곤충기생성 균류인 번데기동충하초는 각종 약리활성을 나타내는 것으로 유명하다. 국내에서 인공재배한 번데기동충하초 자실체를 n-hexane으로 추출하여 항암성분을 실리카젤 칼럼크로마토그래피로 순수하게 분리하여 $^1H-NMR$과 $^{13}C-NMR$로 그 구조를 밝혀본 결과 ergosterol peroxide $(5{\alpha},\;8{\alpha}-epidioxy-24(R)-methylcholesta-6,22-dien-3{\beta}-ol)$로 밝혀졌다. 분리한 crgosterol peroxide를 한국인의 암환자에서 분리한 각종 암세포에 대하여 항암작용을 측정한 결과, 3일 후에 위암세포주인 SNU-1 암세포에 대하여 가장 강한 항암작용을 나타내었다. 한국인의 암환자에서 유래한 위암세포인 SNU-1, 간암세포인 SNU-354 및 직장암세포인 SNU-C4 암세포 등에 대한 6일 후에 ergosterol peroxide의 50% 성장억제농도는 각각 75.8, 39.7, $32.7{\mu}g/ml$이었다. 따라서 ergosterol peroxide 성분은 번데기동충하초의 항암성분중의 하나로 밝혀졌다.
Shilnikova, Kristina;Piao, Mei Jing;Kang, Kyoung Ah;Fernando, Pincha Devage Sameera Madushan;Herath, Herath Mudiyanselage Udari Lakmini;Cho, Suk Ju;Hyun, Jin Won
Biomolecules & Therapeutics
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제30권2호
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pp.137-144
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2022
Radiation resistance represents an imperative obstacle in the treatment of patients with colorectal cancer, which remains difficult to overcome. Here, we explored the anti-proliferative and migration-inhibiting properties of the natural product shikonin on a radiation-resistant human colon carcinoma cell line (SNU-C5RR). Shikonin reduced the viability of these cells in a dose-dependent manner; 38 µM of shikonin was determined as the half-maximal inhibitory concentration. Shikonin induced apoptotic cell death, as demonstrated by increased apoptotic body formation and the number of TUNEL-positive cells. Moreover, shikonin enhanced mitochondrial membrane depolarization and Bax expression and also decreased Bcl-2 expression with translocation of cytochrome c from mitochondria into the cytosol. In addition, shikonin activated mitogen-activated protein kinases, and their specific inhibitors reduced the cytotoxic effects of shikonin. Additionally, shikonin decreased the migration of SNU-C5RR cells via the upregulation of E-cadherin and downregulation of N-cadherin. Taken together, these results suggest that shikonin induces mitochondria-mediated apoptosis and attenuates epithelial-mesenchymal transition in SNU-C5RR cells.
The root nodules and Glycine max were classified as determinate nodule based on their morphological characteristics, and isolated endosymbiont as a Bradyrhizobium based on its growth rate and single subpolar flagellum. The isolate was similar to B. japonicum USDA110 in utilization of carbon source, growth at 38.deg.C and 2% NaCl, production of $H_{2}$S and especially in the restriction endonuclease digestion pattern of symbiotic genes, allowing them to be placed in sTI group together. The former, however, grew better than the later in broad pH range from 5.0 to 9.5. Infectivity and effectivity of the isolate were confirmed by inoculation of soybean seedlings with the isolates. Characteristics of the reisolated endosymbiont from induced root nodules were identical to those of the first isolate. From these results, it was confirmed that Bradyrhizobium strain isolated from the root nodules of Glycine max was a real symbiont, and was named B. japonicum SNU001.
Kim, Kyung-Hee;Kwon, Yong-Kyun;Cho, Chong-Kwan;Lee, Yeon-Weol;Lee, So-Hyun;Jang, Sang-Geun;Yoo, Byong-Chul;Yoo, Hwa-Seong
대한약침학회지
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제15권3호
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pp.19-30
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2012
Objectives: Many efforts have shown multi-oncologic roles of galectin-3 for cell proliferation, angiogenesis, and apoptosis. However, the mechanisms by which galectin-3 is involved in cell proliferation are not yet fully understood, especially in human colon cancer cells. Methods: To cluster genes showing positively or negatively correlated expression with galectin-3, we employed human colon cancer cell lines, SNU-61, SNU-81, SNU-769B, SNU-C4 and SNU-C5 in high-throughput gene expression profiling. Gene and protein expression levels were determined by using real-time quantitative polymerase chain reaction (PCR) and western blot analysis, respectively. The proliferation rate of human colon cancer cells was measured by using a 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. Results: Expression of ${\gamma}$-aminobutyric acid B receptor 1 (GABABR1) showed a positive correlation with galectin-3 at both the transcriptional and the translational levels. Down-regulation of galectin-3 decreased not only GABABR1 expression but also the proliferation rate of human colon cancer cells. However, Korean herbal extract, HangAmDan-B (HAD-B), decreased expression of GABABR1 without any expressional change of galectin-3, and offset ${\gamma}$-aminobutyric acid (GABA)-enhanced human colon cancer cell proliferation. Conclusions: Our present study confirmed that GABABR1 expression was regulated by galectin-3. HAD-B induced galectin-3-independent down-regulation of GABABR1, which resulted in a decreased proliferation of human colon cancer cells. The therapeutic effect of HAD-B for the treatment of human colon cancer needs to be further validated.
차전자의 메탄올추출물을 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올로 계통분획하여, 활성을 검정하고, 그 중 활성분획인 헥산과 에틸아세테이트 분획을 크로마토그라피하여 4종의 화합물을 분리하였으며, 각종 기기분석과 이화학적 분석을 통하여 ${\beta}-sitosterol(C1)$, $cholest-5-en-3{\beta}-ol(C2)$, rutin(C3), $coumarin-7-O-{\beta}-glucopyranoside(C4)$임을 확인 하였으며, 4종의 화합물 중 $cholest-5-en-3{\beta}-ol$, rutin(C3)이 주요 항암 성분 이었다.
Piao, Mei Jing;Han, Xia;Kang, Kyoung Ah;Fernando, Pincha Devage Sameera Madushan;Herath, Herath Mudiyanselage Udari Lakmini;Hyun, Jin Won
Biomolecules & Therapeutics
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제30권3호
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pp.265-273
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2022
Resistance to chemotherapeutic drugs is a significant problem in the treatment of colorectal cancer, resulting in low response rates and decreased survival. Recent studies have shown that shikonin, a naphthoquinone derivative, promotes apoptosis in colon cancer cells and cisplatin-resistant ovarian cells, raising the possibility that this compound may be effective in drug-resistant colorectal cancer. The aim of this study was to characterize the molecular mechanisms underpinning shikonin-induced apoptosis, with a focus on endoplasmic reticulum (ER) stress, in a 5-fluorouracil-resistant colorectal cancer cell line, SNU-C5/5-FUR. Our results showed that shikonin significantly increased the proportion of sub-G1 cells and DNA fragmentation and that shikonin-induced apoptosis is mediated by mitochondrial Ca2+ accumulation. Shikonin treatment also increased the expression of ER-related proteins, such as glucose regulatory protein 78 (GRP78), phospho-protein kinase RNA-like ER kinase (PERK), phospho-eukaryotic initiation factor 2 (eIF2α), phospho-phosphoinositol-requiring protein-1 (IRE1), spliced X-box-binding protein-1 (XBP-1), cleaved caspase-12, and C/EBP-homologous protein (CHOP). In addition, siRNA-mediated knockdown of CHOP attenuated shikonin-induced apoptosis, as did the ER stress inhibitor TUDCA. These data suggest that ER stress is a key factor mediating the cytotoxic effect of shikonin in SNU-C5/5-FUR cells. Our findings provide an evidence for a mechanism in which ER stress leads to apoptosis in shikonin-treated SNU-C5/5-FUR cells. Our study provides evidence to support further investigations on shikonin as a therapeutic option for 5-fluorouracil-resistant colorectal cancer.
The study examines the anti-cancer effects of the hot water extract of Mylabris phalerata(MP) using SNU-C5 cell lines. Microscopic analysis showed that 12 hours after MP treatment, the number of dead cells increased prominently. Significant cell death was observed 12, 24, and 48 hours after MP treatment through trypan blue exclusion testing. This suggests that MP is time-dependently cytotoxic. Mitotracker Red CMXRos staining and flowcytometry revealed that MP decreased mitochondrial membrane potentials. The absence of peaks on PI staining showed that DNA damage occurred in MP treated cells. Taken together, measurements suggest that MP has a strong anti-cancer effect on SNU-5 cell lines, and that this is likely to be due to the destruction of mitochondria and DNA damage.
Objectives: It has long been known about the osteogenic effect of CPC-HAS(cervi parvum cornu herbal-acupuncture solution) on bone tissues. However, it has not been determined the effect of CPC-HAS on cancer cells. The purpose of this study is to screen the CPC-HAS mediated differentially expressed genes..in cancer cells such as SNU484 gastric cancer cell lines. Oligonucleotide microarray approache was employed to screen the differential expression genes. Methods: CPC-HAS was prepared by boiling and stored at $-70^{\circ}C$ until use. Cells were treated with various concentrations of CPC-HAS (0.1, 0.5, 1.5, 10, 20 mg/ml) for 24 h. Cell toxicity was tested by MTT assay. To screen the differentially expressed genes in cancer cells, cells were treated with 1.5 mg/ml of CPC-HAS. For oligonucleotide microarray assay, total RNA was used for gene expression analysis using oligonucleotide Genechip(Human genome U133 Plus 2.0., Affimatrix Co.). Results: It has no cytotoxic effects on SNU484 cell in all concentrations(0.l, 0.5, 1.5, 10, 20 mg/ml). In oligonucleotide microarray assay, in SNU484 cells, the number of more than twofold up-regulated genes was 5 while, the number of more than twofold down-regulated genes was 10. Conclusions: This study showed the screening of CPC-HAS mediated differentially regulated genes using combined approaches of oligonucleotide microarray. The screened genes will be used for the better understanding of the therapeutic effects of CPC-HAS on cancer fields.
Objective : It has long been known about the anticancer effect of GRR-HAS, however, it has not been systemically determined the differentially regulated genes by GRR-HAS in cancer cells. The purpose of this study is to screen the GRR-HAS mediated differentially expressed genes in cancer cells such as SNU484 gastric cancer cell lines. Oligonucleotide microarray approache was employed to screen the differential expression genes. Methods : GRR-HAS was prepared by boiling and stored at $-70^{\circ}C$ until use. Cells were treated with various concentrations of GRR-HAS(0.1, 0.5, 1.5, 10, 20mg/ml) for 24 h. Cell toxicity was tested by MTT assay. To screen the differentially expressed genes in cancer cells, cells were treated with 1.5mg/ml of GRR-HAS. For oligonucleotide microarray assay, total RNA was used for gene expression analysis using oligonucleotide Genechip (Human genome Ul33 Plus 2.0., Affimatrix Co.). Results : It has no cytotoxic effects on both HepG2 and SNU484 cells in all concentrations(0.1, 0.5, 1.5, 10, 20mg/ml). In oligonucleotide microarray assay, in SNU484 cells, the number of more than twofold up-regulated genes was 346. The number of more than twofold down-regulated genes was 9. Discussion : This study showed the comprehensive gene expression analysis using oligonucleotide microarray for the screening of GRR-HAS mediated differentially regulated genes. These results will provide a better application of GRR-HAS in cancer field and drug target development.
We developed the micro CSF (celebrospinal fluid) shunt valve with surface and bulk micromachining technology in polymer MEMS. This micro CSF shunt valve was formed with four micro check valves to have a membrane connected to the anchor with the four bridges. The up-down movement of the membrane made the CSF on & off and the valve characteristic such as open pressure was controlled by the thickness and shape of the bridge and the membrane. The membrane, anchor and bridge layer were made of the $O_2$ RIE (reactive ion etching) patterned Parylene thin film to be about 5~10 microns in thickness on the silicon wafer. The dimension of the rectangular nozzle is 0.2*0.2 $\textrm{mm}^2$ and the membrane 0.45 mm in diameter. The bridge width is designed variously from 0.04 mm to 0.12 mm to control the valve characteristics. To protect the membrane and bridge in the CSF flow, we developed the packaging system for the CSF micro shunt valve with the deep RIE of the silicon wafer. Using this package, we can control the gap size between the membrane and the nozzle, and protect the bridge not to be broken in the flow. The total dimension of the assembled system is 2.5*2.5 $\textrm{mm}^2$ in square, 0.8 mm in height. We could precisely control the burst pressure and low rate of the valve varing the design parameters, and develop the whole CSF shunt system using this polymer MEMS fabricated CSF shunt valve.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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