A bacterial glutathione S-transferase from Pseudomonas sp. DJ77 has been crystallized. The crystals diffract to at least $2.3\;\AA$ resolution, and belong to the orthorhombic space group $P2_{1}2_{1}2_{1}$, with cell parameters $a=97.4\;\AA,\;b=100.3\;\AA$, and $c=46.0\;\AA$. There is one dimer molecule of pGST per crystallographic asymmetric unit. with the crystal volume per protein mass of $2.34\;\AA^3/dalton$ and a solvent content of about 47% (v/v).
To develop effective skin whitening agents, we tested natural herbal extracts for their melanogenic inhibitory activities. Sedum samentosum was selected for its inhibitory effect on melanogenesis in B16 melanoma cells. Ethanolic extract of S. samentosum (SSE) was evaluated for antioxidative effect and tyrosinase inhibitory activity of melanogenesis. We investigated the changes in protein level and mRNA level of tyrosinase, tyrosinase related protein (TRP)-1 and TRP-2 by using western blotting and RT-PCR, respectively. SSE showed scavenging activities of free radicals and reactive oxygen species (ROS) with the $IC_{50}$ of 342.7 $\mug/ml$ against 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical and 64.69 $\mug/ml$ against superoxide radicals in the xanthine/xanthine oxidase system, respectively. SSE treatment suppressed the biosynthesis of melanin up to 46% and reduced tyrosinase activity up to 51% at 100 $\mug/ml$ in B16 melanoma cells. The tyrosinase activity and tyrosinase expression in B16 melanoma cells were reduced in a dose-dependent manner by SSE. Also, SSE was able to significantly inhibit tyrosinase and TRP-1 expression in mRNA level. These results suggest that SSE inhibited melanin production which may be dependent on tyrosinase activity and expression in B16 melanoma cells, and an effective whitening agent for the skin.
Kim, Sun-Young;Nam, Hae-Joo;Kim, Jung-Hee;Cho, Young-Rok;Kang, Yu-Na;Lee, Sang-Sook
The Korean Journal of Cytopathology
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v.10
no.1
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pp.55-60
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1999
Schwannoma is a benign encapsulated nerve sheath tumor and is histologically characterized by a mixture of Antoni type A and B tissue. A preoperative diagnosis of schwannoma by fine needle aspiration cytology or by any other means is important a preserve clinically important nerves. Therefore, it is necessary to make a specific cytological diagnosis of nerve sheath tumor. However, there are a few reports regarding cytological features of schwannoma in Korea. We experienced seven cases of solitary schwannoma and here we report their characteristic cytological features with a review of literatures. The characteristic features of schwannoma on cytology were the presence of both Antonl type A and B tissue. The cytologic findings common to all cases of schwannoma generally corresponded to the histologic findings of Antoni type A tissue, consisting of fragments of tightly cohesive fascicles with variable cellularity. Dense fibrillary substances were found, along with palisading nuclei and Verocay bodies. Individual tumor cells consisted of cohesive cells haying spindle or oval nuclei, with pointed ends and Indistinct cell borders. Variation in nuclear size and shape was also present. The Antoni type B consisted of scattered wavy or short spindle cells and some histiocytes and lymphocytes in the abundant myxoid background with formation of microcysts. Immunohistochemistry for S-100 protein revealed a uniformly strong positive reaction and was helpful to make more accurate diagnosis of schwannoma.
Chae, B.J.;Choi, S.C.;Cho, W.T.;Han, In K.;Sohn, K.S.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.13
no.10
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pp.1440-1444
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2000
Two feeding trials were conducted to evaluate the effects of inclusion levels of dietary vitamin and trace mineral (VTM) premixes on growth and nutrient digestibility in growing pigs. A total of 112 pigs ($24.82{\pm}3.22kg$) were employed for 49 days (exp. 1), and 168 pigs ($21.64{\pm}1.41kg$) for 40 days (exp. 2) in completely randomized block designs. Treatments were: 1) 100%, 2) 150%, 3) 200% and 4) 250% NRC (1998) requirement of VTM in exp. 1, and the ratio of vitamins to trace minerals at 1) 100:100%, 2) 100:150%, 3) 150:100% and 4) 150:150% of NRC (1998) requirement in exp. 2. Basal diets for feeding trials were formulated to contain 3,310 kcal ME/kg and 18% crude protein, and contained 0.25% chromic oxide as an indigestible marker for digestibility trials. Increasing dietary VTM premix in growing pigs had linear and quadratic effects (p<0.05) on ADG, and feed conversion ratio was also improved (p<0.05) as VTM premix was increased by 150-250% of NRC (1998) requirements in exp. 1. Adding vitamin to trace mineral premixes at 150% NRC (1998) over the control improved (p<0.05) ADG and feed efficiency in growing pigs, but performances were not improved by vitamin nor by trace mineral premixes alone (p>0.15) (exp. 2). There were no differences (p>0.05) in the digestibilities of energy, crude protein and fat among dietary treatments. However, increasing dietary VTM premix in growing pigs had a linear effect (p<0.05) on the digestibilities of calcium and phosphorus. The 200 or 250% fed group showed improved (p<0.05) calcium digestibility, and 250% fed group also showed improved (p<0.05) phosphorus digestibility as compared to 100% or 150% fed group (exp. 1). The digestibilities of Ca and P were higher (p<0.05) in 150% addition of vitamins than in 150% addition of trace minerals in the diet (exp. 2).
Background : Differential diagnosis of pleural malignant mesothelioma from secondary metastatic adenocarcinoma is often difficult. A variety of pathologic techniques have been developed to make a differential diagnosis of carcinoma from mesothelioma. Immunohistochemistry detecting diverse antigenic substances such as CEA, Leu-M1, Bn-3, S-100 protein, vimentin, CK and EMA has been claimed to be of value as a panel in the differential diagnosis of adenocarcinoma from mesothelioma. The aim of this study was to investigate the suitable antibodies to distinguish mesothelioma from metastatic adenocarcinoma and establish candidate markers in a panel. Methods : Complete, one-hour immunohistochemical staining using antibodies against cytokeratin (CK), epithelial membrane antigen(EMA), S-100 protein, vimentin, B72-3, Leu-M1, and carcino-embryonic antigen(CEA) was applied to cell blocks from 7 mesotheliomas and 7 adenocarcinomas which were confirmed by electron microscopic and histpathologic methods. Results : All adenocarcinomas and 71.4% of mesotheliomas expressed the cytokeratin and EMA. S-100 protein and vimentin were expressed in 57.1% and 42.9% of mesotheliomas and 14.3% and 28.5% of adenocarcinomas, respectively. B72-3 was expressed in all adenocarcinomas, but in none of mesotheliomas. Leu-M1 was positive in 71.4% of the adenocarcinoma and 14.3% of the mesotheliomas. CEA was positive in all adenocarcinomas and 42.9% of mesotheliomas. Leu-M1 and B72-3 were coexpressed in 71.4% of adenocarcinomas but in none of mesothelioma. B72-3 and CEA were coexpressed in all adenocarcinomas, but in none of mesotheliomas. Conclusion : We concluded that B72-3 immunohistochemistry or panel staining of B72-3 and CEA could be recommanded for the differential diagnosis of pleural mesothelioma from metastatic adenocarcinoma.
Gokulakrishnan, P.;Kumar, R.R.;Sharma, B.D.;Mendiratta, S.K.;Sharma, D.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.25
no.5
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pp.733-737
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2012
Determination of sex origin of cattle meat by fast and reliable molecular methods is an important measure to ensure correct allocation of export refunds particularly in European countries and also female cattle (cow) slaughter is legally banned in India because of religious beliefs. Based on the DEAD box protein gene located on the X and Y chromosomes, 2 pair of primers were designed and the system of PCR was optimized. Upon PCR amplification, male tissue showed 2 bands, while female tissue resulted in only one band. The accuracy and specificity of the primers was assessed using DNA template extracted from cattle meat of known sex. The protocol was subjected to a blind test and showed 100% concordance, proving its accuracy and reliability.
This study was carried out to separate the calcium-binding protein derived from enzymatic hydrolysates of cheese whey protein. CWPs (cheese whey protein) heated for 10 min at $100^{\circ}C$ were hydrolyzed by trypsin, papain W-40, protease S, neutrase 1.5 and pepsin, and then properties of hydrolysates, separation of calcium-binding protein and analysis of calcium-binding ability were investigated. The DH (degree of hydrolysis) and NPN (non protein nitrogen) of heated-CWP hydrolysates by commercial enzymes were higher in trypsin than those of other commercial enzymes. In the result of SDS-PAGE (sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis), $\beta$-LG and $\alpha$-LA in trypsin hydrolysates were almost eliminated and the molecular weight of peptides derived from trypsin hydrolysates were smaller than 7 kDa. In the RP-HPLC (reverse phase HPLC) analysis, $\alpha$-LA was mostly eliminated, but $\beta$-LG was not affected by heat treatment and the RP-HPLC patterns of trypsin hydrolysates were similar to those of SDS-PAGE. In ion exchange chromatography, trypsin hydrolysates were shown to peak from 0.25 M NaCl and 0.5 M NaCl, and calcium-binding ability is associated with the large peak, which was eluted at a 0.25 M NaCl gradient concentration. Based on the results of this experiment, heated-CWP hydrolysates by trypsin were shown to have calcium-binding ability.
A CAB cDNA vector(pKGCAB), encoding the light harvesting chlorophyll a/b binding protein in Korean ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer), was constructed with the CaMV35S promoter of plant expression vector. The chimeric vector was transformed into tobacco(Nicotiana tabacum cv. NC 82) using Agrobacterium tumefaciens LBA 4404 strain, and the transgenic tobacco plant CAB-TP2 was selected. Photosynthetic rates of the CAB-TP2 plant at before-flowering stage were increased about 20% under low irradiance conditions of quantum 100 and 500 $\mu$mol.m$^{-2}$ s$^{-1}$ , however, the rates were similar to those of NC 82 under quantum 1000 and 2000 $\mu$mol.m$^{-2}$ s$^{-1}$ conditions. The plants were germinating under low- or normal irradiance condition and the quantum yield of photosystem III were measured. The differences of the Fv/Em values between conditions were 0.07 and 0.01 in NC 82 and CAB-TP2, respectively. The mature leaves in the position 8-10 of the CAB-TP2 at before-flowering stage revealed l0% higher Fv/Fm values in range of 0.759 to 0.781 and 40% more chlorophyll contents of 70-93mg/$m\ell$ than those of normal NC 82. These data suggest the possibility that the increase in photosynthetic activity of leaves under low light intensity in the canopy of CAB-TP2 transgenic tobacco might lead to increase the quality of lower tobacco leaves.
The baculovirus expression system is a powerful method for producing large amounts of the human erythrocyte-type glucose transport protein, heterologously. Characterization of the expressed protein is expected to show its ability to transport sugars directly. To achieve this, it is a prerequisite to know the properties of the endogenous sugar transport system in Spodoptera frugiperda Clone 21 (Sf21) cells, which are commonly employed as a host permissive cell line to support the baculovirus replication. The Sf21 cells can grow well on TC-100 medium that contains 0.1% D-glucose as the major carbon source, strongly suggesting the presence of endogenous glucose transport system. However, unlike the human glucose transport protein that has a broad substrate and inhibitor specificity, very little is known about the nature of the endogenous sugar transport system in Sf21 cells. In order to characterize further the inhibitor recognition properties of the Sf21 cell transporter, the ability of phloretin, cytochalasin B and D-fructose to inhibit 2-deoxy-D-glucose (2dGlc) transport was examined by measuring inhibition constants $(K_i)$. The $K_i's$ for reversible inhibitors were determined from plots of uptake versus inhibitor concentration. The 2dGlc transport in the Sf21 cells was very potently inhibited by phloretin, the aglucone of phlorizin with a $K_i$ similar to the value of about $2{\mu}M$ reported for inhibition of glucose transport in human erythrocytes. However, the Sf21 cell transport system was found to differ from the human transport protein in being much less sensitive to inhibition by cytochalasin B (apparent $K_i$ approximately $10\;{\mu}M$). In contrast, It is reported that the inhibitor binds the human erythrocyte counterpart with a $K_d$ of approximately $0.12\;{\mu}M$. Interestingly, the Sf21 glucose transport system also appeared to have high affinity for D-fructose with a $K_i$ of approximately 5mM, contrasting the reported $K_m$ of the human erythrocyte transport protein for the ketose of 1.5M.
The purpose of this study was to investigate the component and quality characteristics of green tea. Four kinds of green tea powder obtained from Hwagae area were evaluated the component of carbohydrates, protein crude fat and crude ash. Also the content of ascorbic acid, minerals and polyphenols in green tea powder were evaluated. Quality characteristics of green tea powder was evaluated by Hunter's colur value and sensory evaluation. Green tea was composed of $9.2\~11.8\%$ of moisture, $4.9\~6.1\%$ of crude ash, $5.2\~6.1\%$ of crude fat, $22.5\~26.4\%$ of protein and $50.4\~55.1\%$ of cabohydrates. The content of total ascorbic acid in green tea powder was $312\~392mg/100g$ and dehydiuascorbic acid was $157\~176mg/100g$. The contents of minerals in green tea powder sodium was $340\~580mg/100g$, magnesium was $242\~320mg/100g$, potassium $223\~278mg/100g$ me calcium $145.7\~238.7mg/100g$. Polyphenol content of green tea powder was $7.8\~9.3\%$ which was the highest in A and the lowest in B. Hunters color values of green tea, lightness(L) was $52.3\~69.6$, redness(a) was $0.11\~-5.61$, yellowness(b) was $14.23\~23.34$, which were better in green tea C and D than green tea A and B. From sensory evaluation of green tea powders, green tea D obtained the significant highest scores in color, flavor and overall quality(p<0.05) and followed by green tea C, Green tea powder C and D which have high levels of protein and ascorbic acid were evaluated as good quality in color and sensory evaluation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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