사과 푸른곰팡이병을 방제하기 위하여 사과, 배, 복숭아 등 370점의 과일을 채취하여 과일표면으로부터 세균 1,080균주를 분리하였다. 분리한 1,080균주를 공시 하여 사과 저장병을 일으키는 Penicillium expansum, Alternaria alternata 그리고 Botrytis cinerea을 대상으로 항균활성 및 병 진전억제효과를 검정하여 8종의 길항세균을 선발하였다. 이 들 길항세균에 대한 세균학적 특성과 Biolog system에 의한 영양원 이용성을 조사한 결과 Bacillus amyloliquefaciens가 2균주, B. megaterium, B. subtilis var. gladioli, B. licheniformis, B. pumilus 및 Serratia marcescens로 동정하였다. Glucose, mannose, starch 등 8종의 탄소원을 공시하여 병원균의 생장 및 길항균의 중식에 미치는 영향을 조사한 결과, 병원균의 증식을 억제하고 길항균의 증식을 촉진하는 영양원으로 glucose가 선발되었다. 길항균의 처리효과를 높이기 위하여 길항균 현탁액에 glucose를 1% 첨가하여 사과에 처리한 다음 푸른곰팡이 병균을 $10^5$포자/ml 농도로 처리하였을 때, 병 진전억제효과가 S. marsecens P76-9처리에서 48%, B. amyloliquefaciens P43-2 처리에서 46% 그리고 B. licheniformis P94-1 처리에서 14% 증가되었다. 사과표면의 상처부위에서 처리한 길항균의 밀도변동에 있어서는 Bacillus 속 세균인 B. amyloliquefaciens P43-2과 B. licheniformis P94-1는 처리 후 7일까지 밀도가 증가하다가 처리 후 10일부터는 감소되는 경향이었으며, S. marsecens P76-9는 초기(처리 후 4일)에는 밀도가 감소되다가 처리 후 7일부터 증가되어 처리 후 7일까지도 일정한 수준으로 밀도가 유지되었다.
중금속에 대한 내성을 나타낸 Serratia marcescens를 이용하여 카드뮴 흡착 기작에 관하여 조사하였다. 먼저 카드뮴에 대하여 민감성을 나타내는 돌연변이 균주인 PM을 개발하였으며 PM균주는 50ppm 이상의 카드뮴 농도에서 성장하지 못하였다. 카드뮴을 50ppm 처리한 균주에서 10회 이상 계대 배양하여 카드뮴에 적응을 유도한 PA균주는 PC, PM균주에 비해 성장 속도가 증가하였으며 세포 내 카드뮴 축적량도 4∼5배 증가하였다. PA균주는 100 ppm 카드뮴 처리군에서 처리량 중 23%를 세포내에 축적하였으며 세포막 부위보다 세포질 부위에 더욱 많은 카드뮴을 축적하였다. 카드뮴 처리시, 전 세포 단백질 양상에서 28 KDa과 64 KDa의 2개의 유도 단백질과 45 KDa의 감소 유도 단백질을 확인하였으며 원자 흡광 분석을 통하여 각각의 유도 단백질에 결합된 카드뮴 양은 단백질 1 g당 318.25 ㎍, 325.37 ㎍이 검출되었다. 세포내에 축적된 카드뮴을 전자현미경을 이용하여 카드뮴 결합 물질을 확인한 결과, 세포질의 단백질 분획에서 28 KDa크기의 유도 단백질이 카드뮴과 흡착한 것으로 나타났다. 카드뮴 흡착에 대한 DNA조사 결과 20 Kb 크기의 plasmid가 존재하였으며, curing agent로 plasmid를 제거한 결과 카드뮴 내성을 상실하여 본 분리 균주의 카드뮴 내성 유전자는 plasmid상에 위치하는 것으로 확인하였다.
Studies on the adsorption of four kinds of bacteria, Staphylococcus aureus, Sarcina lutea, Escherichia coli and Serratia marcescens by activated Korean Kaoline have been carried out to innovate utilization as adsosrbent preparations. In connection with particle size and size fraction, the adsorption was examined by colony counting and spectroscopy. Korean kaolin was purified from Hadong white species of preminum grade and three size fractions were derived from passage through BS # 100, #200 and # 325 mesh sieves, respectively. These were activated at $105^{\circ}$or $280^{\circ}$ for three hours and at $550^{\circ}C$ for one hours. The results indicated that the adsorbing power of Korean kaolin was superior for S. aureus and S. lutea, but E. coli and S. marcescens were not adsorbed by clays. The smaller the particle size, the greater was adsorbing power for Gram-positive bacteria. Threre appears to be justification for its investigations as an ingredient in intestinal adsorbent preparations.
The effects of the agitation and aeration rates on the production of serratiopeptidase (SRP) in a 5-L fermentor (working volume 2-l) were systematically investigated using Serratia marcescens NRRL B-23112. The dissolved oxygen concentration, pH, biomass, SRP yield, and maltose utilization were all continuously measured during the course of the fermentation runs. The efficiencies of the aeration and agitation were evaluated based on the volumetric mass transfer coefficient ($K_La$). The maximum SRP production of 11,580 EU/ml with a specific SRP productivity of 78.8 EU/g/h was obtained with an agitation of 400 rpm and aeration of 0.075 vvm, which was 58% higher than the shake-flask level. The $K_La$ for the fermentation system supporting the maximum production (400 rpm, 0.075 vvm) was 11.3 $h^{-1}$. Under these fermentor optimized conditions, kinetic modeling was performed to understand the detailed course of the fermentation process. The resulting logistic and Luedeking-Piret models provided an effective description of the SRP fermentation, where the correlation coefficients for cell growth, SRP formation, and substrate consumption were 0.99, 0.94, and 0.84, respectively, revealing a good agreement between the model-predicted and experimental results. The kinetic analysis of the batch fermentation process for the production of SRP demonstrated the SRP production to be mixed growth associated.
Gyaneshwar, P.;Reddy, Pallavolu M.;Ladha, Jagdish K.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제10권5호
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pp.694-699
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2000
Serratia marcescens IRBG500 and Herbaspirillum seropedicae Z67 grow endophytically in rice. The ability of these bacteria to colonize rice grown under increased nutrient availability was assessed in variety IR72 using strains marked with transposon-based gusA. The endophytic colonization was monitored via bacterial enumeration and histochemical visualization of GUS expression of bacteria in plant tissues. Rhizoplane and endophytic colonization by both bacteria was significantly inhibited in the rice plants grown in the presence of 10 mM $NH_4Cl$. In contrast, the addition of 10 mM $KNO_3$ showed no adverse effect on colonization. Increasing the concentration of $Ca^{2+}$ to 5 mM significantly reduced endophytic colonization by both bacterial strains, whereas the addition of 0.5 mM $Fe^{2+}$ substantially lowered the colonization of roots by S. marcescens IRBG500 but showed no effect on colonization by H. seropedicae Z67. Taken together, these finding suggest that, like in legume-rhizobial symbiosis as well as plant-pathogen interactions, nutrient status, particularly $NH_4^+$ and $Ca^{2+}$ concentrations in the surrounding medium, plays an important role in the regulation of endophytic infection and colonization processes in rice.
A DNA fragment, pCKB13, containing two genes encoding Coenzyme a transferase, was isolated from a genomic DNA library of S. marcescens KCTC 2172. The complete nucleotide sequence of the 2,081-bp BamHI fragment on pCKB13 was determined. Sequencing of the fragment led to the identification of two open reading frames showing high homology with two Coenzyme A (CoA) transferases, Acetoacetyl-CoA transferase (Acot) and Succinyl-CoA transferase (Scot), enzymes catalyzing the reversible transfer of CoA from one carboxylic acid to another. The enzyme activity of Coenzyme A transferase increased after introducing the multicopy of the cloned gene in E. coli. The recombinant protein, overexpressed by multicopy and induction with IPTG, was a polypeptide of 42 kDa, as confirmed by SDS-PAGE. The protein was purified to homogeneity through three sequential chromatographic procedures including ion-exchanged DEAE-sepharose, CM-sepharose, and Mono Q.
Park, Myung-Su;Gadagi, Ravi;Singvilay, Olayvanh;Kim, Chung-Woo;Chung, Hee-Kyung;Ahn, Ki-Sup;Sa, Tong-Min
한국환경농학회지
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제20권5호
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pp.335-339
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2001
Two successive in vitro experiments were carried out to examine the effect of MPS bacterial inoculation on growth, and nitrogen and phosphorus accumulation of maize plants under greenhouse condition in the same soil. There were four treatments, uninoculated control and three phosphate solubilizing bacterial inoculations, viz., Pseudomonas striata, Burkholderia cepacia and Serratia marcescens. The inoculated plants showed the higher plant height, total dry mass, nitrogen and phosphorus accumulation when compared to uninoculated control plants in both experiments. In the combined data analysis from two experiments, the plants inoculated with P. striata and B. cepacia showed significantly higher plant height, total dry mass and P accumulation when compared to S. marcescens inoculated plant and uninoculated control plants. The P. striata and B. cepacia inoculation enhanced total dry matter accumulation by 14% and phosphorus accumulation by 25% over the uninoculated control plants. The nitrogen and phosphorus concentration of maize plants were also increased due to MPS bacterial inoculation, however, the effect was not significant.
N-acyl-homoserine lactone quorum sensing (AHL-QS) has been shown to regulate many physiological behaviors in Serratia marcescens MG1. In the current study, the effects of AHL-QS on the biosynthesis of acid and neutral products by S. marcescens MG1 and its isogenic ${\Delta}swrI$ with or without supplementing exogenous N-hexanoyl-L-homoserine lactone ($C_6-HSL$) were systematically investigated. The results showed that swrI disruption resulted in rapid pH drops from 7.0 to 4.8, which could be restored to wild type by supplementing $C_6-HSL$. Furthermore, fermentation product analysis indicated that ${\Delta}swrI$ could lead to obvious accumulation for acidogenesis products such as lactic acid and succinic acid, especially excess acetic acid (2.27 g/l) produced at the early stage of fermentation, whereas solventogenesis products by ${\Delta}swrI$ appeared to noticeably decrease by an approximate 30% for acetoin during 32-48 h and by an approximate 20% for 2,3-butanediol during 24-40 h, when compared to those by wild type. Interestingly, the excess acetic acid produced could be removed in an AHL-QS-independent manner. Subsequently, quantitative real-time PCR was used to determine the mRNA expression levels of genes responsible for acidogenesis and solventogenesis and showed consistent results with those of product synthesis. Finally, by close examination of promoter regions of the analyzed genes, four putative luxI box-like motifs were found upstream of genes encoding acetyl-CoA synthase, lactate dehydrogenase, ${\alpha}$-acetolactate decarboxylase, and Lys-like regulator. The information from this study provides a novel insight into the roles played by AHL-QS in switching from acidogenesis to solventogenesis in S. marcescens MG1.
Flagellate bacteria such as Escherichia coli or Serratia marcescens possess a remarkable motility system based on a reversible rotary motor. We have employed S. marcescens as microactuators in low Reynolds number fluidic environments to move a larger engineering element around. Microstructures fabricated using conventional microfabrication techniques are blotted on the swarm plate, which leaves a bacterial monolayer on the surface of the microstructure. We have investigated microstructures powered by bacteria to determine how cell orientation on the microstructure surface relates to the swarming patterns as well as how the orientation is affected by the blotting process. This study will help to refine directional control of bacterial transporters by exploiting bacterial sensory mechanisms.
국내 1종만이 분포하고 있는 흰개미(Reticulitermes speratus)의 장으로부터 protease 생성을 나타내는 균주를 분리한 후 그 중 생성이 가장 큰 1균주를 최종 선별하여 동정하고 효소생성을 위한 최적조건을 검토하였다. 형태학적, 생리학적 특성 및 16S rRNA를 조사한 결과 Serratia marcescens로 판명되었으며, S. marcescens strain TM-3215라 명명하였다. 본 균주의 효소생성 최적조건을 조사한 결과 0.8% (w/v) starch, 0.4% (w/v) peptone, 0.08% (w/v) $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, $30^{\circ}C$ 및 pH 8.0에서 가장 높은 효소생성을 나타내었다. 최적조건에서 9시간 배양 후 19.8 U/ml의 효소가 생성되었으며, 이 값은 최적화 이전 배지의 효소생성(11.2 U/ml) 보다 1.8배 높은 값이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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