The gastrointestinal (GI) tract of ruminants contains diverse microbes that ferment various feeds ingested by animals to produce various fermentation products, such as volatile fatty acids. Fermentation products can affect animal performance, health, and well-being. Within the GI microbes, the ruminal microbes are highly diverse, greatly contribute to fermentation, and are the most important in ruminant nutrition. Although traditional cultivation methods provided knowledge of the metabolism of GI microbes, most of the GI microbes could not be cultured on standard culture media. By contrast, amplicon sequencing of 16S rRNA genes can be used to detect unculturable microbes. Using this approach, ruminant nutritionists and microbiologists have conducted a plethora of nutritional studies, many including dietary interventions, to improve fermentation efficiency and nutrient utilization, which has greatly expanded knowledge of the GI microbiota. This review addresses the GI content sampling method, 16S rRNA gene amplicon sequencing, and bioinformatics analysis and then discusses recent studies on the various factors, such as diet, breed, gender, animal performance, and heat stress, that influence the GI microbiota and thereby ruminant nutrition.
This study was conducted to determine the effect of lysozyme addition on in vitro rumen fermentation and to identify the lysozyme inclusion rate for abating methane ($CH_4$) production. An in vitro ruminal fermentation technique was done using a commercial concentrate to rice straw ratio of 8:2 as substrate. The following treatments were applied wherein lysozyme was added into 1 mg dry matter substrate at different levels of inclusion: Without lysozyme, 2,000, 4,000, and 8,000 U lysozyme. Results revealed that, lysozyme addition had a significant effect on pH after 24 h of incubation, with the highest pH (p<0.01) observed in 8,000 U lysozyme, followed by the 4,000 U, 2,000 U, and without lysozyme. The highest amounts of acetic acid, propionic acid (p<0.01) and total volatile fatty acid (TVFA) (p<0.05) were found in 8,000 U after 24 h of incubation. The $CH_4$ concentration was the lowest in the 8,000 U and the highest in the without lysozyme addition after 24 h of incubation. There was no significant differences in general bacteria, methanogen, or protozoan DNA copy number. So far, addition of lysozyme increased the acetate, propionate, TVFA, and decreased $CH_4$ concentration. These results suggest that lysozyme supplementation may improve in vitro rumen fermentation and reduce $CH_4$ emission.
Ku, Bum Seung;Mamuad, Lovelia L.;Kim, Seon-Ho;Jeong, Chang Dae;Soriano, Alvin P.;Lee, Ho-Il;Nam, Ki-Chang;Ha, Jong K.;Lee, Sang Suk
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.26
no.6
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pp.804-811
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2013
The effects and significance of ${\gamma}$-amino butyric acid (GABA) producing bacteria (GPB) on in vitro rumen fermentation and reduction of biogenic amines (histamine, methylamine, ethylamine, and tyramine) using corn meal as a substrate were determined. Ruminal samples collected from ruminally fistulated Holstein cows served as inoculum and corn was used as substrate at 2% dry matter (DM). Different inclusion rates of GPB and GABA were evaluated. After incubation, addition of GPB had no significant effect on in vitro fermentation pH and total gas production, but significantly increased the ammonia nitrogen ($NH_3$-N) concentration and reduced the total biogenic amines production (p<0.05). Furthermore, antioxidation activity was improved as indicated by the significantly higher concentration of superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-Px) among treated samples when compared to the control (p<0.05). Additionally, 0.2% GPB was established as the optimum inclusion level. Taken together, these results suggest the potential of utilizing GPB as feed additives to improve growth performance in ruminants by reducing biogenic amines and increasing anti-oxidation.
The aim of this study was to investigate the effects of Korean rice wine residue (RWR) on the growth performance and blood profiles of Hanwoo steers in the fattening stage. In situ and in vivo experiments were conducted to analyze rumen fermentation characteristics and total tract digestibility, respectively. Three cannulated Hanwoo steers (mean body weight: 448 ± 30 kg) were used in both analyses. The growth performance of 27 experimental animals in the fattening stage (initial body weight: 353.58 ± 9.76 kg) was evaluated after 13 months of feeding. The animals were divided into three treatment groups (n = 9/group). The treatments comprised total mixed ration (TMR) only (CON), TMR + 10% RWR (10% RWR), and TMR + 15% RWR (15% RWR). The diets of equal proportions were fed daily at 08:00 and 18:00 h based on 2% of the body weight. The animals had free access to water and trace mineral salts throughout the experiment. Supplementation of 15% RWR significantly decreased (p < 0.05) the rumen fluid pH compared with the control treatment, but there was no significant difference in the total volatile fatty acid concentration. It also significantly increased (p < 0.05) dry matter digestibility compared with the other treatments. The total weight gain and average daily gain of the animals in the RWR-supplemented groups were significantly higher (p < 0.05) than those in the control group. Furthermore, the feed intake and feed efficiency of the RWR-supplemented groups were higher than those of the control group. Supplementation of RWR did not affect the alcohol, albumin, glucose, total cholesterol, triglyceride, and low-density lipoprotein concentrations, and aspartate aminotransferase and alanine transaminase activities in the blood; these parameters were within the normal range. The high-density lipoprotein and creatinine concentrations were significantly higher in the 15% RWR group, whereas the blood urea nitrogen concentration was significantly higher in the 10% RWR group than in the other groups. These results suggest that TMR with 15% RWR can serve as an alternate feed resource for ruminants.
5-Hydroxytryptamine (5-HT), a monoamine, as a local regulator in the mammary gland is a chemical signal produced by the mammary epithelium cell. In cows, studies have shown that 5-HT is associated with epithelial cell apoptosis during the degenerative phase of the mammary gland. However, studies in other tissues have shown that 5-HT can effectively promote cell viability. Whether 5-HT could have an effect on mammary cell viability in dairy cows is still unknown. The purpose of this study was to determine: (1) effect of 5-HT on the viability of bovine mammary epithelial cells and its related signaling pathways, (2) interaction between prolactin (PRL) and 5-HT on the cell viability. The bovine mammary alveolar cell-T (MAC-T) were cultured with different concentrations of 5-HT for 12, 24, 48 or 72 hours, and then were assayed using cell counting kit-8, polymerase chain reaction (PCR) and immunobloting. The results suggested that 20 μM 5-HT treatment for 12 or 24 h promote cell viability, which was mainly induced by the activation of 5-HT receptor (5-HTR) 1B and 4, because the increase caused by 5-HT vanished when 5-HTR 1B and 4 was blocked by SB224289 and SB204070. And protein expression of mammalian target of rapamycin (mTOR), eukaryotic translation elongation factor 2 (eEF2), janus kinase 2 (JAK2) and signal transducer and activator of transcription 5 (STAT5) were decreased after blocking 5-HT 1B and 4 receptors. When MAC-T cells were treated with 5-HT and PRL simultaneously for 24 h, both the cell viability and the level of mTOR protein were significantly higher than that cultured with 5-HT or PRL alone. In conclusion, our study suggested that 5-HT promotes the viability of MAC-T cells by 5-HTR 1B and/or 4. Furthermore, there is a reciprocal relationship between PRL and 5-HT.
Kim, Seon-Ho;Mamuad, Lovelia L.;Jeong, Chang-Dae;Choi, Yeon-Jae;Lee, Sung Sill;Ko, Jong-Youl;Lee, Sang-Suk
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.26
no.12
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pp.1698-1707
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2013
Optimization of the dietary formulation is the most effective way to reduce methane. Nineteen feed ingredients (brans, vegetable proteins, and grains) were evaluated for their potential to generate methane and change methanogen diversity using an in vitro ruminal fermentation technique. Feed formulations categorized into high, medium and low production based on methane production of each ingredient were then subjected to in vitro fermentation to determine the real methane production and their effects on digestibility. Methanogen diversity among low, medium and high-methane producing groups was analyzed by PCR-DGGE. The highest methane production was observed in Korean wheat bran, soybean and perilla meals, and wheat and maize of brans, vegetable protein and cereal groups, respectively. On the other hand, corn bran, cotton seed meal and barley led to the lowest production in the same groups. Nine bacteria and 18 methanogen 16s rDNA PCR-DGGE dominant bands were identified with 83% to 99% and 92% to 100% similarity, respectively. Overall, the results of this study showed that methane emissions from ruminants can be mitigated through proper selection of feed ingredients to be used in the formulation of diets.
The effects of Lactobacillus mucosae (L. mucosae), a potential direct fed microbial previously isolated from the rumen of Korean native goat, on the rumen fermentation profile of brewers grain were evaluated. Fermentation was conducted in serum bottles each containing 1% dry matter (DM) of the test substrate and either no L. mucosae (control), 1% 24 h broth culture of L. mucosae (T1), or 1% inoculation with the cell-free culture supernatant (T2). Each serum bottle was filled anaerobically with 100 mL of buffered rumen fluid and sealed prior to incubation for 0, 6, 12, 24, and 48 h from which fermentation parameters were monitored and the microbial diversity was evaluated. The results revealed that T1 had higher total gas production (65.00 mL) than the control (61.33 mL) and T2 (62.00 mL) (p<0.05) at 48 h. Consequently, T1 had significantly lower pH values (p<0.05) than the other groups at 48 h. Ammonia nitrogen ($NH_3$-N), individual and total volatile fatty acids (VFA) concentration and acetate:propionate ratio were higher in T1 and T2 than the control, but T1 and T2 were comparable for these parameters. Total methane ($CH_4$) production and carbon dioxide ($CO_2$) were highest in T1. The percent DM and organic matter digestibilities were comparable between all groups at all times of incubation. The total bacterial population was significantly higher in T1 (p<0.05) at 24 h, but then decreased to levels comparable to the control and T2 at 48 h. The denaturing gradient gel electrophoresis profile of the total bacterial 16s rRNA showed higher similarity between T1 and T2 at 24 h and between the control and T1 at 48 h. Overall, these results suggest that addition of L. mucosae and cell-free supernatant during the in vitro fermentation of dried brewers grain increases the VFA production, but has no effect on digestibility. The addition of L. mucosae can also increase the total bacterial population, but has no significant effect on the total microbial diversity. However, inoculation of the bacterium may increase $CH_4$ and $CO_2$ in vitro.
This study aimed to investigate the effects of Kimchi cabbage by-products either treated or untreated with calcium oxide (CaO) and alkaline hydrogen peroxide (AHP) as substitutional ingredient of total mixed ration (TMR) on in vitro fermentation, in situ disappearance and growth performance of Holstein steers. Cannulated Holstein (600 ± 47 kg) was used for both the in vitro and in situ experiments. The treatments used were TMR only (CON), TMR + 30% Kimchi cabbage by-products fresh matter (FM) basis (TC), TMR + 30% Kimchi cabbage by-products FM basis + 5% CaO FM basis (TCC), and TMR + 30% Kimchi cabbage by-products FM basis + 5% CaO FM basis + 3.22% AHP FM basis (TCCA). For in vivo experiment, thirty-four Holstein steers (273 ± 45 kg) were subjected to a 150-day feeding trial, divided into two groups: CON and TC. In the in vitro experiment, pH of TCCA was greatest (p < 0.05) among other treatments at all incubation times. Ammonia nitrogen and volatile fatty acid concentrations were not significantly different for each treatment. However, butyrate was greater (p < 0.05) in TCC and CON than in both TC and TCCA. During in situ experiment, the dry matter (DM) disappearance was greatest (p < 0.05) in TCCA among other treatments. Also, disappearance of neutral detergent fiber (NDF) and acid detergent fiber (ADF) were observed greatest (p > 0.05) in TCCA treatment. In the in vivo experiment, average daily gain (ADG) did not differ between CON and TC. In blood profile analysis, alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, glucose, total cholesterol, high-density lipoprotein cholesterol, low-density lipoprotein cholesterol, and total protein concentration were not significantly different between treatments. But, creatinine concentration was greater (p < 0.05) in TC than in CON. Overall results suggest that Kimchi cabbage by-products either treated or untreated with CaO and AHP can be used as substitutional ingredient in TMR for Holstein steers.
The somatotropic (GH-IGF-I) axis consists of many hormonal and nutritional factors that control GH release from the somatotrophs in the anterior pituitary. The GH-releasing substances are GHRH and GHS (GHRP or ghrelin), while the GH release-inhibiting substances are somatostatin (SRIF), insulin-like growth factor-I (IGF-I), leptin and glucocorticoids. However, there is evidence showing that nutrition is involved in the control of the somatotropic axis. In addition, weaning is a drastic event for neonates because their alimentary and endocrine circumstances are changed due to the switch, even if gradual, from a liquid milk diet to one composed of such solids as hay and grains. The biological role of ghrelin is one of the hormonal factors that have been focused on ever since ghrelin was discovered at the end of the last century. A 27-amino acid peptide that is mainly synthesized and released from the abomasum epithelium, ghrelin has not been fully evaluated in relation to the somatotropic axis of the ruminant. It has also proven difficult even to investigate the cellular mechanisms of ghrelin action, because this hormone exerts animal-species-dependent actions via a complex set of intracellular signaling pathways. This is also the case for the action of leptin. Another substance, IGF-I, shows a partial inhibitory action on GH secretion in the ruminant. The effect of nutrition is also different among animal species. This is evident by the fact that undernutrition suppresses the circulating GH levels in rodents, but increases it in ruminants and humans. Recently, weaning has been shown to change the postprandial GH responses in ruminants; milk feeding increases, but hay and concentrate feeding suppress, the postprandial circulating GH levels. Even if the postprandial GH level is increased, the ghrelin level is decreased by milk feeding. Macronutrients also possess stimulatory and inhibitory actions on GH secretion in vivo and in vitro. These findings indicate the complexity of the control mechanisms of the somatotropic axis. In the present review, we summarize recent findings on the factors controlling the axis of the ruminant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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