The dependence of the catalytic properties of horseradish peroxidase on the structural changes of ionic liquids was investigated with two water-miscible ionic liquids, N-butyl-3methypyridinium tetraftuoroborate ([$BMP_y$][$BF_4$]) and 1-butyl-3-methylimidazolium methylsulfate ([BMIM][$MeSO_4$]), each of which shares an anion ($BF_4^-$) or a cation ($BMIM^+$) with 1-butyl-3-methylimidazolium tetraftuoroborate ([BMIM][$BF_4$]), respectively. The oxidation of guaiacol (2-methoxyphenol) with $H_2O_2$was used as a model reaction. In order to minimize the effect of solution viscosity on the kinetic constants of the enzymatic catalysis, the enzymatic reactions for the kinetic study were performed in water-ionic liquid mixtures containing 25% (v/v) ionic liquid at maximum. Similarly to the previously reported results for [BMIM][$BF_4$], as the concentration of [$BMP_y$][$BF_4$] increased, the $K_m$value increased with a decrease in the $k_{cat}$value: the $K_m$value increased markedly from 2.8 mM in 100% water to 12.6 mM in 25% (v/v) ionic liquid, indicating that ionic liquid significantly weakens the binding affinity of guaiacol to the enzyme. On the contrary, [BMIM][$MeSO_4$] decreased the Km value to 1.4 mM in 25% (v/v) ionic liquid. [BMIM][$MeSO_4$] also decreased $k_{cat}$more than 3-folds [from 13.8 $s^{-1}$in 100% water to 4.1 $s^{-1}$in 25% (v/v) ionic liquid]. These results indicate that the ionic liquids interact with the enzyme at the molecular level as well as at a macroscopic thermodynamic scale. Specifically, the anionic component of the ionic liquids influenced the catalysis of horseradish peroxidase in different ways.
Objectives : To determine the DNA sequence of the 18S rRNA gene of the Rehmannia glutinosa and analyze it phylogenetically Methods : Dried root of the Rehmannia glutinosa was ground with a mortar and pestle. Glass beads(0.5 mm in diameter), TE buffer and SDS solution were added to that. The mixture was vortexed vigorously and extracted with the mixture of phenol, chloroform and isoamyl alcohol and with the mixture of the chloroform and isoamyl alcohol. The nucleic acids were precipitated with ethanol and resuspended in TE buffer. Contaminating RNA was digested with RNAse A and the DNA was purified further with the Geneclean Turbo Kit. This DNA was used as a template for amplification of the 18S rRNA gene by PCR. The PCR product was cloned in the pBluescript SK II plasmid by blunt-end ligation and the DNA sequence of the insert was determined. This DNA sequence was analyzed phylogenetically by the BLAST program. Results and Conclusion : Vortexing the ground powder of the dried plant root with glass beads during cell lysis improved recovery of DNA. The DNA sequence of the Rehmannia glutinosa 18S rRNA gene was determined and deposited at the GenBank as the accession number DQ469606. Phylogenetic analysis of that sequence showed the relationship between the members of the family of Scrophulariaceae and also the close relationship of the Buddleja davidii to the members of the Scrophulariaceae family.
The present study was conducted to investigate the antimutagenic potential of the methanolic extract from the leaves of sweet potato (Ipomea batatas, IB) with the SOS chromotest (umu test) and Salmonella typhimurium TA 98 and TA 100. The anticarcinogenic effects were also studied by calculation of the $IC_{50}$ on human cancer cell lines and investigating the function of gap junction in rat liver epithelial cells. The IB extract inhibited dose-dependently the ${\beta}$-galactosidase activity induced spontaneously at concentration of more than 200 mg/ml in S. typhimurium TA 1535/pSK 1002, and decreased significantly (p < 0.01) the ${\beta}$-galactosidase activities induced by mutagen 6-chloro-9-[3-(2-chloroethylamino)proylamino]-2-methoxyacridine dihydrochloride (ICR) at dose of more than 0.4 mg/0.1 ml. The IB extract showed no effect on the spontaneous reversions of S. typhimurium TA 98 and 100 but benzo(${\alpha}$)pyrene (BaP)-stimulated reversions were decreased dose-dependently (p < 0.01) at the concentration of more than 100 mg/ml. The $IC_{50}$ value of stomach cancer cells was lower than that of normal rat liver epithelial cells, but the values of colon and uterine cancer cell lines were similar to those of normal rat liver epithelial cells. The transfer of dye through gap junctions was not affected by treatment of the IB extracts at any concentration during treatment periods. The simultaneously treatment of IB extract and 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA) effectively prevented the inhibition of dye transfer induced by TPA 1 hour after treatment at all exposed concentrations. The number of gap junctions was significantly (p < 0.01) increased by the treatment with IB extract at concentrations of more than 40 ${\mu}g$/ml. The inhibition of the expression of gap junction proteins by TPA (0.01 ${\mu}g$/ml) was recovered dose dependently by the simultaneous treatment of IB extracts. Our data suggest that Ipomea batatas has antimutagenic and anticarcionogenic activity in vitro.
To secure the genetic resources of silkworm, Bomyx mori, the cDNA library was constructed with mRNA isolated from fifth instar larvae. Titer of the cDNA library was about 1.3 X 106 plaques in total. We presumed that the titer covered all transcripts existed in Bombyx mori. Meanwhile, it is knowen that partial cDNA sequences, Expressed Sequence Tags(ESTs), have a good value for the discovery of novel genes and the elucidation of their structures. For this purpose, partial cDNA sequencing was carried out from randomly selected cDNA clones in the library. Partial cDNA sequences of 37 clones were determined and an average of 212 nucleotides of sequence can be read from the clone. The ESTs were searched in GenBAnk database and fifteen ESTs showed significant similarities to enlisted sequences. They included the genes of storage protein, heat shock protein, actin, catalase and so forth. We presumed that the 22 unmatched ESTs were novel genes.
The compression index, representing the compressibility of clay, is generally obtained from the consolidation test, or predicted by empirical correlations using soil properties. However, empirical methods have regional limitations, because the compression index is affected not only by soil properties but also by site characteristics, such as deposition conditions and stress history. In this study, a method evaluating the compression index from typical soil properties is suggested using the characteristics of reconstituted clay. By analyzing the consolidation test results of Busan clay, the suggested method is verified, and the analysis of prediction error is carried out. It is shown that the proposed method evaluates the compression index more accurately than empirical methods previously suggested. The prediction errors occur by assumption, and are inversely proportional to $e_{cross}/e_0$, obviously.
The purpose of this study was to examine the effect of vanillic acid on the cell viability and melanogenesis in melanocytes damaged by reactive oxygen species (ROS). The human skin melanoma cells (SK-MEL-3) were cultured with various concentrations of hydrogen peroxide $(H_2O_2)$. The cell viability for $H_2O_2$-induced cytotoxicity or vanillic acid against $H_2O_2$ was measured by XTT assay in these cultures. For the effect of vanillic acid on the melanogenesis, the tyrosinase inhibitory activity was measured by colorimetric assay at a wavelength of 490 nm, and melanin synthesis activity were assessed after cells were cultured in the media with or without various cencentrations of vanillic acid. In this study, $H_2O_2$ decreased cell viability dose- and time-dependent manners and $XTT_{50}$ was determined at a concentration of 80 ${\mu}M$, $H_2O_2$. Vanillic acid increased the cell viability dose dependently in human skin melanoma cells damaged by $H_2O_2$-induced cytotoxicity. In the tyrosinase inhibitory activity, vanillic acid supresssed tyrosinase activity in dosedependent manner, and also decreased significantly melanin synthesis activity compared with $H_2O_2$-treated group. From these results. It is suggested that $H_2O_2$-mediated cytotoxicity was highly by the toxic criteria of Borenfreund and Puerner and also, vanillic acid has the protective effect on ROS-induced cytotoxicity and melanogenesis in these cultures.
Journal of Korea Society of Industrial Information Systems
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v.13
no.5
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pp.106-116
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2008
21 century is as time of infinite competition the knowledge base society where the creation knowledge and information become source of competitive power (Knowledge-based society) and the world-wide various nations leads and knowledge intensification of voice and existing industry of knowledge industry leadership grasp of competitive power high position security and world economy it concentrates a hazard national ability from new economic environment inside. Also, world economy the economic border collapsed with opening anger liberalization and the integration of world economy was accelerated and the restraint of advanced nation, pursuit of the late start developing country and competition from the enterprise for strategy helping each other back international market more were aggravating and information and knowledge with production element or the goods were wide in the economic whole and information knowledge revolution which circulates was developed and it followed hereupon and with the vitality where the knowledge base industry growth is new it rose to the surface.
The repeated blasting vibration, which is induced commonly in NATM excavation site, can cause a severe damage to the nearby facilities. It is known that the most effective method for reducing blasting vibration includes the use of electronic detonator, deck charge and change of cut method, and so forth. In order to analyze the effect of blasting vibration reduction, in this study, three-dimensional FDM (Finite Difference Method) program FLAC3D has been used for reflecting the blasting hole, delayed time and charging amount. Also the numerical analysis has been performed by applying a dynamic load to each blasting hole. The cut method has been applied with several methods, such as V-cut and Double-drilled parallel cut, which are common in tunnel construction sites. Also, the field test blasting has been carried out in order to compare the measured data with results of numerical analysis. It was shown that the numerical analysis and the field measurement coincide well.
Kim, Joung Hee;Lee, Syng-Ook;Do, Kook Bae;Ji, Won Dae;Kim, Sun Gun;Back, Young Doo;Kim, Keuk-Jun
Korean Journal of Clinical Laboratory Science
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v.50
no.1
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pp.37-43
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2018
Chamaecyparis obtusa (CO) has recently been attracting attention because of its beneficial effects on skin allergies, atopic dermatitis, and skin diseases, such as acne and eczema. In the present study, the extract from CO leaf grown in Jangseong gun, Jeollanam-do, Korea was evaluated for its anti-oxidant, anti-inflammatory, and anti-allergic effects in vitro. The total polyphenol content of the CO leaf extract was $25.89{\pm}0.31mg$ gallic acid equivalents (GAE)/g. Gas-chromatography mass-spectrometry (GC-MS) analysis revealed the presence of six compounds in the CO leaf extract: ${\alpha}-terpinene$ (3.03 mg/g), ${\alpha}-terpineol$ (9.48 mg/g), limonene (5.96 mg/g), borneol (59.78 mg/g), myrcene (4.85 mg/g), and sabinene (11.31 mg/g). The $RC_{50}$ values of the CO leaf extract for $H_2O_2$ and ABTS radical were $5.47{\pm}0.13mg/mL$ and $4.00{\pm}0.01mg/mL$, respectively. In addition, the CO leaf extract showed significant inhibitory effects on lipopolysaccharide-induced nitric oxide production in RAW 264.7 cells and IgE-induced release of ${\beta}-hexosaminidase$ (degranulation) in mast-cell like RBL-2H3 cells. The cell viability assay showed that the CO leaf extract ($100{\sim}800{\mu}g/mL$) did not affect the viability of human normal skin fibroblast CCD-986sk cells significantly. Overall, these results suggest that the CO leaf extract is a potential functional cosmetic ingredient that can exert anti-oxidant, anti-inflammatory, and anti-allergic effects.
Kim, Hye Soo;Park, Min Jeong;Kim, Soo Jeong;Kim, Bu Kyung;Park, JunHo;Kim, DaeHyun;Cho, Soo Jeong
Journal of Life Science
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v.31
no.2
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pp.229-236
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2021
This study was carried out to evaluate the antioxidant properties of the dried leaves and branches of Stewartia koreana Nakai. The dried leaf and branch of S. koreana were extracted with 70% ethanol at 80℃. The antioxidant activities of ethanol extracts of S. koreana leaf (EESL) and S. koreana branch (EESB) were analyzed. The total polyphenol contents in EESL and EESB were 162.57±0.9 mg of GAEs/extract g and 59.1±0.9 mg of GAEs/extract g, respectively. The flavonoid contents in EESL and EESB were 59.1±0.9 mg of QEs/extract g and 4.7±0.1 mg of QEs/extract g, respectively. EESL showed a better scavenging ability with DPPH and ABTS than EESB, at 0.4 mg/ml. Moreover, EESL were more effective according to ORAC values than EESL. The toxicity of EESL was investigated using a WST-1 assay on the human skin fibroblast cell line CCD-986sk. Therefore, EESL can be used as a potential source of functional, naturally-sourced material in cosmetics as well as food.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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