고콜레스테롤 식이에 홍국쌀 분말을 0.2%, 1% 및 5% 첨가한 식이를 4주간 섭취한 동물에서 홍국쌀의 지질 개선 효과와 함께 항산화 효과를 혈액과 간의 항산화 효소 활성, 항산화 효소의 유전자 발현 및 DNA 손상에 미치는 영향으로 분석하였다. 홍국쌀 분말 첨가 식이를 섭취한 후의 체중 변화, 식이섭취량, 식이 효율 및 간 무게는 대조군과 유의한 차이가 없었다. 혈장에서 총 콜레스테롤은 대조군에 비해 0.2% 첨가군에서 24% 감소하였으며, HDL 콜레스테롤은 5% 첨가군에서 20% 증가하였고 LDL 콜레스테롤은 0.2% 첨가군에서 42% 감소한 것으로 나타났다. 항산화 효소 활성에서는 SOD 활성이 감소하거나 유의성이 없었으나 적혈구에서 GPx와 CAT의 활성이 대조군에 비해 유의성 있게 증가하는 것으로 나타났으며, 간의 TBARS는 5% 첨가군에서 대조군에 비해 19% 유의적으로 감소한 것으로 나타났다. 항산화 효소의 유전자 발현에서는 5% 첨가군에서 CAT의 발현이 대조군에 비해 7.9배 유의성 있게 증가하였다. 홍국쌀 분말 섭취로 인한 DNA 손상은 관찰되지 않았으며, $H_2O_2$로 산화 스트레스를 가했을 때 DNA 손상이 농도 의존적으로 억제되는 것으로 나타났다. 이상의 결과로부터 홍국쌀의 섭취가 혈액과 간의 지질 대사 개선 효능을 가지며, 항산화효소의 활성화를 통해 ROS에 의한 세포 손상을 억제할 뿐 아니라 LDL 콜레스테롤의 산화도 억제할 것으로 예상되므로 심혈관계 질환에 대한 예방 효과가 있을 것으로 사료된다.
Objectives : This study was carried out to evaluate anti-tummor effect about apoptosis of Cheongyulsodok-Eum (CSE) Results : 1. Anti-tumor(HL-60 cells) effects of CSE water extracts(Exts) were more effective in high density.($IC_{50:}:572$${\mu}g/ml$) 2. The generation of $O_2\;^-$ in HL-60 cells were according to the concentration of CSE water Exts, specially more effective on 100 ${\mu}g/ml$ and 1000 ${\mu}g/ml$ concentration. 3. The SOD activities in HL-60 cells were in proportion as cytotoxicity against HL-60 cells of CSE water Exts. 4. The GPx activities in HL-60 cells were in proportion as cytotoxicity against HL-60 cells of CSE water Exts(more effective on 100 ${\mu}g/ml$ and 1000 ${\mu}g/ml$ concentration), but the catalase activities in HL-60 cells were not effective. 5. DPPH radical scavenging activity of CSE water Exts was effective.(3 ${\mu}g/ml:31.2{\pm}5.2$ %, 10 ${\mu}g/ml:49.6{\pm}7.3$ %, 30 ${\mu}g/ml:35.8{\pm}5.7$ % 100 ${\mu}g/ml:42.3{\pm}6.4$ %) 6. The results of cytotoxicity against HL-60 cells of CSE were as follows. 1) In hexane fraction, the cytotoxicity against HL-60 cells($IC_{50:}:592$${\mu}g/ml$) was more effective than against NIH3T3 cells. 2) In ethyl acetate fraction, the cytotoxicity against HL-60 cells was not effective. 3) In butanol fraction, the cytotoxicity against HL-60 cell($IC_{50:}:306$${\mu}g/ml$) was more effective than against NIH3T3 cells. 4) In $H_2O$ fraction, the cytotoxicity against HL-60 cells was not effective. Conclusion : These result suggest that CSE has antioxidative effects and anti-tumor effects by apoptosis of free radical($O_2\;^-$) activity, especially butanol and hexane fraction from water extract has more effective in anti-twnor effects.
The hepatoprotective activity of flavonol glycosides rich fraction (F-2), prepared from 70% alcohol extract of the aerial parts of V calcarata Desf., was evaluated in a rat model with a liver injury induced by daily oral administration of $CCl_4$ (100 mg/kg, b.w) for four weeks. Treatment of the animals with F-2 using a dose of (25 mg/kg, b.w) during the induction of hepatic damage by $CCl_4$ significantly reduced the indices of liver injuries. The hepatoprotective effects of F-2 significantly reduced the elevated levels of the following serum enzymes: alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), alkaline phosphatase (ALP) and lactate dehydrogenase (LDH). The antioxidant activity of F-2 markedly ameliorated the antioxidant parameters including glutathione (GSH) content, glutathione peroxidase (GSH-Px), superoxide dismutase (SOD), plasma catalase (CAT) and packed erythrocytes glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH) to be comparable with normal control levels. In addition, it normalized liver malondialdehyde (MDA) levels and creatinine concentration. Chromatographic purification of F-2 resulted in the isolation of two flavonol glycosides that rarely occur in the plant kingdom, identified as quercetin-3,5-di-O-$\beta$-D-diglucoside (5) and kaempferol-3,5-di-O-$\beta$-D-diglucoside (4) in addition to the three known compounds identified as quercetin-3-O-$\alpha$-L-rhamnosyl- (${\rightarrow}6$)-$\beta$-D-glucoside [rutin, 3], quercetin-3-O-$\beta$-D-glucoside [isoquercitrin, 2] and kaempferol-3-O-$\beta$-D-glucoside [astragalin, 1]. These compounds were identified based on interpretation of their physical, chemical, and spectral data. Moreover, the spectrophotometric estimation of the flavonoids content revealed that the aerial parts of the plant contain an appreciable amount of flavonoids (0.89%) calculated as rutin. The data obtained from this study revealed that the flavonol glycosides of F-2 protect the rat liver from hepatic damage induced by $CCl_4$ through inhibition of lipid peroxidation caused by $CCl_4$ reactive free radicals.
Objective: This study was performed to investigate the effect of manual acupuncture, invasive laser acupuncture and laser skin irradiation at LU8, LR4, HT8 and LR2(Liver Seunggyeok) on D-galN-induced liver injury in rats. Method: Liver injury was induced with D-galN. The experimental rats were divided four groups(Control group, EXP-1, EXP-2, EXP-3). In the Control group, liver injury-induced and not treated. EXP-1 group was liver injury-induced and carried out manual acupuncture with Young-Su(against the meridian course and following the course of the meridian) & Won-Bang(by twisting and rotating the needle) acupuncture method at Liver Seunggyeok. EXP-2 group was liver injury-induced and carried out invasive laser acupuncture at Liver Seunggyeok. EXP-3 group was liver injury-induced and carried out laser skin irradiation at Liver Seunggyeok. Result: In the change of body weight(in 1 week), EXP-1, EXP-2 and EXP-3 groups were significantly increased as compared with control group. In the change AST & ALT, EXP-1 and EXP-2 groups were significantly decreased as compared with control group. In the change of SOD, EXP-1, EXP-2 and EXP-3 groups were significantly increased as compared with control group. In the change of WBC, EXP-2 group was significantly increased as compared with control group. Conclusion: Manual acupuncture, invasive laser acupuncture and laser skin irradiation at Liver Seunggyeok had hepatotherapeutic effect on the treatment of hepatocytotoxity. Invasive laser acupuncture was as effective as manual acupuncture on the treatment of hepatocytotocity.
Objective : Reflux esophagitis (RE) is a disease that caused gastric acid reflux and inflammation due to unstable gastroesophageal sphincter, as increasing worldwide respectively. This study was conducted to evaluate the effect of Evodiae Fructus (EF) extract on chronic reflux esophagitis in rats. Methods : The EF was measured antioxidant activity, such as total polyphenol and total flavonoid contents, 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and 2, 2'-azinobis-3-ethyl-enzothiazoline-6-sulfonic acid (ABTS) radical scavenging activity. Rats were divided into 3 groups; Nor (normal group), Con (chronic acid reflux esophagitis rats treatment with water), EF (chronic acid reflux esophagitis rat treatment with EF 200 mg/kg body weight group). A surgically-induced chronic acid reflux esophagitis (CARE) model was established in SD rats, and treated with water or EF 200 mg/kg body weight for 14 consecutive days. Results : Administration of EF to rats of induction of chronic acid reflux esophagitis was found to reduce esophagus tissues injury. Reactive oxygen species (ROS) and produces peroxynitrite ($ONOO^-$) levels of esophagus tissues were significantly decreased in EF compared to Con group. As results of esophagus protein analyses, EF effectively reduce inflammatory-related factors ($NF-{\kappa}Bp65$, $p-I{\kappa}B{\alpha}$, iNOS, $TNF-{\alpha}$, IL-6), and increase anti-oxidant enzyme (Nrf2, HO-1, SOD, catalase, GPx-1/2). Conclusions : These results suggest that EF administration comfirmed that decreased esophagus tissues injury, oxidantive stress, anti-inflammation effect, and increased anti-oxidant effect. Therefore, EF was the potential to be used as a natural therapeutic drug.
Objective : Chronic acid reflux esophagitis (CARE), one of gastroesophageal reflux disease (GERD) is increasing worldwide. Coptidis rhizoma extract (CRE) is a traditional herb that cures a variety of diseases. This study was conducted to evaluate the protective effect of CR on rats with chronic acid reflux esophagitis. Methods : The antioxidant activities were evaluated through radical scavenging assays using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazolin-6-sulfonic acid) (ABTS) radical scavenging assays. CARE was surgically induced in 5-week-old male SD rats by ligating the border between forestomach and glandular portion with a 2-0 silk tie and covering the duodenum using 18-Fr $N{\acute{e}}laton$ catheter. To evaluate the esophageal protective effect of CRE, rats were divided into 3 groups: Nor (normal rats), Veh (chronic acid reflux esophagitis induced rats), CR (chronic acid reflux esophagitis induced rats treated with CRE 200 mg/kg body weight). Results : The administration of CRE significantly prevented the mucosal injury of the esophagus tissue and histological findings improved the esophageal lesion. It has been shown that inflammation is prevented by the increase of antioxidant-related factors (Nrf-2, HO-1, SOD, catalase, and GPx-1/2) through the antioxidant pathway of esophageal tissue. The administration of CRE reduced the increase of serum peroxynitrite ($ONOO^-$) and markedly reduced the protein expression of inflammatory mediator such as $NF-{\kappa}Bp65$, $p-I{\kappa}B{\alpha}$, iNOS, and IL-6. Conclusions : Overall, these results suggest that CRE administration confirmed the protective effect of esophageal mucosa, suggesting that it is a potential treatment for chronic acid reflux esophagitis.
아황산가스에 대한 주요 콩 품종들의 내성을 비교하고자 10개의 국내장려품종을 택하여 pot에 재배하고 밀폐된 chamber내에서 2.0ppm 의 아황산가스에 4시간 또는 8시간 처리하였다. 아울러 수량구성요소 및 수량에 미치는 영향을 조사하고, 가시피해율과 엽록소 함량, 효소활성 및 기공 저항성 등의 생리적 특성과 내성과의 상관관계를 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 아황산가스에 대한 내성은 콩 품종간에 유의차가 인정되었으며, 4시간 처리시 가시피해율은 보광콩, 장수콩, 장경콩에서 낮았고 은하콩, 팔달콩에서 높은 피해를 보였다. 8시간 처리에서는 모든 품종에서 피해율이 높게 나타나 피해정도의 구분이 뚜렷하지 않았다. 2. 피해율과 생리적 특성과 관계는 4시간 처리에서 피해율과 SOD 활성간에 상관$(r=-0.611^{\ast})$이 인정되었으며, 엽록소 함량, POD 활성, 기공저항성등은 내성과의 상관이 인정되지 않았다. 3. 아황산가스에 의한 피해는 경장(莖長), 절간수(節稈數) 및 100립중에는 큰 영향을 미치지 않았으나, 건물중, 협수(莢數) 및 총립수에는 영향이 컸다. 수량 감수율은 보광콩, 장경콩에서 적었고 은하콩, 팔달콩에서 크게 나타났다. 4. 가시피해율(可視被害率)과 수량과의 관계는 피해율이 가장 컸던 팔달콩에서는 $Y=-1.17X+98.82^{\ast\ast}$, 피해율이 가장 적었던 보광콩에서는 Y=-0.165X+94.93의 회귀를 보였다.
This study was to investigate the effect of flavonoid treatment on in vitro development of bovine somatic cell nuclear transfer (SCNT) embryos, and their pregnancy and delivery rate after embryo transfer into recipient. In experiment 1, to optimize the flavonoid concentration, parthenogenetic day 2 ($\geq$ 2-cell) embryos were cultured in 0 (control), 1, 10 and $20\;{\mu}M$ flavonoid for 6 days. In the results, in vitro development rate was the highest in $10\;{\mu}M$ flavonoid group (57.1%) among treatment groups (control, 49.5%; $1\;{\mu}M$, 54.2%; $20\;{\mu}M$, 37.5%), and numbers of total and ICM cells were significantly (p<0.05) higher in $10\;{\mu}M$ flavonoid group than other groups. We found that $10\;{\mu}M$ flavonoid treatment can significantly (p<0.05) decrease the apoptotic index and derive high expression of anti-oxidant, anti-apoptotic, cell growth and development marker genes such as Mn-SOD, Survivin, Bax inhibitor, Glut-5, In-tau, compared to control group. In experiment 2, to produce the cloned Jeju Black Cattle, beef quality index grade 1 bull somatic cells were transferred into enucleated bovine MII oocytes and reconstructed embryos were cultured in $10\;{\mu}M$ flavonoid added medium. When the in vitro produced day 7 or 8 SCNT blastocysts were transferred into a number of recipients, $10\;{\mu}M$ flavonoid treatment group presented higher pregnancy rate (10.2%, 6/59) than control group (5.9%, 2/34). Total three cloned Jeju Black calves were born. Also, two cloned calves in $10\;{\mu}M$ flavonoid group were born and both were all healthy at present, while the one cloned calf born in control group was dead one month after birth. In addition, when the result of short tandem repeat marker analysis of each cloned calf was investigated, microsatellite loci of 11 numbers matched genotype between donor cell and cloned calf tissue. These results demonstrated that the flavonoid addition in culture medium may have beneficial effects on in vitro and in vivo developmental capacity of SCNT embryos and pregnancy rate.
유기농재배 콩을 다양한 용매에서 추출하여 그 추출물에 대한 항산화 효과, 항염증 효과, 대식세포의 세포사멸 보호 효과, 그리고 알레르기 저해효과를 비교하였다. DPPH 법과 SOD 효소의 활성 측정으로 항산화 능력을 평가하였으며, 항염증 효과는 LPS로 유도시킨 Raw 264.7 세포주에서 염증 매개 단백질인 Cox-2와 iNOS의 발현량을 Western blotting으로 조사하여 분석하였다. 또한 대식세포 보호 효과를 세포사멸 조절 단백질인 Bcl-xl의 발현량조사로 평가하였고, 1mM $H_2O_2$ 처리로 유도되는 세포사멸의 보호효과를 세포 수 측정법으로 조사하였다. 항알레르기 효과는 흰쥐의 비만세포인 RBL-2H3 세포주를 사용하여 IgE로 매개되는 비만세포의 탈과립화를 OPT assay로 측정하여 분석하였다. 그 결과, 유기 재배 콩의 다양한 추출물에서 항산화, 세포사멸 보호, 항염증 효과를 나타내었다. 특히 유기농 콩의 열수 추출물은 LPS로 유도시킨 염증반응을 효과적으로 억제하는 것으로 나타났다. 그러나 항알레르기 효과는 모든 추출물에서 히스타민 유리량이 약간 감소하는 것으로 나타나 유기농 콩의 특별한 효과를 확인할 수 없었다. 콩에는 많은 유용한 생리활성물질 뿐 만 아니라 알레르기 유발 물질도 존재하는 것으로 알려져 있지만 조추출물 상태에서는 특이적인 알레르기 유발보다 오히려 항알레르기 효과가 나타났다. 결론적으로, 만성 염증 및 천식, 그리고 아토피피부염과 같은 염증관련 질환에는 유기 재배된 콩이 좋은 억제 효과를 가지고 있다고 판단된다.
The purpose of the study was to investigate the effects of dietary green tea catechin and vitamin E on the phospholipse {TEX}$A_{2}${/TEX} activity and th antioxidative defense system in streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats. Sprague-Dawley male rats weighing 100$\pm$10 gm were randomly assigned to one normal and five STZ-induced diabetic groups. The diabetic groups were assigned either a catechin-free diet (DM group), 0.5% catechin diet (DM-0.5C group), 1% catechin diet (DM-1C group), vitamin E-free diet (DM-0E group), and 400 mg vitamin E per kg diet (DM-400E group) according to the levels of dietary catechin or vitamin E supplementation. The vitamin E levels of the normal, DM, DM-0.5C, and DM-1C groups were 40 mg per kg diet. Diabetes was experimentally induced by an intravenous injection of streptozotocin after 4 weeks of feeding the five experimental diets. The animals were sacrificed on the 6th day of he diabetic state. The body weight gains were lower in all five diabetic groups after the STZ injection. The platelet phospholipase {TEX}$A_{2}${/TEX}({TEX}$PLA_{2}${/TEX}) activity in the diabetic groups was higher than that in the normal group. However, the enzyme activity in the DM-0.5C, DM-1C, and DM-400E groups was lower than that in the DM and DM-0E groups. The cytochrome {TEX}$P_{450}${/TEX} and cytochrome {TEX}$b_{5}${/TEX} content and NADPH-cytochrome {TEX}$P_{450}${/TEX} reductase activity were about 50~110% higher in the DM and DM-0E groups than in the normal group, yet significantly reduced by either catechin or vitamin E supplementation. The superoxide dismutase (SOD) content in the liver did not differ significantly in any of the groups. However, the glutathione peroxidase (GSHpx) activity was generally lower in the diabetic groups, compared with the normal group, whereas that of the DM-0.5C, DM-1C, and DM-400E groups was significantly higher compared with that of the DM and DM-0E groups. The levels of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) in the liver tissue were 148% and 201% higher in the DM and DM-0E groups, respectively, compared with the normal group, however, these levels were reduced by either catechin or vitamin E supplementation (DM-0.5, DM-1C and DM-400E). Accordingly, the present results indicate that STZ-induced diabetic rats exhibited an imbalance between free radical generation and scavenger systems in the liver which led to the acceleration of lipid peroxidation. However, these abnormalities were reduced and the antioxidative defense system was restored by either dietary catechin or vitamin E supplementation. In conclusion, the effects of dietary catechin or vitamin E in streptozotocin-induced diabetic rats would appear to inhibit lipid peroxidation as an anti-oxidant by regulating the activity of {TEX}$PLA_{2}${/TEX}.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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