Kim, Young-Sook;Cho, Jun-Mo;Park, Duck-Hwan;Lee, Heung-Goo;Kim, Jeom-Soon;Seo, Sang-Tae;Shin, Kwan-Yong;Hur, Jang-Hyun;Lim, Chun-Keun
The Plant Pathology Journal
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v.15
no.3
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pp.168-171
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1999
Crude extracts of pathogenic Streptomyces turgidiscabies isolates produced necrotic reaction on potato slices. Necrosis was first visible 24 hr after application and increased in severity over several days. However, necrosis was not observed when crude extracts of nonpathogenic strains were applied onto tuber slices. Presence of thaxtomin A from crude extracts of pathogenic S. turgidiscabies was identified by thin layer chromatography and high performance liquid chromatography. Nonpathgenic strains did not produce thaxtomin A in oatmeal broth. Inoculation of potato tuber slices with thaxtomin A partially purified from crude extract of a pathogenic S. turgidiscabies ST5 reproduce necrotic reaction suggesting that thaxtomin A is a pathogenicity determinant in S. turgidiscabies.
Bacterial specs isolated from common scab lesion on potato (Solanum tuberosum L. c.. Dejima) tuber was identified as Streptomyces turgidiscabies. This organism had flexuous spore chains and grey spore mass color, produced melanin pigment on ISP 7, but did not produce on ISP 6. S. turgidiscabies grew on agar media at pH 4.5, used L-arabinose, D-fructose, D-glucose, D-mannitol, raffinose, rhamnose, sucrose, D-xylose and meso-inositol as carbon sources, and was susceptible to 7% NaCl, thallium acetate (10 $\mu\textrm{g}$/ml, 100$\mu\textrm{g}$/ml), crystal violet (0.5 $\mu\textrm{g}$/ml), phenol (0.1%, wt/vol), oleandomycin (100 $\mu\textrm{g}$/ml), and streptomycin (20 $\mu\textrm{g}$/ml).
This study was conducted to clarify developmental characteristics of scab in potato fields in Jeju island, Korea from 1995 to 1999. Occurrence of potato scab increased with repeated cultivaton of potato and high soil pH in the fields. Incidence of the disease was high as 54.8% in the repeatedly cultivated potato fields but relatively low as 20.8~26.3% in the non-cultivated fields and in the fields where barley and Chinese cabbage were formerly cultivated. A total of 66 isolates were obtained from the diseased patato tubers and identified as Streptomyces scabies, S.turgidiscabies and S. acidiscabies. The isolation frequency of each Streptomyces species was 37.7%, 14.8% and 18.0%, respectively. The optimum temperature for mycelial growth of the Streptomyces spp. was $28~30^{\circ}C$, and the optimum pH for that 6~7.
In the course of our screening for biocontrol agent (BCA) against Streptomyces scabiei and S. turgidiscabies causing potato scab using 5,000 actinomtcete isolates, 9 antagonistic strains were selected as BCA candidates through in vitro and in vivo assay. An antagonistic strain, A020645 was highly resistant to some pesticides and antibiotics such as dazomet and mancozeb and showed high control value in vivo. Two bioactive compounds (compound A, B) were purified by anion exchange chromatography, solid phase (ODS) extraction, TLC and reverse phase HPLC. Their chemical structures are now thought to be nucleoside derivative as determined by $^1H-NMR$ data analysis. Their full chemical structures would be elucidated through $^{13}C-NMR$, HMQC and HMBC analyses. Further studies will be focused on fitness in soil and formulation of the BCA candidates.
From 1996 to 1999, potato-growing areas in Korea were surveyed for identification and distribution of potato scab pathogens. Potato scab was widely distributed in the mass cultivation areas, especially in Jriu island, southern areas of Chonnam and Gyounggi provinces, and the alpine area of Gangwon province. Jeju island was the most affected area by this disease. A total of 55 Streptomyces strains were isolated from potato scab lesions, among which 40 strains were pathogenic on progeny tubers. Among the pathogenic strain, 21 strains were identified as previously described S. scabies, 7 Strains as S. turgidiscabies, and 5 Strains as S. acidiscabies, while 7 strains were observed as having distinct phenotypic properties. These strains were classified into six distinct clusters based on phenotypic characteristics and selected representative strains for each cluster. S. scabies (S33) had grey spores in a spiral chain. Mean-while, S. turgidiscabies (S27) had grey spores, S. acidiscabies (S71) had white spores, S. luridiscabiei (S63) had yellow-white spores, S. puniciscabiei (S77) had purple-red spores, and S. niveiscabiei (S78) had thin and compact white spores, all in a rectiflexuous chain. Pathogenicity was determined by the production of thaxtomin A and homologs of necl and ORFtnp genes. In TLC, representative strains S27, S71, S63, S77, and S78 produced a yellow band that co-migrated with the authentic thaxtomin A. However, thaxtomin A was not detected in chloroform extracts from oatmeal broth culture and Slice tuber tissue of S. luridiscabiei (S63) and S. puniciscabiei (S77) by HPLC analysis. In addition, no homologs of necl and ORFtnp genes in S. acidiscabies (S71), S. luridiscabiei (S63), S. puniciscabiei (S77), and S. niveiscabiei (S78) were detected by PCR and Southern hybridization analysis.
Kim, Jeom-Soon;Lee, Young-Gyu;Ryu, Kyoung-Yul;Kim, Jong-Tae;Cheon, Jeong-Uk
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.134.2-135
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2003
The plant-pathogenic species S. scabies, S. acidiscabies, and S. turgidiscabies cause the scab disease of potato and produce the phytotoxins, thaxtomins. necl, a gene conferring a necrogenic phenotype, is involved in pathogenicity and physically linked to the thaxtomin A biosynthetic genes. Identification of the pathogenic strains of Streptomyces from soil was performed through the polymerase chain reaction by using specific pathogenicity primer sets derived from the necl gene sequences of Streptomyces smbies. The DNA was extracted from soil using a bead-beating machine and modifications of the FastPrep system. The DNA was suitable for direct use in the PCR. The PCR products showed the bands of approximately 460 bp. This methods can be very usuful in identifying species responsible for scab diseases and studying on the ecology of plant-pathogenic Streptomyces spp.
Park, Duck-Hwan;Shrestha, Rosemary;Hur, Jang-Hyun;Lim, Chun-Keun
Proceedings of the Microbiological Society of Korea Conference
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2005.05a
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pp.162-165
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2005
Potato scab, an important disease that affects developing tubers, causes a major problem in potato cultivation. The major potato cultivation areas in Korea are located in two Northern provinces, Gangwon and Gyeonggi, and two Southern provinces, Jeju island, and South Jeolla. In these areas, potato scab is widely distributed and has caused severe problem in potato cultivation. Therefore, potato-growing areas were surveyed for identification and distribution of potato scab pathogens from 1996 to 1999. Pathogenic Streptomyces strains were isolated from potato scab lesions and six representative Streptomyces species were characterized based on their phenotypic and molecular characteristics including, pathogenicity, physiological and morphological properties, analyses of 16SrRNA genes and 16S-23S ITS region, DNA relatedness, production of thaxtomin A, and the presence of nec1 and ORFtnp gene homologs. Three species were identified as previously described Streptomyces scabies, S. turgidiscabies, and S. acidiscabies, while other three species having distinct phenotypics properties were identified as novel S. luridiscabiei, S. puniciscabiei, and S. niveiscabiei.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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