대한 항돌연변이성을 검토하였다. 시료자체의 돌연변이원성 유무에 있어서는 SOS induction factor (IF) 값의 증감이 없었으므로 돌연변이원성이 없는 것으로 인정되었다. 4가지 양성 돌연변이원 물질에 대한 항돌연변이성 실험결과, 4-nitroquinoline-1-oxide (4NQO)에서는 목이, 석이 각각 52%, 59%의 억제효과를 나타내었고, N-methyl-N‘-nitro-N-nitro-soguanidine (MNNG)에 대해서는 49%, 58%, mitomycin C (MMC)에 대해서는 53%, 64% 그리고 3-amino-1,4-dimethyl-5H-pyrido-(4,3-b) indol (Trp-P-l)에 대해서는 각각 61%, 64%의 억제활성을 나타내었다. 이 결과는 SOS chromotest에서는 양성변이원 4종 모두에 있어서 돌연변이 억제활성이 인정되었고, 특히 석이가 목이보다 대체로 강한 항돌연변이활성을 나타내었다.
키토산의 in vitro 돌연변이 억제활성을 Salmonella typhimurium reversion assay와 SOS chromotest 이용하여 살펴보았다. S. typhimurium에 의한 시험된 간접변이원 Trp-P-2에 대해서 0.1-1.0 mg/plate의 chitosan농도로 시험하였을 때, 24-65%의 돌연변이 억제활성을 나타내었다(p<0.01). Chitosan농도 0.1-0.5 mg/plate 범위에서는 용량-반응(dose-responese)관계를 나타내면서 저해효과를 나타내었으며, 0.5 mg/plate이상의 농도에서는 오히려 저해효과가 감소하는 경향이었다. 반면, 직접변이원인 SA 및 2-NF로 유도된 돌연변이에 대해서는 시험한 어느 농도에서는 chitosan에 의한 돌연변이 억제효과가 나타나지 않았다. Chitosan은 직접변이원인 4-NQO에 의한 SOS 유도에 대해 chitosan농도가 0.15 mg/assay 및 0.20 mg/assay일 때 4-NQO에 의해 유도된 유도지수(induction factor) 8.290을 4.226및 4.516으로 낮추어 46-49%의 저해활성을 나타내었다. 간접변이원인 Trp-P-2에 의한 SOS 유도에 대한 chitiosan의 억제효과는 시험한 chitosan의 농도범위에서 약 9-39%의 저해활성을 나타내었으며, chitosan농도가 0.1 mg/assay이 경우를 제외하고는 chitosan농도 증가에 따라 비례적으로 SOS유도 저해활성이 나타났다. Trp-P-2d 의해 DNA 손상을 유도한 다음 chitosan의 세포내 역제(bio-antimutagenicity) 활성을 살펴 본 결과, 저농도에서는 세포의 억제(desmutagenicity) 특성을, 0.75-1.0 mg/plate의 비교적 고농도에서는 세포내 억제특성을 나타내었다.
Park, Ji-Soo;Park, Sang-Hee;Lee, Yeon-Hee;Kong, Jae-Yang;Kim, Wan-Joo;Koo, Hyeon-Sook
BMB Reports
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제28권5호
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pp.464-470
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1995
Quinolone antibiotics are DNA gyrase inhibitors, but their bactericidal action seems to involve more than the inhibition of DNA gyrase activity. Hence, the potentially crucial factors among possible mechanisms of quinolone action; cleavable complex formation, inhibition of DNA synthesis, and induction of SOS response were investigated. These parameters were measured in an Escherichia coli strain exposed to quinolones in the logarithmic growth phase, and correlated with the bactericidal activity of quinolones. Cleavable complex formation proved to be the factor most related to bactericidal action. Inhibition of DNA synthesis was substantially correlated with bactericidal activity, but induction of SOS response was least correlated with bactericidal activity. Therefore, it was concluded that quinolones exert bactericidal action primarily through cleavable complex formation, and subsequent unknown cellular processes together with inhibition of DNA synthesis contribute to the bactericidal activity of quinolones.
Katna, Anna;Boratynski, Robert;Furmanek-Blaszk, Beata;Zolcinska, Natalia;Sektas, Marian
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제20권1호
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pp.30-38
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2010
The contribution of a type II restriction-modification system (R-M system) to genome integrity and cell viability was investigated. We established experimental conditions that enabled the achievement of hemimethylated and unmethylated states for the specific bases of the recognition sequences of the host's DNA. To achieve this, we constructed the MboII R-M system containing only one (i.e., M2.MboII) out of two functional MboII methyltransferases found in Moraxella bovis. Using the incomplete R-M system, we were able to perturb the balance between methylation and restriction in an inducible manner. We demonstrate that upon the SOS-induced DNA repair in mitomycin C treated cells, restriction significantly reduces cell viability. Similar results for the well-studied wild-type EcoRI R-M system, expressed constitutively in Escherichia coli, were obtained. Our data provide further insights into the benefits and disadvantages of maintaining of a type II R-M system, highlighting its impact on host cell fitness.
Ames 실험계에서 소금에 절인 생멸치는 생멸치보다 돌연변이유발성이 높았고, 잘 숙성된 멸치액젓(12개월)은 6개월된 멸치젓갈보다 낮은 보돌연변이성을 나타내었다. MNNG에 의한 돌연변이 실험에서 12개월간 발효시킨 멸치액젓 2.5 mg에 함유된 천일염 1.4 mg과 histidine $8\;{\mu}g$은 12개월간 발효시킨 멸치액젓보다 2배 이상 높은 보돌연변이성을 보였다. 따라서 histidine의 함량이 높은 멸치젓갈의 안전성을 Ames test로 판정하는 것은 바람직하지 못한 것으로 나타났다. 반면 SOS 실험계에서 생멸치, 소금에 절인 생멸치와 발효된 멸치젓갈 자체는 돌연변이유발성이 없었고, 오히려 12개월된 젓갈은 6개월 된 젓갈보다 높은 항돌연변이성을 보였다. 따라서 멸치젓갈 제조시 멸치에 소금이 첨가되어(생젓갈) 돌연변이 유발이 일어날 수 있지만 숙성기간이 길어지면(12개월, 익은 젓갈) 항돌연변이 효과가 있는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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