Ryu, Jun Hyung;Kim, Hak Jun;Bae, Seung Seob;Jung, Choon Goo;Gong, Seung Pyo
Fisheries and Aquatic Sciences
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제19권2호
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pp.9.1-9.7
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2016
This study was conducted to identify the general conditions for the isolation and in vitro culture of ovary-derived cells in rockfish (Sebastes schlegeli). The effects of three different enzymes on cell retrieval from ovarian tissues were evaluated first, and then the ovary-dissociated cells were cultured under various culture conditions, with varying basal media and culture temperatures, addition of growth factors, and/or culture types. We found that collagenase type I treatment was effective for cell isolation from ovarian tissues. From a total of 42 trials to evaluate the effects of basal media and culture temperatures on cell culture of ovary-dissociated cells, we observed that Leibovitz's L15 medium was more supportive than Dulbecco's modified Eagle's medium for culture, and the cells could grow at all three temperatures tested, 15, 20, and $25^{\circ}C$, at least up to passage 2. However, growth factor addition did not improve cell growth. Introduction of suspension culture after monolayer culture expanded the culture period significantly more than did monolayer culture alone. Our results may provide a basis for developing an in vitro system for S. schlegeli germline cell culture, which will ultimately lead to improvement of the species.
출산 전후의 황점볼락 및 조피볼락 어미의 뇌 조직에서 GtH 분비를 자극하는 신경호르몬으로 알려진 NPY를 검출하기 위해, 면역조직화학을 실시하고 뇌하수체내 GtH 분비세포의 활성을 서로 비교하였다. 두 어종 모두에서 뇌 조직중 NPY 양성반응을 나타내는 세포는 후각망울, 종뇌 및 중뇌에서, 신경섬유는 후각망울, 종뇌, 시각신경, 시상하부, 중뇌 및 시각엽에서 각각 관찰되었다. 뇌하수체내에서 NPY 양성반응을 나타내는 신경섬유는 성숙에 관계없이 두 어종 모두 앞원위부분의 AF 음성세포에 인접한 신경엽에 분포하였고, 성장 및 성숙기의 난모세포를 가진 어체에서는 앞원위부분의 신경엽과 중간원위부분의 GtH 분비세포에 인접한 신경엽에서 관찰되었다. 뇌하수체내의 GtH 분비세포는 출산전의 황점볼락 및 성숙기의 조피볼락 개체에서는 AF 염색성이 약했으나, 출산후 황점볼락 및 조피볼락의 GtH 분비세포는 출산전 및 성숙기에 비해 AF 염색성이 증가하였다. 두 어종에서 출산전 난소를 가진 개체들의 GtH 분비세포와 핵경의 크기는 출산후(황점볼락)이거나 출산 이후 휴지기의 난소를 가진 개체(조피볼락) 보다 유의하게 컸다(P<0.01).
$\beta$-Glucan을 경구 혹은 침지투여하여 조피볼락(Sebastes schlegeli)의 비특이적 방어기작을 향상시켜 세균성 질병에 대한 저항성을 증가시키는 면역자극제로서의 효과를 알아보고자 하였다. $\beta$-Glucan을 사료에 섞어 경구투여하거나 혹은 사육수에 현탁시켜 침지투여한 후 Vibrio ordalii, Staphylococcus epidermidis 및 Edwardsiella tarda를 주사하여 인위감염으로 $\beta$-glucan의 효능을 시험하였다. V. ordalii를 주사한 결과, 1% $\beta$-glucan을 30일 동안 경구투여한 시험구는 25%의 생존율을 보였으나 $\beta$-glucan을 투여하지 않은 대조구는 3일 이내에 모두 폐사하였다. S. epidermidis를 주사한 결과, 20 및 30일 경구투여구는 95%의 높은 생존율을 보였다. 그러나 E. tarda의 인위감염시 전혀 방어효과가 없었다. V. ordalii 사균혼합구 혹은 단독 침지 시험구는 주사 후 10일 동안 전혀 방어효과가 관찰되지 않았다. 이러한 결과로 볼 때 $\beta$-glucan의 경구투여는 S. epidermidis와 V. ordalii에 효과적이나 E. tarda에는 방어효과가 없는 것으로 나타났다.
감성돔, Acanthopagrus schlegeli 정자의 단기보존을 위한 기초자료를 얻기 위하여, 순환여과사육 시스템에서 사육한 전장 $25.9{\pm}1.7cm$, 체중 $292.8{\pm}53.7g$의 성숙한 어미로부터 정액을 채집하여 정자의 액상보존 효과를 조사하였다. 희석액별 단기 액상보존 실험에서 혈청을 사용하였을 때 보존 10일후 정자의 SAI와 생존율은 각각 0.3, $55.6\%$로 가장 좋았으며, 보존 7일후의 감성돔 알에 대한 수정률도 $47.7\%$로 혈청이 가장 좋았다. 정자를 pH $7\~8$의 희석액에서 보존하였을 때 가장 높은 SAI를 보였으며, 정자의 생존율과 SAI를 높이기 위한 항생제로는 neomycine(800ppm)이 효과적인 것으로 나타났다.
Effects of 4-nonylphenol (4-NP) on mixed function oxygenase (MFO) in the kidneies of rockfish (Sebastes schlegeli) were investigated. The cytochrome P45O (CYP) contents and NADPH cytochrome P450 reductase, NADH cytochrome b5 reductase and 7-ethoxyredorufin-O-deethylase (EROD) activities of microsome, glutathione S-transferase (GST) activity of cytosol in rockfish exposed to 4-NP for 7 days using an intraperitoneal injection (25 mg/kg) were quantitatively determined. The GST activity of rockfish exposed to 4-NP were higher, up to 5.2 times higher, than those in the control fish. The activities of NADPH-and NADH-dependent reductases were inhibited. On the other hand, CYP contents and EROD activity of the 4-NP exposed fish demonstrated neither an increasing or decreasing trend.
Seahorses, which have been cultivated since the 2000s, are economically very important. Gas bubble disease (GBD) is a significant concern in the cultivation of seahorses; therefore, this study aimed to determine the cause of GBD-induced death in two species of Syngnathidae (Syngnathus schlegeli and Hippocampus haema). Rod-shaped bacteria were observed histopathologically and identified as Vibrio splendidus by conventional and real-time PCR analyses. The lethality of V. splendidus varies depending on the host's immune status, and the disease can be prevented through water quality management or improvement of the breeding environment. In this study, the GBD lesions (gas bubbles) were observed at 12℃, 8.0 mg/L of dissolved oxygen, 30 ppt of salinity, and pH 7.7. In addition, rod-shaped bacteria, infiltration of inflammatory cells, and extensive serous exudate were confirmed in the lesions where gas bubbles were found. PCR analysis was able to detect V. splendidus, possibly a secondary infection of the immunocompromised syngnathid fish. Understanding the risk of immunity control and the correlation between these lesions and causal agents will be of great help to the aquaculture industry and the ornamental fish market.
해양에 있어서 음향은 수심의 계측, 정보의 전달 등 다양한 분야에서 활용되고 있다. 최근에 들어 와서는 어업에 있어서도 음향을 적극적으로 활용하여 산업에 이용하고자 하는 노력을 하고 있다. 특히 기르는 어업분야에 있어서 식이음(먹이를 먹을 때 나는 소리)등을 이용하여 어류의 행동을 제어하는 기술을 개발하고 있다. 본 연구는 어류의 방성음에 관한 기초적 연구의 일환으로, 우리 나라 남해안에서 주로 서식하고 있는 참돔과 조피볼락을 대상으로 그들이 내는 방성음을 수록하고, FFT분석을 통하여 특성을 파악하였다.
The comparative feeding ecology of greenling Hexagrammos otakii and Schlegel's black rockfish Sebastes schlereli populations was investigated in the Jangbong tidal flat near Incheon, Korea. Monthly samples were taken using a modified otter trawl from November 1999 to January 2001. The stomach contents of 124 greenling and 115 Schlegel's black rockfish were analyzed. The diet of H. otakii was dominated by the amphipods Gammaropsis iaponicus, Caprella scaura, Isaeopsis sp. and Monocorophium acherusicum, the shrimps Latreutes mucronatus and Alpheus japonicus, the mysid Neomysis orientalis and the bivalve Mytilus edulis. In contrast, S. schlegeli mainly fed on the mysids N. orientalis, N japonica, and N. awatschensis, the shrimps Exopalaemon carinicauda, A. japonicus and L. mucronatus, and the fish Pholis fangi and unidentified gobiids. A comparison of the frequency and abundance of food items showed that crustaceans (e.g. amphipods, mysids and shrimps) were important foods for both species. Their main dietary components, however differed which is probably due to differences in the spatial distribution of the two species and their prey items. In conclusion, greenling and Schlegel's black rockfish, despite being sympatric on a tidal flat have distinct food habits and low dietary overlap (Schooner's index: 0.1). These results indicate, to some extent, resource partitioning for the maximum utilization of available foods in the tidal flat.
본 연구는 수온 15, 20 및 25℃에서 조피볼락(Sebastes schlegeli)을 점진적인 저산소 조건에 노출시켜 호흡 대사율이 표준대사율(SMR) 이하로 감소하는 산소포화도, Scrit를 평가하고, 수온별 Scrit 에 4시간 노출 후 혈액 성상의 변화를 조사하기 위하여 실시하였다. 수온 15, 20, 25℃에서 normoxic SMR은 각각 116.5±5.5, 188.6±4.2 및 237.4±6.8 mg O2/kg/hr이었고, 호흡계수(Q10)는 15-20℃ 구간에서는 2.62, 20-25℃에서는 1.58, 그리고 전 수온 범위의 15-25℃에서는 2.04였다. 수온 15, 20 및 25℃에서 Scrit는 각각 22.1±1.2, 30.6±1.5 및 41.9±1.4 %였다. 수온별 Scrit에 4시간 노출 후 혈액 Ht와 Hb 및 혈장 cortisol, glucose, 전해질(Na+, K+, Cl-)과 삼투질 농도는 모든 수온에서 normoxic water의 대조구에 비하여 유의하게 높았다. 수온 15, 20, 25℃의 normoxic water에서는 Ht, Hb 및 혈장 glucose 농도는 15℃에 비하여 20℃와 25℃에서, 혈장 cortisol, 전해질 및 삼투질 농도는 25℃에서 유의하게 높았다. 수온별 Scrit의 저산소에 노출된 조피볼락은 수온이 높을수록 저산소에 의한 어체의 생리적 스트레스는 가중되는 것으로 나타났다.
Nematode infection in the epithelial tissue of cultured rockfish Sebastes schlegeli was first reported in 2012. Since then, nematode infections have caused serious economic losses in rockfish aquaculture on the west coast of Korea. Taxonomic and life cycle information for this parasite are currently unknown. In this study, 18S rRNA and cytochrome c oxidase subunit I (COI) genes were used for molecular identification and polymerase chain reaction (PCR) to detect the invisible stages of this parasite. Nucleotide sequences of the 18S rRNA of the rockfish nematode showed 98% identity with that of Philometra morii. Therefore, this rockfish nematode was classified to the Philometridae family. However, we could not identify it to genus level using 18S rRNA. Its COI nucleotide sequences shared 85% and 82% identities with those of Bursaphelenchus sinensis and Philometra overstreeti, respectively. In addition, two gene-specific primer sets were designed based on the 18S rRNA gene to detect the intermediate host and nematode larvae. These primers were specific to this rockfish nematode without cross-reacting to other pathogens. The detection limit of the PCR assay using these primers was 1,000 copies of nematoda plasmid DNA. Therefore, the PCR assay described here is suitable for the detection of nematode DNA within rockfish. In addition, this PCR assay could be used to detect nematode larvae and the intermediate host.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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