Culex pipiens pallens에 존재하는 Alkaline phosphatase의 연구를 위한 적정 분석조건과 우화 후, 시간 경과에 따른 Alkaline phosphatase 활성 경향에 대해서 연구하였다. C. pipiens에 존재하는 Alkaline phosphatase의 활성은 우화 직후부터 지속적으로 감소하다가, 흡혈 자극에 의해서 급격하게 증가한다. 흡혈 후 30시간이 경과했을 때, 최대의 활성도를 보이고 감소하나, 흡혈 48시간 이후에는 다시 증가하여 지속적으로 유지됨을 알 수 있다. 기관별 분석에서 첫번째 활성 증가는 중장에서 일어나고, 두번째 활성 증가는 난소에서 일어남을 알 수 있다. 그리고 흡혈 후 30시간된 성체에서는 5개의 동위효소 밴드가 보이는데, 난소에서 ALP-1와 ALP-2가 나타나고, 가슴에서는 ALP-3, ALP-4와 ALP-5가 보인다. 지방체에서는 ALP-4와 ALP-5가, 중장에서는 ALP-3, ALP-4와 ALP-5가 나타남을 알 수 있다. 그리고 흡혈 후 72시간된 성체에서, ALP-1, ALP-2가 동일하게 존재함을 알 수 있다.
Background: The prognostic value of serum alkaline phosphatase (S-ALP) has not been fully validated for nasopharyngeal carcinoma (NPC). Materials and Methods: S-ALP levels were measured in 601 patients newly diagnosed with NPC before radical treatment, and possible associations of these levels with 5-year overall survival (OS) and tumor-free survival (TFS) were explored using univariate and multivariate analyses. Results: Elevated pretreatment S-ALP (>85 U/L) was significantly less frequent among patients classified as T1+2 or stage I+II than among those classified as T3+4 or stage III+IV. Multivariate analysis showed that elevated pretreatment S-ALP (>85 U/L), age, T classification and N stage were independent predictors of poor OS and TFS. Conclusions: Pretreatment S-ALP may be a reliable biomarker to evaluate the long-term prognosis of patients with NPC.
본 연구는 가시여지 잎 에탄올 추출물(ALE) 및 조다당 추출물(ALP)의 면역 활성에 관하여 비교하기 위하여, 선천 및 적응면역에서 중추적인 역할을 수행하는 큰포식세포에 ALE 및 ALP를 처리하여 세포 증식률, 산화질소 분비능, 사이토카인(종양괴사인자, IL-6, $IL-1{\beta}$) 분비능 및 기전 분석을 통한 신호전달에 관하여 관찰하였다. ALE 및 ALP를 큰포식세포에 처리하여 면역활성에 관하여 비교하였을 때, 큰포식세포 면역활성의 바이오-마커인 산화질소, 사이토카인의 분비능 및 iNOS의 세포내 발현이 ALP 처리구에서 유의적으로 증가되는 것으로 관찰되었으며, 기전분석결과, ALP의 처리는 MPAKs의 인산화 및 $NF-{\kappa}B$의 핵내 이동성을 증가시켜 면역활성을 증가시키는 것으로 관찰되었다. 따라서, ALP의 높은 면역활성은 MPAKs의 인산화 및 $NF-{\kappa}B$의 활성과 밀접한 관련이 있는 것으로 판단된다.
Kim, Eun-Ah;Lee, Jeong-Goo;Whang, Mi-Kyung;Park, Hee-Moon;Kim, Jeong-Yoon;Chae, Suhn-Kee;Maeng, Pil-Jae
Journal of Microbiology
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제39권2호
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pp.95-101
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2001
In an effort to develop an efficient expression and secretion system for heterologous proteins in Aspergilius nidulans, the PCR-amplified coding sequence for alkaline pretense (AlpA) of A. oryzae was cloned into a fungal expression vector downstream of A. nidulans aicA (alcohol dehydrogenase) promoter to yield pRAAlp. Transformation of A. nidulans with pRAAlp gave stable transformants harboring various copy numbers (3 to 10) of integrated alpA gene, from among which 6 representatives were selected. On a medium containing 0.8% ammonium sulfate that represses the expression of the host's own pretense, the alcA prumoter-controlled AlpA expression was strongly induced by threonine but repressed by glucose. The level of AlpA secretion was highest (approximately 666 mU/ml) in transformant ALP6 containing the largest copy number integrated alpA. However, the level of AlpA secretion was not necessarily proportional to the copy numbers of the integrated alpA genes. The N-terminal sequence or the secreted mature AlpA was determined to be Gly-Leu-Thr-Thr-Gln-Lys-Ser and its molecular mass to be approximately 34 kDa, indicating that AlpA is properly processed by the removal of 121 N-terminal amino acids.
제초제 paraquat의주된 독성 기전이 인체내 대사과정중 생성되는 superoxide anion radical $(O_{2-})$에 의한 것이라고 최근 보고된 바, 항산화작용을 갖는 taurine을 가지고 paraquat 독성 경감 효과 및 억제 기전에 관한 실험을 하게 되었으며 다음과 같은 결론을 얻게 되었다. 혈액생화학적인자 분석을 종합해 보면 paraquat의 독성 경감효과는 taurine, aloesin, ${\beta}-carotene$ 중 taurine이 가장 우수하였으며, aloesin도 효과가 있는 것으로 나타났다. In vivo에서 taurine은 혈액생화학적 검사에서 paraquat에 의해 유도된 간독성 지표인 sGPT. sGOT치, 신장독성 지표인 BUN, creatinine치 및 조직 손상의 지표인 ALP, MDA치를 정상으로 회복시켰다. 폐조직중의 MDA량, ALP 활성 및 collagen 량이 정상치로 회복이 되었다. 이로써 taurine은 paraquat의 폐독성 및 각 장기의 독성을 효과적으로 경감 시켜 준다는 사실을 확인할 수 있었다.
Chicken calvarial bone is known to contain various cell types, but their exact composition is unknown. By characterizing the chicken calvarial bone biochemically, it can be used to study biochemical, histochemical actions of bone cells in general. Calvaria of 18-day-old white leg horn embryo was aseptically dissected and bone cell populations were isolated by sequential enzymatic digestion. Histochemical study for osteoclast-like bone cell. population was performed with tartrate resistant acid phosphatase(TRAP) stain and for osteoblast-like bone cell population, alkaline phosphatase(ALP) stain was performed. Biochemical study for osteoblast-like bone cell population was performed using alkaline phosphatase(ALP) assay. Following conclusions were obtained from this study. 1. TRAP positive multi and mononuclear cells were mostly observed in group I and II, indicating that osteoclast-like bone cell population is mostly found in these groups. 2. All the cultured groups showed almost equal ALP activities and were positive for ALP stain, indicating that osteoblast-like bone cell population is evenly dispersed in all culture groups. 3. Experimental group treated with $1,25(OH)_{2}D_3$ showed increase in ALP activity in contrast to the control group, confirming previous studies that $1,25(OH)_{2}D_3$ increases ALP activities in in vitro bone cultures. 4. Results from von Kossa's stain indicated that in vitro bone formation had occured after 3 weeks of culture with beta-glycero phosphate.
Several growth factors and polypeptides are not commonly yet used for regenerators of bone tissue or alveolar bone because of the insufficiency of studies on their side effects, genetic engineering for mass production and stability for clinical application. Recently, many herbal medicines, which have advantage of less side effects and possibility of long-term use, have been studied for their capacity and effects of anti-bacterial, antiinflammatory and regenerative potential of periodontal tissues. Morindae Radix, Cibotium Barometz (L.), Albizziae Cortex, Cistandhis Herba have been traditionally used as medicines for treatment of bone disease in Eastern medicine. The objective of the present study is to examine the ability of alkaline phosphatase (ALP) activity of human fetal osteoblast (hFOB1) when several natural medicines were supplemented. hFOB1 were cultured with Dulbecuo's Modified Eagle's Medium Nutrient Mixture F-12 HAM ( DMEM/F-12 1:1 Mixture, Sigma, USA) and negative control, dexamethasone (positive control), and each natural medicines for 3 days. And then ALP activity was measured by spectrophotometer for enzyme activity and Alizarin red S staining for morphometry. Among the natural medicines of this study, Morindae Radix, Cibotium Barometz (L.) and Cistanchis Herba induced higher activity of ALP synthesis than negative controls in all experimental group. Albizziae Cortex showed mild increases than negative control group. According to measurement of positively stained area, all of the natural medicines of this study increased compared to negative control. Especially, Cibotium Barometz (L.) and Cistanchis Herba showed statistical significance compared to negative control (p<0.05). These results indicate that Morindae Radix, Cibotium Barometz (L.), Albizziae Cortex, Cistandhis Herba have an inducing ability of ALP synthesis on osteoblast.
$\beta$-glycerophosphate는 치수의 상아모세포 분화를 촉진하는 물질이다. Portland cement는 수중에서 장기간에 걸쳐 용해되기 때문에 $\beta$-glycerophosphate을 혼합한 Portland cement는 수산화칼슘과 함께 $\beta$-glycerophosphate를 장기간 용출하게 된다. 본 실험에서는 $\beta$-glycerophosphate을 혼합한 Portland cament에 대한 인간치수세포의 반응을 알아보았다. 인간 치수 세포에 대한 $\beta$-glycerophosphate의 효과를 알아보기 위해 다양한 농도의 $\beta$-glycerophosphate와 dexamethasone에 대한 인간 치수 세포의 ALP activity을 측정하였고 alizarin red S로 염색하여 관찰하였다. $\beta$-glycerophosphate가 다양한 농도(10 mM, 100 mM, 1 M)로 혼합된 Portland cement에 대한 인간 치수 세포의 MTS assay, ALP activity를 측정하고 SEM으로 관찰하였다. 치수세포의 석회화 정도를 관찰한 연구에서 $\beta$-glycerophosphate와 dexamethasone 단독으로 적용하였을 때 거의 효과가 없었으나 5 mM $\beta$-glycerophosphate와 100 nM dexamethasone을 혼합 적용하였을 때 가장 높은 ALP acticity를 보였다. 분화제를 첨가하거나 첨가하지 않은 모든 실험군에서 치수세포에 대한 독성은 관찰되지 않았으며 Portland cement에 10 mM $\beta$-glycerophosphate을 혼합한 시편의 ALP activity가 대조군에 비교하여 가장 많이 증가하였다. 결론적으로 $\beta$-glycerophosphate이 혼합된 Portland cement는 세포 독성이 없으며 첨가물이 없는 Portland cement에 비해 치수 분화 및 석회화를 더 많이 일으키므로 임상적으로 $\beta$-glycerophosphate을 혼합한 Portland cement 적용은 재료 하방에 더 많은 상아질을 형성시킬 것으로 추측된다.
Paraquat is a useful nonselective herbicide widely used throught the world. However accidental or intentional ingestion of the herbicide cause fatal pulmonary injuring. But there is not suitable antidote of paraquat intoxication and therapeutic agents now be used are not effective. So, in this study we intended to evaluate the inhibitory effects of acetylmannan from Dioscorea batalas on paraquat toxicity. 100mg/kg acetylmannan from wild or cultured Dioscorea bataras was administered orally to male SD rats for 3 days and the administration time interval was 24hours. After one hour of final administration, 50mg/kg paraquat was administered intraperitonially. After 24 hours, the biochemical parameters of blood and tissues were examined. In paraquat treated groups, sGPT, BUN, creatinine, ALP levels were increased by 2 to 4 times of normal values. However in acetylmannan from wild Dioscorea batatas treated groups, sGPT, BUN, creatinine, ALP levels in blood and lung tissue were significantly decreased to normal levels. In acetylmannan from cultured Dioscorea batatas treated groups, BUN, creatinine were significantly decreased to normal values, but not in sGPT, ALP levels. Therefore, we concluded that acetylmannan from wild Dioscorea batatas can be used as an. antidote of paraquat toxicity.
The aim of this study was to investigate whether Monascus-fermented soybean extracts (MFSE) containing natural estrogen-like compounds such as isoflavones and mevinolins has potential effects on human osteoblast-like SaOS2 cells using 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and alkaline phophatase (ALP) assaies. MFSE exerted biphasic dose-dependent effect; stimulating osteoblastic activity at low concentrations and inhibiting SaOS2 cells viability at high concentrations. At $10^{-8}-10^{-4}\;mg/mL$, MFSE is not only non-cytotoxic but also induced comparatively high ALP activity on SaOS2 cells. ALP activity (%) significantly increased (220.1%, p<0.05) when SaOS2 cells were treated with MFSE at a concentration of $10^{-5}\;mg/mL$, whereas slowly increased (185.6%, p<0.05) in unfermented soybean extracts (UFSE) at $10^{-3}\;mg/mL$. The potentially greater ALP activity of MFSE compared to the UFSE might partially be caused by its mevinolin, which was derived from the soybean during Monascus-fermentation. Our findings indicate that supplementation of MFSE may accelerate the speed of intracellular ALP synthesis by the bone cells when provided at optimal dosages.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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